根瘤內生細菌抗南方根結線蟲的生物活性研究
發(fā)布時間:2021-01-03 01:15
根結線蟲是植物寄生線蟲中對各種作物最具破壞性的物種之一,其寄生性強,寄主范圍廣,繁育周期短且繁殖頻率高,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大產(chǎn)量損失。生物防治微生物對環(huán)境友好且通常對人畜無害,是控制根結線蟲病害的一種安全有效措施。本研究從448株根瘤內生細菌分離株中篩選并鑒定出對南方根結線蟲有較好防效的生防細菌,通過盆栽和田間試驗驗證其防效,并研究了其在番茄根部的定殖分布。主要研究結果如下:1.防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌篩選及防效研究:通過田間初篩試驗和盆栽復篩試驗篩選出5株對南方根結線蟲有較好防效的根瘤內生細菌Sneb1994,Sneb1995,Sneb1997,Sneb2000和Sneb2001。這五株內生細菌顯示出高殺線蟲活性,處理24 h后二齡幼蟲(J2)死亡率皆為85%以上,同時對卵孵化具有抑制作用,并可促進番茄種子萌發(fā)及生長。盆栽試驗結果表明,五株內生細菌的發(fā)酵液灌根處理均能顯著減少根結和卵囊數(shù)量,并促進番茄植株生長。溫室田間防效試驗結果顯示菌株Sneb1997和Sneb2000的發(fā)酵液對番茄根結線蟲病有較好防效,并可促進番茄植株生長和提高果實產(chǎn)量。2.有效根瘤內生細菌的鑒定:通過16S...
【文章來源】:沈陽農(nóng)業(yè)大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:92 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 植物內生細菌防治根結線蟲病害的研究進展
1.1 根結線蟲的種類與危害
1.1.1 根結線蟲的種類與分布
1.1.2 根結線蟲的發(fā)生與危害
1.2 根結線蟲病的綜合防治
1.2.1 化學防治
1.2.2 農(nóng)業(yè)防治
1.2.3 生物防治
1.3 植物內生細菌防治植物寄生線蟲病害的作用機理研究進展
1.3.1 促進植物生長
1.3.2 產(chǎn)生殺線蟲活性代謝物質
1.3.3 營養(yǎng)和空間位點的競爭
1.3.4 改變寄主根系分泌物
1.3.5 誘導植物系統(tǒng)抗性
1.4 根瘤內生細菌防治植物寄生線蟲病害的研究進展
1.5 問題與展望
第二章 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌篩選及防效研究
2.1 試驗材料
2.1.1 供試菌株
2.1.2 供試線蟲
2.1.3 供試番茄品種
2.1.4 供試培養(yǎng)基
2.2 試驗方法
2.2.1 細菌菌株發(fā)酵液和發(fā)酵濾液的制備
2.2.2 南方根結線蟲二齡幼蟲和卵懸液的制備
2.2.3 田間初篩試驗
2.2.4 盆栽復篩試驗
2.2.5 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺試驗
2.2.6 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲卵孵化和卵囊孵化的抑制效果
2.2.7 菌株固氮和解磷活性檢測
2.2.8 菌株發(fā)酵液對番茄種子萌發(fā)的影響
2.2.9 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的盆栽防效試驗
2.2.10 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的溫室田間防效試驗
2.3 結果與分析
2.3.1 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌的篩選結果
2.3.2 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
2.3.3 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲卵孵化和卵囊孵化的抑制效果
2.3.4 菌株的固氮和解磷活性檢測結果
2.3.5 菌株發(fā)酵液對番茄種子萌發(fā)的影響
2.3.6 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的盆栽防效試驗
2.3.7 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的溫室田間防效
2.4 小結
第三章 有效根瘤內生細菌的鑒定
3.1 試驗材料
3.1.1 供試菌株
3.1.2 供試試劑
3.2 試驗方法
3.2.1 細菌菌株的形態(tài)特征鑒定
3.2.2 細菌菌株的生理生化特性鑒定
3.2.3 細菌分子生物學(16S rDNA)鑒定
3.3 結果與分析
3.3.1 菌株形態(tài)學特征鑒定結果
3.3.2 菌株生理生化特性鑒定結果
3.3.3 分子生物學(16S rDNA)鑒定結果
3.4 小結
第四章 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄根際的定殖分布
4.1 試驗材料
4.1.1 供試菌株
4.1.2 質粒
4.1.3 供試植物品種
4.1.4 供試培養(yǎng)基
4.2 試驗方法
4.2.1 生防菌株的GFP標記
4.2.2 GFP標記菌株中的質粒穩(wěn)定性
4.2.3 GFP標記菌株生長速率測定
4.2.4 GFP標記菌株對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
4.2.5 GFP標記菌株在番茄植株的定殖動態(tài)
4.2.6 GFP標記菌株在番茄根部的定殖位點
4.3 結果與分析
4.3.1 菌株Sneb1997和Sneb2001的GFP標記和篩選
4.3.2 GFP標記菌株中質粒PMP2444 的穩(wěn)定性測試
4.3.3 GFP標記菌株生長速率測定
4.3.4 GFP標記菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
4.3.5 GFP標記菌株在番茄植株的定殖數(shù)量
4.3.6 GFP標記菌株在番茄根部的定殖分布
4.4 小結
第五章 結論與討論
5.1 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌篩選及防效研究
5.2 有效根瘤內生細菌的鑒定
5.3 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄植株的定殖研究
5.4 問題與展望
參考文獻
附錄
致謝
攻讀學位論文期間發(fā)表文章
【參考文獻】:
期刊論文
[1]目前登記防治番茄根結線蟲的農(nóng)藥產(chǎn)品[J]. 鄭慶偉. 農(nóng)藥市場信息. 2019(03)
[2]常用殺線蟲劑品種及其別名錄[J]. 鄭慶偉. 農(nóng)藥市場信息. 2018(03)
[3]蔬菜根結線蟲病的發(fā)生、識別、傳播和防治[J]. 李明遠. 中國蔬菜. 2017(11)
[4]委內瑞拉鏈霉菌Snea253殺線蟲活性化合物的分離純化與結構鑒定[J]. 譚卓,朱峰,朱曉峰,楊傳旭,王媛媛,段玉璽,劉曉宇,陳立杰. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2017(11)
[5]生防菌PFMP-5對蔬菜根結線蟲的毒殺效果及其鑒定[J]. 丁磊,徐玉梅,王建明. 山西農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2017(05)
[6]土壤化學熏蒸劑在根結線蟲防治中的應用[J]. 盧志軍,陳明遠,黃健,朱青艷,胡學軍,王艷輝. 中國植保導刊. 2016(09)
[7]象耳豆根結線蟲的研究進展[J]. 陳慧,王會芳,陳綿才. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2016(05)
[8]拮抗線蟲的花生根瘤內生細菌篩選及鑒定[J]. 回虹燕,王媛媛,朱曉峰,陳立杰,劉曉宇,張夢月,段玉璽. 中國油料作物學報. 2016(02)
[9]不同土壤添加劑及高溫悶棚對防治根結線蟲病的影響[J]. 張廣榮,繆仲梅,薛莉,楊成德. 植物保護. 2016(01)
[10]具ACC脫氨酶活性大豆根瘤內生菌的篩選、抗性及促生作用[J]. 趙龍飛,徐亞軍,常佳麗,李敏,張艷玲,黨永杰,王夢思,程亞穩(wěn),張斌月. 微生物學報. 2016(06)
博士論文
[1]根結線蟲拮抗放線菌的篩選及菌株HA10002和DA09202活性物質的研究[D]. 曾慶飛.海南大學 2011
[2]應用根際促生細菌防治大豆胞囊線蟲病的研究[D]. 孫華.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2009
碩士論文
[1]海南島茄果類蔬菜根結線蟲病病原鑒定及穿刺巴氏桿菌防效測定[D]. 賈本凱.海南大學 2012
[2]不同殺線劑對南方根結線蟲的作用方式與田間防效[D]. 鄒雅新.河北農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]大豆根瘤內拮抗胞囊線蟲細菌篩選及活性菌株初步研究[D]. 趙宇樞.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:2954019
【文章來源】:沈陽農(nóng)業(yè)大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:92 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 植物內生細菌防治根結線蟲病害的研究進展
1.1 根結線蟲的種類與危害
1.1.1 根結線蟲的種類與分布
1.1.2 根結線蟲的發(fā)生與危害
1.2 根結線蟲病的綜合防治
1.2.1 化學防治
1.2.2 農(nóng)業(yè)防治
1.2.3 生物防治
1.3 植物內生細菌防治植物寄生線蟲病害的作用機理研究進展
1.3.1 促進植物生長
1.3.2 產(chǎn)生殺線蟲活性代謝物質
1.3.3 營養(yǎng)和空間位點的競爭
1.3.4 改變寄主根系分泌物
1.3.5 誘導植物系統(tǒng)抗性
1.4 根瘤內生細菌防治植物寄生線蟲病害的研究進展
1.5 問題與展望
第二章 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌篩選及防效研究
2.1 試驗材料
2.1.1 供試菌株
2.1.2 供試線蟲
2.1.3 供試番茄品種
2.1.4 供試培養(yǎng)基
2.2 試驗方法
2.2.1 細菌菌株發(fā)酵液和發(fā)酵濾液的制備
2.2.2 南方根結線蟲二齡幼蟲和卵懸液的制備
2.2.3 田間初篩試驗
2.2.4 盆栽復篩試驗
2.2.5 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺試驗
2.2.6 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲卵孵化和卵囊孵化的抑制效果
2.2.7 菌株固氮和解磷活性檢測
2.2.8 菌株發(fā)酵液對番茄種子萌發(fā)的影響
2.2.9 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的盆栽防效試驗
2.2.10 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的溫室田間防效試驗
2.3 結果與分析
2.3.1 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌的篩選結果
2.3.2 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
2.3.3 菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲卵孵化和卵囊孵化的抑制效果
2.3.4 菌株的固氮和解磷活性檢測結果
2.3.5 菌株發(fā)酵液對番茄種子萌發(fā)的影響
2.3.6 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的盆栽防效試驗
2.3.7 菌株發(fā)酵液對根結線蟲病的溫室田間防效
2.4 小結
第三章 有效根瘤內生細菌的鑒定
3.1 試驗材料
3.1.1 供試菌株
3.1.2 供試試劑
3.2 試驗方法
3.2.1 細菌菌株的形態(tài)特征鑒定
3.2.2 細菌菌株的生理生化特性鑒定
3.2.3 細菌分子生物學(16S rDNA)鑒定
3.3 結果與分析
3.3.1 菌株形態(tài)學特征鑒定結果
3.3.2 菌株生理生化特性鑒定結果
3.3.3 分子生物學(16S rDNA)鑒定結果
3.4 小結
第四章 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄根際的定殖分布
4.1 試驗材料
4.1.1 供試菌株
4.1.2 質粒
4.1.3 供試植物品種
4.1.4 供試培養(yǎng)基
4.2 試驗方法
4.2.1 生防菌株的GFP標記
4.2.2 GFP標記菌株中的質粒穩(wěn)定性
4.2.3 GFP標記菌株生長速率測定
4.2.4 GFP標記菌株對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
4.2.5 GFP標記菌株在番茄植株的定殖動態(tài)
4.2.6 GFP標記菌株在番茄根部的定殖位點
4.3 結果與分析
4.3.1 菌株Sneb1997和Sneb2001的GFP標記和篩選
4.3.2 GFP標記菌株中質粒PMP2444 的穩(wěn)定性測試
4.3.3 GFP標記菌株生長速率測定
4.3.4 GFP標記菌株發(fā)酵濾液對南方根結線蟲J2 的毒殺活性測定
4.3.5 GFP標記菌株在番茄植株的定殖數(shù)量
4.3.6 GFP標記菌株在番茄根部的定殖分布
4.4 小結
第五章 結論與討論
5.1 防治南方根結線蟲的根瘤內生細菌篩選及防效研究
5.2 有效根瘤內生細菌的鑒定
5.3 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄植株的定殖研究
5.4 問題與展望
參考文獻
附錄
致謝
攻讀學位論文期間發(fā)表文章
【參考文獻】:
期刊論文
[1]目前登記防治番茄根結線蟲的農(nóng)藥產(chǎn)品[J]. 鄭慶偉. 農(nóng)藥市場信息. 2019(03)
[2]常用殺線蟲劑品種及其別名錄[J]. 鄭慶偉. 農(nóng)藥市場信息. 2018(03)
[3]蔬菜根結線蟲病的發(fā)生、識別、傳播和防治[J]. 李明遠. 中國蔬菜. 2017(11)
[4]委內瑞拉鏈霉菌Snea253殺線蟲活性化合物的分離純化與結構鑒定[J]. 譚卓,朱峰,朱曉峰,楊傳旭,王媛媛,段玉璽,劉曉宇,陳立杰. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2017(11)
[5]生防菌PFMP-5對蔬菜根結線蟲的毒殺效果及其鑒定[J]. 丁磊,徐玉梅,王建明. 山西農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2017(05)
[6]土壤化學熏蒸劑在根結線蟲防治中的應用[J]. 盧志軍,陳明遠,黃健,朱青艷,胡學軍,王艷輝. 中國植保導刊. 2016(09)
[7]象耳豆根結線蟲的研究進展[J]. 陳慧,王會芳,陳綿才. 貴州農(nóng)業(yè)科學. 2016(05)
[8]拮抗線蟲的花生根瘤內生細菌篩選及鑒定[J]. 回虹燕,王媛媛,朱曉峰,陳立杰,劉曉宇,張夢月,段玉璽. 中國油料作物學報. 2016(02)
[9]不同土壤添加劑及高溫悶棚對防治根結線蟲病的影響[J]. 張廣榮,繆仲梅,薛莉,楊成德. 植物保護. 2016(01)
[10]具ACC脫氨酶活性大豆根瘤內生菌的篩選、抗性及促生作用[J]. 趙龍飛,徐亞軍,常佳麗,李敏,張艷玲,黨永杰,王夢思,程亞穩(wěn),張斌月. 微生物學報. 2016(06)
博士論文
[1]根結線蟲拮抗放線菌的篩選及菌株HA10002和DA09202活性物質的研究[D]. 曾慶飛.海南大學 2011
[2]應用根際促生細菌防治大豆胞囊線蟲病的研究[D]. 孫華.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2009
碩士論文
[1]海南島茄果類蔬菜根結線蟲病病原鑒定及穿刺巴氏桿菌防效測定[D]. 賈本凱.海南大學 2012
[2]不同殺線劑對南方根結線蟲的作用方式與田間防效[D]. 鄒雅新.河北農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]大豆根瘤內拮抗胞囊線蟲細菌篩選及活性菌株初步研究[D]. 趙宇樞.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:2954019
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