海葡萄,學名為長莖葡萄蕨藻（Caulerpa lentillifera）,隸屬于綠藻門（Chlorophyta）、羽藻目（Bryopsidales）、蕨藻科（Caulerpaceae）。本文以選自越南芽莊的海葡萄為研究對象,提取分離其多糖成分,采用化學和波譜學的方法對其結(jié)構(gòu)進行分析,并對其活性進行評價,研究結(jié)果如下:干燥脫鹽的海葡萄在80℃下超純水提取3 h,使用75%無水乙醇進行沉淀。粗多糖產(chǎn)率為5.04%,粗多糖脫蛋白后經(jīng)強陰離子交換柱層析和凝膠滲透柱層析純化后得到多糖組分CP0-1。理化性質(zhì)分析表明CP0-1的總糖含量為61.1%;蛋白含量為9.5%;硫酸基含量為11%。單糖組成主要由甘露糖、半乳糖和木糖組成,比例為4.4:4.0:1.4。根據(jù)理化性質(zhì)與單糖組成的結(jié)果分析,推測CP0-1是硫酸化的木糖半乳甘露聚糖,分子量為471 kDa。對多糖CP0-1通過逐級降解、脫硫和甲基化分析其結(jié)構(gòu),確定CP0-1以→4)-Manp-（1→為主鏈結(jié)構(gòu),3位可能存在分支;硫酸基團主要存在→2）-Manp-（1→的3位。半乳糖主要集中在支鏈上,以→3）-Galp-(1→為主,其6位存在硫酸基團... 

【文章來源】：浙江海洋大學浙江省

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 綠藻的研究現(xiàn)狀
    1.2 綠藻多糖的結(jié)構(gòu)研究
        1.2.1 石莼多糖
        1.2.2 硫酸化半乳聚糖
        1.2.3 硫酸化甘露聚糖
        1.2.4 硫酸化鼠李聚糖
        1.2.5 硫酸化阿拉伯聚糖
    1.3 綠藻多糖的生物活性
        1.3.1 抗凝血活性
        1.3.2 免疫調(diào)節(jié)活性
        1.3.3 抗病毒活性
        1.3.4 抗氧化活性
    1.4 立項背景及研究意義
第二章 海葡萄多糖分離純化以及理化性質(zhì)
    2.1 實驗試劑及儀器
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 海葡萄多糖的提取
        2.2.2 海葡萄多糖除蛋白質(zhì)
        2.2.3 海葡萄多糖的分離純化
            2.2.3.1 陰離子交換柱層析
            2.2.3.2 凝膠滲透柱層析
        2.2.4 海葡萄多糖純度分析以及分子量的測定
        2.2.5 海葡萄多糖的理化性質(zhì)分析
            2.2.5.1 總糖含量的測定
            2.2.5.2 蛋白質(zhì)含量的測定
            2.2.5.3 糖醛酸含量的測定
            2.2.5.4 硫酸基含量的測定
        2.2.6 單糖組成分析
            2.2.6.1 多糖完全酸水解
            2.2.6.2 樣品及混合標準品的PMP柱前衍生物制備
            2.2.6.3 高效液相色譜分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 海葡萄多糖的提取
        2.3.2 海葡萄多糖的分離純化
            2.3.2.1 陰離子交換柱層析
            2.3.2.2 凝膠滲透柱層析
        2.3.3 分子量及純度分析
        2.3.4 理化性質(zhì)分析
        2.3.5 單糖組成分析
    2.4 小結(jié)
第三章 海葡萄多糖的結(jié)構(gòu)鑒定和不同分子量多糖的制備
    3.1 實驗試劑及儀器
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 紅外光譜分析
        3.2.2 海葡萄多糖的主側(cè)鏈組成分析
        3.2.3 海葡萄多糖脫硫酸基
            3.2.3.1 試劑的脫水處理
            3.2.3.2 多糖吡啶鹽的制備
            3.2.3.3 多糖的脫硫酸基反應
        3.2.4 多糖的甲基化分析
            3.2.4.1 試劑及樣品的預處理
            3.2.4.2 甲基化反應
            3.2.4.3 甲基化多糖的水解
            3.2.4.4 水解產(chǎn)物的還原
            3.2.4.5 還原產(chǎn)物的乙�；�
            3.2.4.6 GC-MS分析
        3.2.5 多糖的氧化降解
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 紅外光譜分析
        3.3.2 CP0-1的主、側(cè)鏈組成分析
        3.3.3 CP0-1的甲基化分析
        3.3.4 海葡萄多糖氧化降解產(chǎn)物分子量及純度分析
    3.4 小結(jié)
第四章 海葡萄多糖的活性評價
    4.1 實驗試劑及儀器
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗試劑
        4.1.3 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 體外抗凝血活性研究
            4.2.1.1 家兔心臟取血
            4.2.1.2 凝血酶原時間(PT)的測定
            4.2.1.3 凝血酶時間(TT)的測定
            4.2.1.4 活化部分凝血活酶時間(APTT)的測定
            4.2.1.5 凝血因子FⅡa和 FⅩa試驗
        4.2.2 免疫調(diào)節(jié)及抗氧化活性
            4.2.2.1 免疫抑制小鼠的模型建立及給藥
            4.2.2.2 多糖對免疫器官的影響
            4.2.2.3 多糖對小鼠免疫因子的影響
            4.2.2.4 多糖對小鼠體內(nèi)抗氧化指標的影響
        4.2.3 抗病毒活性
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 抗凝血活性分析
            4.3.1.1 體外抗凝血活性評價
            4.3.1.2 抗凝血因子結(jié)果分析
        4.3.2 免疫調(diào)節(jié)活性
            4.3.2.1 多糖對免疫器官的影響
            4.3.2.2 多糖對小鼠免疫因子的影響
            4.3.2.3 多糖對小鼠體內(nèi)抗氧化指標的影響
        4.3.3 抗病毒活性
    4.4 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學術(shù)論文及研究成果


【參考文獻】：
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本文編號：3204738