羊痘是由羊痘病毒引起羊的一種急性、接觸性傳染病,在世界范圍流行。羊痘病毒含有5個ANK基因,推測其與病毒的宿主范圍有關(guān),本論文對5株新疆羊痘病毒分離株及疫苗株的ANK基因序列進行比較分析,并在缺失ANK基因的情況下研究其對病毒復(fù)制和宿主細胞的影響。得到結(jié)果如下:1.成功克隆6株羊痘病毒ANK基因30個,經(jīng)測序及序列分析表明,ANK基因138共有55個核苷酸產(chǎn)生突變,導致25個氨基酸產(chǎn)生突變;ANK基因140共有44個核苷酸產(chǎn)生突變,導致17個氨基酸產(chǎn)生突變;ANK基因141.2共有40個核苷酸產(chǎn)生突變,導致23個氨基酸產(chǎn)生突變;ANK基因145共有55個核苷酸產(chǎn)生突變,導致26個氨基酸產(chǎn)生突變。從遺傳進化樹來看,新疆株與印度株親緣關(guān)系最接近,特別是ANK010基因,新疆株直接與印度毒株獨立聚于一支,與其他毒株有明顯差異。對于其他4個ANK基因,各新疆株均與其他參考株分別聚成GTPV和SPPV兩個種系,且同種系中新疆株與印度株仍然較為親近。不同的是新疆分離株GTPV-SS,其5個ANK基因均與SPPV種系聚于一簇,推測該毒株可能是SSPV跨物種傳播給山羊的結(jié)果。2.本研究成功制備了綿羊睪... 

【文章來源】：塔里木大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Thx，SS，KS，YM，M1，M2毒株ANK基因010，138，140，141.2，145電泳圖

塔里木大學碩士學位論文第2章6株新疆羊痘病毒分離株ANK基因序列分析21圖2-1Thx，SS，KS，YM，M1，M2毒株ANK基因010，138，140，141.2，145電泳圖注：泳道M：DNA分子量標記，DL:2000bp，泳道1-6：目的基因PCR結(jié)果2.2.2ANK基因010、138、140、141.2和145克隆的菌液PCR檢測（部分）圖2-2Thx株ANK基因010菌液PCR電泳圖注：泳道M：DNA分子量標記，DL:2000bp，泳道1-24：Thx株ANK基因010菌液PCR電泳結(jié)果，其中2-8泳道，10-24泳道為陽性結(jié)果

塔里木大學碩士學位論文第2章6株新疆羊痘病毒分離株ANK基因序列分析22圖2-3Thx株ANK基因141.2菌液PCR電泳圖注：泳道M：DNA分子量標記，DL:8000bp，泳道1-12：Thx株ANK基因141.2菌液PCR電泳結(jié)果，其中1,3,5,7泳道為陽性結(jié)果圖2-4Thx株ANK基因145菌液PCR電泳圖注：泳道M：DNA分子量標記，DL:8000bp，泳道1-7：Thx株ANK基因145菌液PCR電泳結(jié)果，其中3-7泳道為陽性結(jié)果2.2.3ANK010、138、140、141.2和145序列分析序列比對結(jié)果表明，由于核苷酸的插入或缺失，一些ANK基因呈現(xiàn)移碼突變，不能正常編碼氨基酸。KS株的ANK基因138（第142位插入A），M1菌株ANK基因141.2（第724位插入A），M2菌株的ANK基因140（分別在28、37位缺失A），YM疫苗株ANK基因138（分別在142位插入A）、140（插入C，并缺失T在1451、1460位）和141.2（在第790、806位缺失T）。此外，在不同的病毒株中，例如ANK基因010（KS和M1株），ANK基因138（SS、M1和M2株或KS和YM株），ANK基因140（SS和M1株），ANK基因141.2（Thx和KS株）和ANK基因145（SS、M1和M2株）都有100%相似的核苷酸序列。6個新疆株和GTPV印度/P62參考株的ANK基因（010，138，140，141.2，145）分別達到97.18-100%，96.22-99.74%，96.33-99.93%，96.33-99.93%，95.67-99.78%的核苷酸相似性，氨基酸相似性分別為96.2-100%，96.2%-99.8%，96.2-100%，93.8-99.8%，92.7-99.6%（詳見表2-6）。對這些ANK基


本文編號：3104316