細(xì)胞色素C的生物礦化以及多酶體系的構(gòu)建和固載
發(fā)布時間:2021-01-22 06:20
酶(蛋白質(zhì))被公認(rèn)為是天然的綠色催化劑,具有高效性和專一性,通常被用作為工業(yè)催化劑,在醫(yī)藥、精細(xì)化工、生物傳感和環(huán)境等領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用前景。盡管如此,酶的應(yīng)用往往因為苛刻的催化和儲存環(huán)境、高成本以及難以重復(fù)利用等因素而受到限制。目前,基于不同材料的優(yōu)良性能,將酶分子固定在這些材料基質(zhì)上,從而實現(xiàn)酶固載是充分發(fā)揮酶的實際應(yīng)用的一個可行性方案。在本論文的研究當(dāng)中,我們選擇了高效而簡單的生物礦化法,通過2-甲基咪唑(Im)和CuSO4與細(xì)胞色素C(Cyt c)以生物礦化的形式自組裝構(gòu)建生物復(fù)合材料Cyt c@Cu(Im)2來實現(xiàn)對Cyt c的固載,實現(xiàn)了催化反應(yīng)速率顯著地提高。于此,我們通過熱激響應(yīng)Cyt c同步進(jìn)行生物礦化后,制備出生物復(fù)合材料*Cyt c@Cu(Im)2,實現(xiàn)了Km值從21 mM到10 mM的近一半的降低。同時,在長期儲存以及有機溶劑乙醇的孵化過程中,Cyt c@Cu(Im)2和*Cyt c@Cu(Im)2展現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性,并且在經(jīng)過5...
【文章來源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
a)MP-11在Tb-mesoMOF中的,
H2O2活化Cytc@Cu(Im)
262.2.2.1Cytc固載效率分析圖2.4Cytc載前后樣品溶液的紫外-可見吸收光譜圖Fig2.4UV-VisabsorptionspectraofsamplesolutionbeforeandafterCytcimmobilizedCytc分子量約1.2×104道爾頓(Da),通過紫外-可見光譜可以檢測到其活性中心鐵卟啉的特征峰。其氧化態(tài)在410nm處有明顯的特征吸收峰。如圖2.4所示,可以明顯看到生物礦化前配置的Cytc紫外—可見吸收全譜圖,以及在410nm處其活性中心鐵卟啉的特征吸收峰和在280nm左右蛋白質(zhì)的氨基酸殘基(酪氨酸、苯丙氨酸等)的吸收峰。而Cytc參與礦化后得到的上清液和洗滌液用離心超濾管進(jìn)行濃縮分析發(fā)現(xiàn)基本無紫外—可見吸收光譜圖。說明了礦化體系對Cytc的固載效率達(dá)到近100%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]納米SiO2改性殼聚糖載體的制備及固定化殼聚糖酶的研究[J]. 王艷君,卓少玲,陳盛. 食品工業(yè)科技. 2012(21)
[2]基于仿生聚多巴胺膜和納米金的酶固定化平臺的構(gòu)建[J]. 張玉瑋,張云,王樺,沈國勵,俞汝勤. 化學(xué)學(xué)報. 2009(20)
[3]中國淀粉水解工業(yè)發(fā)展及其展望思考[J]. 徐正康,黃立新. 現(xiàn)代食品科技. 2009(08)
[4]生態(tài)因素與玉米酶活性代謝研究[J]. 劉淑云,董樹亭,胡昌浩. 華北農(nóng)學(xué)報. 2004(04)
[5]化學(xué)修飾酶的研究進(jìn)展[J]. 馬曉建,吳勇,祝春進(jìn),趙銀峰. 化學(xué)與生物工程. 2004(06)
本文編號:2992732
【文章來源】:南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
a)MP-11在Tb-mesoMOF中的,
H2O2活化Cytc@Cu(Im)
262.2.2.1Cytc固載效率分析圖2.4Cytc載前后樣品溶液的紫外-可見吸收光譜圖Fig2.4UV-VisabsorptionspectraofsamplesolutionbeforeandafterCytcimmobilizedCytc分子量約1.2×104道爾頓(Da),通過紫外-可見光譜可以檢測到其活性中心鐵卟啉的特征峰。其氧化態(tài)在410nm處有明顯的特征吸收峰。如圖2.4所示,可以明顯看到生物礦化前配置的Cytc紫外—可見吸收全譜圖,以及在410nm處其活性中心鐵卟啉的特征吸收峰和在280nm左右蛋白質(zhì)的氨基酸殘基(酪氨酸、苯丙氨酸等)的吸收峰。而Cytc參與礦化后得到的上清液和洗滌液用離心超濾管進(jìn)行濃縮分析發(fā)現(xiàn)基本無紫外—可見吸收光譜圖。說明了礦化體系對Cytc的固載效率達(dá)到近100%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]納米SiO2改性殼聚糖載體的制備及固定化殼聚糖酶的研究[J]. 王艷君,卓少玲,陳盛. 食品工業(yè)科技. 2012(21)
[2]基于仿生聚多巴胺膜和納米金的酶固定化平臺的構(gòu)建[J]. 張玉瑋,張云,王樺,沈國勵,俞汝勤. 化學(xué)學(xué)報. 2009(20)
[3]中國淀粉水解工業(yè)發(fā)展及其展望思考[J]. 徐正康,黃立新. 現(xiàn)代食品科技. 2009(08)
[4]生態(tài)因素與玉米酶活性代謝研究[J]. 劉淑云,董樹亭,胡昌浩. 華北農(nóng)學(xué)報. 2004(04)
[5]化學(xué)修飾酶的研究進(jìn)展[J]. 馬曉建,吳勇,祝春進(jìn),趙銀峰. 化學(xué)與生物工程. 2004(06)
本文編號:2992732
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