植物病毒病是僅次于植物真菌病害的第二大植物病害,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。生物農(nóng)藥由于殘留量低、對環(huán)境安全、對非靶標(biāo)生物安全、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn),受到越來越多的關(guān)注并且展現(xiàn)出很好的發(fā)展?jié)摿?從自然界有益微生物中分離和鑒定更安全、更有效的抗病毒代謝產(chǎn)物成為目前的研究熱點(diǎn)。本研究篩選對煙草花葉病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）具有顯著抑制作用及對植物具有促生長作用的多功能生防細(xì)菌,分離純化抗病毒活性物質(zhì),克隆其編碼基因,通過原核表達(dá)獲得純化的重組蛋白,并從對寄主的誘導(dǎo)抗性和對TMV的抑制作用兩個方面解析其抗病毒作用機(jī)制,為抗病毒微生物農(nóng)藥的創(chuàng)制提供理論依據(jù)。本研究取得以下研究結(jié)果:1.篩選獲得抗植物病毒、促進(jìn)植物生長的多功能生防菌B8。本試驗采用“杯碟法”從23株細(xì)菌中篩選出8株對蠟狀芽孢桿菌具有抑制效果的生防菌,研究了其中7株的無菌發(fā)酵液對蠟狀芽孢桿菌和TMV的抑制效果及促進(jìn)番茄生長作用,結(jié)果表明菌株B8發(fā)酵液能有效抑制蠟狀芽孢桿菌,發(fā)酵液與TMV體外混合后接種心葉煙,枯斑抑制率為87.52%;菌株B8無菌發(fā)酵液噴施煙草NC89,對TMV的預(yù)防作用和治療作用... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

菌株及發(fā)酵液對蠟狀芽孢桿菌的抑制作用A：菌碟；B：無菌發(fā)酵液；C：發(fā)酵液Fig.2-1InhibitionofBacilluscereusbystrainsandfermentationbrothA:Plate;B:Cell-freefermentationbroth;C:FermentationbrothC

第二章抗植物病毒多功能生防菌的篩選222.2.3無菌發(fā)酵液促進(jìn)番茄生長作用測定用各菌株無菌發(fā)酵液稀釋20倍液處理番茄種子后播種，測定發(fā)酵液對番茄幼苗生長各項指標(biāo)的影響。番茄株高的增量表明菌株B8、B20和SNB56發(fā)酵液的促進(jìn)作用顯著，根長的增量表明菌株B8和B20發(fā)酵液的促進(jìn)作用顯著，地上部干/鮮重的增量表明菌株B8發(fā)酵液的促進(jìn)作用顯著，地下部干重的增量表明菌株B8和菌株SNB55發(fā)酵液促進(jìn)作用顯著，地下部鮮重增量表明菌株B8發(fā)酵液促進(jìn)作用顯著。菌株B8無菌發(fā)酵液處理過的種子番茄幼苗整齊，長勢良好，顏色濃綠，無論是株高、根長、地上部干/鮮重和地下部干/鮮重指標(biāo)均優(yōu)于其他菌株及對照，分別比對照增加25%、41%、50%、86%、30%和50%，說明菌株B8發(fā)酵液促進(jìn)幼苗生長的作用最顯著（圖2-2，表2-4）。圖2-2無菌發(fā)酵液促進(jìn)番茄生長作用Fig.2-2EffectoffermentationbrothontomatogrowthB8B17B20B26B30SNB55SNB56對照

?.25d254.40±1.69d144.30±0.82c22.60±0.29c注：表中數(shù)據(jù)是用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，不同的字母表示差異顯著（P<0.05）。Note:AlldataareshownastheMeans±SDfromfourbiologicalreplicates,differentcapitalletterstandsforsignificantdifference(P<0.05).2.2.4菌株B8抗菌蛋白粗提物對TMV的抑制作用將透析后的抗菌蛋白粗提液與TMV病毒汁液1:1混合（混合10min）摩擦接種處理心葉煙，接種3d后調(diào)查葉片產(chǎn)生的枯斑數(shù)，并計算病斑抑制率。結(jié)果表明用抗菌蛋白粗提物處理后的TMV再接種心葉煙，枯斑數(shù)明顯減少，枯斑抑制率為42.50%（圖2-3），說明菌株B8產(chǎn)生的抗菌蛋白粗提物對TMV具有一定的抑制作用。2.3本章小結(jié)與討論本試驗通過對已有的23株細(xì)菌進(jìn)行篩選，得到8株對蠟狀芽孢桿菌具有抑制效果的生防菌（圖2-1A，表2-1），進(jìn)一步研究了其中效果較持久的7株生防菌B8、B17、A：與抗菌蛋白粗提物混合后接種；B：對照圖2-3菌株B8抗菌蛋白粗提物對TMV的抑制作用A:Mixedwithcrudeextractofantagonisticproteinandinoculated;B:controlFig.2-3InhibitoryeffectofcrudeextractofantagonisticproteinofstrainB8onTMVAB

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3031113