ZIKA病毒是一種蚊媒傳播的黃病毒,自2007年起在全球范圍內(nèi)相繼發(fā)生了幾起大規(guī)模的ZIKA病毒感染的疫情,盡管大多數(shù)患者病毒感染癥狀較輕,但依然有部分案例證明ZIKA病毒感染與胎兒小頭畸形、格林巴利綜合癥有關(guān),已成為國際關(guān)注的公共衛(wèi)生事件。目前ZIKA病毒感染既沒有有效治療的方法,又沒有供臨床使用的疫苗。因此應(yīng)對ZIKA病毒感染的策略主要集中在預(yù)防感染,研發(fā)一種安全有效的疫苗此時就顯得格外重要。包膜糖蛋白即E蛋白,是ZIKA病毒三種結(jié)構(gòu)蛋白之一,其生物學(xué)功能是參與受體的結(jié)合、膜融合以及宿主免疫識別的主要成分。E蛋白常作為開發(fā)針對ZIKA病毒感染的保護性抗體時的靶向蛋白。本實驗的目的主要是表達純化ZIKA病毒E蛋白,并用特異性抗體檢測蛋白是否具有免疫原性。擴增E蛋白膜外區(qū)基因并克隆到原核表達載體pET-28a上,成功構(gòu)建了原核重組質(zhì)粒pET-28a-ZIKA-E80,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21（DE3）感受態(tài)細胞,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,蛋白以包涵體的形式表達在沉淀中。先用8M尿素對包涵體進行變性后,再鎳柱親和層析純化變性蛋白,得到純度較高的重組蛋白,后又通過濃度梯度透析法緩慢去除變性... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ZIKA病毒基因組結(jié)構(gòu)

ZIKA病毒關(guān)鍵免疫原蛋白的制備及DNA疫苗的初步研究4（見圖1.4）。圖1.2未成熟（左）和成熟（右）ZIKA病毒體的示意圖[28]圖1.3ZIKA病毒表面的E二聚體的人字形排列的表面表示[28]圖1.4ZIKA病毒的生命周期[29]1.2ZIKA病毒疫苗研究概況

ZIKA病毒關(guān)鍵免疫原蛋白的制備及DNA疫苗的初步研究4（見圖1.4）。圖1.2未成熟（左）和成熟（右）ZIKA病毒體的示意圖[28]圖1.3ZIKA病毒表面的E二聚體的人字形排列的表面表示[28]圖1.4ZIKA病毒的生命周期[29]1.2ZIKA病毒疫苗研究概況

【參考文獻】：
期刊論文
[1]結(jié)締組織病肺間質(zhì)病相關(guān)自身抗原人殺菌/滲透增強蛋白B1蛋白原核表達體系的建立[J]. 郭林紅,張卓莉,周煒.  中華風(fēng)濕病學(xué)雜志. 2019 (07)
[2]雞HNF4α蛋白片段的原核表達與純化[J]. 陳玨,郁建鋒,王中亮,顧志良.  中國家禽. 2019(03)
[3]寨卡病毒prM蛋白原核表達及其多克隆抗體制備[J]. 陳家鋒,丁晨曦,郭曉璐,胡丹,龔秀芳,葉福強,艾樂樂,王長軍.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(09)
[4]寨卡病毒E蛋白及第三結(jié)構(gòu)域的原核表達和多克隆抗體制備[J]. 丁晨曦,朱旭輝,艾樂樂,葉福強,譚偉龍,胡丹,陳家鋒,郭曉璐,潘秀珍,王長軍.  中國人獸共患病學(xué)報. 2018(01)
[5]寨卡病毒包膜prM-E蛋白的結(jié)構(gòu)和功能分析[J]. 盧昌,李娜,薛璞,李楠,陳平.  中國人獸共患病學(xué)報. 2017(01)
[6]Zika virus:A review of literature[J]. Saeed Reza Jamali Moghadam,Samaneh Bayrami,Sepideh Jamali Moghadam,Raheleh Golrokhi,Fatemeh Golsoorat Pahlaviani,SeyedAhmad SeyedAlinaghi.  Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2016(12)
[7]寨卡疫苗研究進展[J]. 王然,陳輝,安靜.  微生物學(xué)報. 2017(02)
[8]寨卡病毒及其疫苗研究[J]. 田德橋,陳薇.  生物工程學(xué)報. 2017(01)
[9]寨卡病毒感染及其實驗室檢查[J]. 林迪,孫長貴.  實驗與檢驗醫(yī)學(xué). 2016(02)
[10]寨卡病毒和寨卡病毒病[J]. 張碩,李德新.  病毒學(xué)報. 2016(01)

碩士論文
[1]質(zhì)粒DNA的霧化及其吸入免疫的研究[D]. 裴永峰.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2004



本文編號：3208438