基于納米分辨單分子/粒子定位的細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-12 00:02
脂筏是流動(dòng)于細(xì)胞質(zhì)膜上富含神經(jīng)鞘脂和膽固醇的納米結(jié)構(gòu),對(duì)于正常細(xì)胞功能和生命活動(dòng)非常重要。傳統(tǒng)的生物化學(xué)分離法對(duì)脂筏的提取分離復(fù)雜而且間接,實(shí)驗(yàn)本身更可能改變脂筏的特性。脂筏結(jié)構(gòu)的尺寸只有10200 nm,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了常規(guī)光學(xué)顯微鏡的分辨極限。近年來(lái),超分辨熒光顯微術(shù)的發(fā)展突破了光學(xué)衍射極限的限制,達(dá)到了橫向(x,y)1020 nm,縱向(z)2050 nm的空間分辨率,為人們研究細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)提供了強(qiáng)有力的工具。本論文針對(duì)細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)成像開(kāi)展實(shí)驗(yàn)和方法研究;趩畏肿/粒子定位納米分辨顯微成像技術(shù),實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)的超分辨納米成像;對(duì)不同細(xì)胞系脂筏結(jié)構(gòu)進(jìn)行了納米圖像結(jié)果的比較;獲取了正常細(xì)胞與異常細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)納米圖像的差異性特征。此外,為了進(jìn)一步獲得細(xì)胞脂筏上的三維動(dòng)態(tài)納米特征及實(shí)現(xiàn)全細(xì)胞范圍內(nèi)脂筏各分子的動(dòng)態(tài)追蹤,提出了一種大景深多粒子動(dòng)態(tài)追蹤方法,理論驗(yàn)證了該方法可以實(shí)現(xiàn)10μm景深范圍的多粒子同時(shí)三維納米分辨定位及追蹤。本論文的主要研究工作如下:1.對(duì)實(shí)驗(yàn)室自行搭建的單分子/粒子定位超分辨成像系統(tǒng)的三維分辨率進(jìn)行了...
【文章來(lái)源】:深圳大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 引言
1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和分析
1.2.1 單分子/粒子定位納米分辨成像技術(shù)
1.2.2 三維納米分辨顯微成像技術(shù)
1.2.3 大景深多粒子追蹤技術(shù)
1.3 本論文的主要研究?jī)?nèi)容
第2章 單分子/粒子定位的納米分辨成像技術(shù)
2.1 隨機(jī)光學(xué)重建顯微術(shù)的基本原理
2.2 三維隨機(jī)光學(xué)重建顯微術(shù)
2.3 實(shí)時(shí)主動(dòng)軸向防偏移系統(tǒng)
2.4 本章小結(jié)
第3章 三維隨機(jī)重建顯微術(shù)對(duì)細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)的研究
3.1 單分子/粒子定位超分辨成像系統(tǒng)
3.1.1 系統(tǒng)結(jié)構(gòu)
3.1.2 系統(tǒng)的三維分辨能力
3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
3.3.1 封片液的PH值
3.3.2 培養(yǎng)基溶液
3.3.3 曝光時(shí)間
3.3.4 激光功率
3.3.5 漂移矯正
3.4 不同細(xì)胞系的脂筏結(jié)構(gòu)
3.5 正常細(xì)胞與異常細(xì)胞的脂筏結(jié)構(gòu)
3.6 本章小結(jié)
第4章 細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)追蹤方法研究
4.1 基于彎曲光柵多焦面并行成像的景深擴(kuò)展
4.1.1 彎曲光柵的理論基礎(chǔ)
4.1.2 彎曲光柵在成像系統(tǒng)中的應(yīng)用
4.2 基于雙物鏡雙焦面探測(cè)的三維納米分辨定位
4.2.1 離焦圖像的衍射分析
4.2.2 雙焦面法三維單粒子追蹤
4.2.3 雙物鏡探測(cè)實(shí)現(xiàn)雙焦面法三維納米分辨定位
4.3 基于彎曲光柵與雙物鏡探測(cè)的大景深三維納米定位及追蹤
4.3.1 系統(tǒng)設(shè)計(jì)
4.3.2 系統(tǒng)模擬
4.4 實(shí)驗(yàn)方案
4.5 本章小結(jié)
第5章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3225530
【文章來(lái)源】:深圳大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 引言
1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和分析
1.2.1 單分子/粒子定位納米分辨成像技術(shù)
1.2.2 三維納米分辨顯微成像技術(shù)
1.2.3 大景深多粒子追蹤技術(shù)
1.3 本論文的主要研究?jī)?nèi)容
第2章 單分子/粒子定位的納米分辨成像技術(shù)
2.1 隨機(jī)光學(xué)重建顯微術(shù)的基本原理
2.2 三維隨機(jī)光學(xué)重建顯微術(shù)
2.3 實(shí)時(shí)主動(dòng)軸向防偏移系統(tǒng)
2.4 本章小結(jié)
第3章 三維隨機(jī)重建顯微術(shù)對(duì)細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)的研究
3.1 單分子/粒子定位超分辨成像系統(tǒng)
3.1.1 系統(tǒng)結(jié)構(gòu)
3.1.2 系統(tǒng)的三維分辨能力
3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
3.3.1 封片液的PH值
3.3.2 培養(yǎng)基溶液
3.3.3 曝光時(shí)間
3.3.4 激光功率
3.3.5 漂移矯正
3.4 不同細(xì)胞系的脂筏結(jié)構(gòu)
3.5 正常細(xì)胞與異常細(xì)胞的脂筏結(jié)構(gòu)
3.6 本章小結(jié)
第4章 細(xì)胞脂筏結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)追蹤方法研究
4.1 基于彎曲光柵多焦面并行成像的景深擴(kuò)展
4.1.1 彎曲光柵的理論基礎(chǔ)
4.1.2 彎曲光柵在成像系統(tǒng)中的應(yīng)用
4.2 基于雙物鏡雙焦面探測(cè)的三維納米分辨定位
4.2.1 離焦圖像的衍射分析
4.2.2 雙焦面法三維單粒子追蹤
4.2.3 雙物鏡探測(cè)實(shí)現(xiàn)雙焦面法三維納米分辨定位
4.3 基于彎曲光柵與雙物鏡探測(cè)的大景深三維納米定位及追蹤
4.3.1 系統(tǒng)設(shè)計(jì)
4.3.2 系統(tǒng)模擬
4.4 實(shí)驗(yàn)方案
4.5 本章小結(jié)
第5章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào):3225530
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