大豆胞囊線蟲（Heterodera glycines,Soybean Cyst Nematode,SCN）是全球大豆生產中危害最嚴重的病害之一,每年給大豆生產造成數(shù)十億美元的經(jīng)濟損失。防治大豆胞囊線蟲已成為研究工作的重點。隨著基因工程技術的不斷發(fā)展,其中篩選抗性基因并培育抗病品種對于大豆胞囊線蟲的防治及提高大豆產量尤為重要。查爾酮合成酶（CHS）是異黃酮形成途徑中的關鍵位點。異黃酮作為植保素,在植物中無論是生物因素、非生物因素的脅迫,都發(fā)揮著重要抗逆作用。本試驗利用抗病品種灰皮支黑豆和感病品種Williams82,在大豆胞囊線蟲3號生理小種（SCN3）脅迫后不同時期檢測CHS5、CHS7、CHS8、CHS9四個基因的表達,并測定出下游產物異黃酮成分中的大豆苷元（Danizen）和黃豆黃素（Glycintein）的含量。研究查爾酮合成酶基因在大豆胞囊線蟲脅迫下抗、感大豆品種中的作用,為進一步揭示抗病品種抗大豆胞囊線蟲的分子機制奠定理論依據(jù)。主要結果如下:1.生物信息學分析可知CHS7、CHS8由389個氨基酸組成,CHS5、CHS9由388個氨基酸組成。CHS5、CHS7、CHS8、CH... 

【文章來源】：沈陽農業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 大豆胞囊線蟲的研究進展
        1.1.1 大豆胞囊線蟲簡介
        1.1.2 大豆胞囊線蟲生活史
        1.1.3 大豆胞囊線蟲病的危害
        1.1.4 大豆胞囊線蟲病的抗性機制
    1.2 大豆異黃酮的研究進展
        1.2.1 大豆異黃酮的結構
        1.2.2 大豆異黃酮的生物合成途徑及相關基因的表達
        1.2.3 大豆異黃酮在植物抗病性中的作用
        1.2.4 大豆異黃酮對線蟲影響的研究進展
    1.3 查爾酮合成酶的研究進展
        1.3.1 查爾酮合成酶簡介
        1.3.2 查爾酮合成酶在非生物脅迫下的作用
        1.3.3 查爾酮合成酶在生物脅迫下的作用
    1.4 本課題的主要思路及研究內容
第二章 GmCHS生物信息學分析
    2.1 生物信息學分析網(wǎng)址及工具軟件
    2.2 結果與分析
        2.2.1 Gm CHS基因、蛋白序列號
        2.2.2 GmCHS的理化性質
        2.2.3 GmCHS的親疏水性
        2.2.4 GmCHS蛋白一級結構分析
        2.2.5 GmCHS蛋白二級結構預測
        2.2.6 GmCHS亞細胞定位預測
        2.2.7 GmCHS氨基酸成分分析
    2.3 本章小結
第三章 大豆胞囊線蟲脅迫下抗、感大豆品種中Gm CHS基因的表達差異
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 種子處理
        3.1.3 大豆胞囊線蟲二齡幼蟲(J2)的制備
        3.1.4 次氯酸鈉-酸性品紅染色
        3.1.5 大豆胞囊線蟲的接種及取樣
    3.2 引物設計
    3.3 大豆總RNA提取及cDNA的合成
        3.3.1 RNA的提取
        3.3.2 cDNA的合成
    3.4 qRT-PCR檢測
    3.5 結果與分析
        3.5.1 大豆胞囊線蟲形態(tài)學觀察-酸性品紅染色
        3.5.2 引物的驗證
        3.5.3 GmCHS基因的相對表達量分析
第四章 GmCHS蛋白相互作用的預測
    4.1 材料與方法
        4.1.1 GmCHS基因序列
        4.1.2 GmCHS蛋白序列分析
        4.1.3 互作網(wǎng)絡中蛋白的mRNA表達分析
    4.2 結果與分析
第五章 大豆胞囊線蟲脅迫下抗、感大豆品種中異黃酮含量的檢測
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 試驗儀器
        5.1.3 試驗方法
        5.1.4 標準曲線的制作
        5.1.5 樣品檢測
    5.2 結果與分析
        5.2.1 標準品高效液相色譜圖
        5.2.2 異黃酮含量的回歸方程
        5.2.3 抗、感大豆品種中大豆苷元和黃豆黃素的含量
第六章 結論與討論
    6.1 結論
    6.2 討論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]三種色系牡丹花色素組成及相關基因表達分析[D]. 甘林鑫.西北農林科技大學 2019
[4]生防根瘤菌Sneb183調控大豆異黃酮代謝抗胞囊線蟲機理研究[D]. 邱佳文.沈陽農業(yè)大學 2018
[5]大豆Rhg1位點上抗大豆胞囊線蟲相關基因GmAAT的功能分析[D]. 張鳳.中國農業(yè)科學院 2018
[6]GmHs1pro-1基因的表達及功能分析與載體構建[D]. 楊若巍.沈陽農業(yè)大學 2017
[7]GmCHS基因生物信息學分析及過表達載體構建[D]. 楊悅.沈陽農業(yè)大學 2017
[8]異黃酮在大豆抗胞囊線蟲過程中的作用研究[D]. 郭春紅.沈陽農業(yè)大學 2017
[9]大豆胞囊線蟲抗病候選基因rhg1多樣性及分子標記開發(fā)與利用[D]. 南海洋.中國農業(yè)科學院 2010



本文編號：3189312