熒光原位雜交技術(shù)是一種非放射性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的技術(shù),是在20世紀(jì)80年代末于放射性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上逐漸發(fā)展起來的。因其使用安全、實(shí)驗(yàn)周期短、結(jié)果準(zhǔn)確性高以及觀測(cè)方便等優(yōu)勢(shì),在產(chǎn)前、腫瘤及血液類疾病的診斷應(yīng)用中備受青睞。但由于該技術(shù)的工序復(fù)雜繁瑣,所需試劑耗材異常昂貴,同時(shí)該技術(shù)目前仍主要停留在人工操作階段,對(duì)操作人員專業(yè)素質(zhì)極度依賴,技術(shù)培訓(xùn)成本高昂,大大降低了該項(xiàng)技術(shù)效用的發(fā)揮,極大程度上限制了該技術(shù)的使用和推廣。針對(duì)此現(xiàn)象,全球范圍內(nèi)就有像德國(guó)徠卡、荷蘭飛利浦等少數(shù)知名醫(yī)療器械公司開發(fā)出了一些自動(dòng)化設(shè)備,但是他們的處理方案基本上都是使用多種設(shè)備組合完成,且關(guān)鍵步驟仍然需要專人手工操作,操作時(shí)長(zhǎng)和試劑消耗量等方面與人工操作相比并無(wú)太大優(yōu)勢(shì)。針對(duì)熒光原位雜交技術(shù)及其自動(dòng)化的發(fā)展現(xiàn)狀,本論文對(duì)自動(dòng)化程度高、試劑量消耗少、處理效率高的全自動(dòng)熒光原位雜交系統(tǒng)裝置進(jìn)行了研究與開發(fā)。本論文為解決熒光原位雜交技術(shù)所涉及的液基細(xì)胞分子診斷操作過程中的復(fù)雜關(guān)鍵問題,通過以試劑消耗少、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便、多功能集成、反應(yīng)體積小的微流控芯片技術(shù)和醫(yī)學(xué)分子診斷技術(shù)為基礎(chǔ),對(duì)于集液基細(xì)胞的分離... 

【文章來源】：武漢紡織大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基因測(cè)序技術(shù)概念圖

1緒論3圖1.2PCR技術(shù)原理示意圖FISH（熒光原位雜交）技術(shù)是20世紀(jì)80年代末在放射性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法，是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)，其檢測(cè)原理是利用熒光標(biāo)記核酸探針，然后將探針與待測(cè)樣本細(xì)胞進(jìn)行雜交，若待測(cè)細(xì)胞的DNA片段與探針同源互補(bǔ)，即可形成帶有熒光信號(hào)的雜交體，經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待特定DNA序列進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析[5]。FISH技術(shù)目前在基因定性、定量，整合、表達(dá)等方面的研究中具有較大優(yōu)勢(shì)，目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳病的診斷、病毒的感染分析、胎兒產(chǎn)前診斷、腫瘤診斷以及基因組研究等許多領(lǐng)域，在臨床檢驗(yàn)、教學(xué)和研究等方面扮演著重要的角色[6-10]。相較于基因測(cè)序和PCR技術(shù)，F(xiàn)ISH技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是成本較低、檢測(cè)準(zhǔn)確率高、出檢報(bào)告快，并且對(duì)檢測(cè)設(shè)備和環(huán)境的依賴度不高，易于在各等級(jí)醫(yī)院推廣普及和應(yīng)用。FISH技術(shù)原理示意圖如圖1.3所示。圖1.3FISH技術(shù)原理示意圖綜上所述，從使用成本和技術(shù)實(shí)現(xiàn)難度上講，F(xiàn)ISH技術(shù)是目前實(shí)現(xiàn)基因類疾病早期精準(zhǔn)檢測(cè)的相對(duì)最優(yōu)選擇，但是該技術(shù)目前也有一定的局限性，也比較難以推廣，原因在于實(shí)現(xiàn)該技術(shù)的工序復(fù)雜繁瑣，所需試劑耗材異常昂貴，而且該技術(shù)仍主要停留在

1緒論3圖1.2PCR技術(shù)原理示意圖FISH（熒光原位雜交）技術(shù)是20世紀(jì)80年代末在放射性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法，是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)，其檢測(cè)原理是利用熒光標(biāo)記核酸探針，然后將探針與待測(cè)樣本細(xì)胞進(jìn)行雜交，若待測(cè)細(xì)胞的DNA片段與探針同源互補(bǔ)，即可形成帶有熒光信號(hào)的雜交體，經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待特定DNA序列進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析[5]。FISH技術(shù)目前在基因定性、定量，整合、表達(dá)等方面的研究中具有較大優(yōu)勢(shì)，目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳病的診斷、病毒的感染分析、胎兒產(chǎn)前診斷、腫瘤診斷以及基因組研究等許多領(lǐng)域，在臨床檢驗(yàn)、教學(xué)和研究等方面扮演著重要的角色[6-10]。相較于基因測(cè)序和PCR技術(shù)，F(xiàn)ISH技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是成本較低、檢測(cè)準(zhǔn)確率高、出檢報(bào)告快，并且對(duì)檢測(cè)設(shè)備和環(huán)境的依賴度不高，易于在各等級(jí)醫(yī)院推廣普及和應(yīng)用。FISH技術(shù)原理示意圖如圖1.3所示。圖1.3FISH技術(shù)原理示意圖綜上所述，從使用成本和技術(shù)實(shí)現(xiàn)難度上講，F(xiàn)ISH技術(shù)是目前實(shí)現(xiàn)基因類疾病早期精準(zhǔn)檢測(cè)的相對(duì)最優(yōu)選擇，但是該技術(shù)目前也有一定的局限性，也比較難以推廣，原因在于實(shí)現(xiàn)該技術(shù)的工序復(fù)雜繁瑣，所需試劑耗材異常昂貴，而且該技術(shù)仍主要停留在


本文編號(hào)：3129108