在哺乳動(dòng)物中,毛囊屬于皮膚的附屬結(jié)構(gòu),毛囊產(chǎn)生動(dòng)物被毛并具有周期性生長(zhǎng)的特點(diǎn)。毛囊生長(zhǎng)周期被分為四個(gè)階段:生長(zhǎng)期、退化期、靜止期和脫落期。在生長(zhǎng)期,新的被毛開始生成;在退化期,毛囊生長(zhǎng)速度減慢;在靜止期,毛囊處于生長(zhǎng)停滯階段;在脫落期,被毛主動(dòng)脫落。不同的激活劑和抑制劑不僅能決定毛囊生長(zhǎng)的階段,還能調(diào)控毛囊維持在特定階段的時(shí)間。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5（Fibroblast Growth Factor 5,FGF5）是一種被毛周期調(diào)節(jié)因子,由FGF5突變介導(dǎo)的遺傳性長(zhǎng)毛表型在人和其他物種中已經(jīng)被報(bào)道。然而,仍沒(méi)有在新西蘭大白兔中研究FGF5的敲除對(duì)兔毛囊周期調(diào)控的實(shí)驗(yàn)。因此,本實(shí)驗(yàn)使用CRISPR/Cas9技術(shù),生產(chǎn)出FGF5基因敲除兔,并發(fā)現(xiàn)FGF5基因敲除兔具有長(zhǎng)毛性狀。本實(shí)驗(yàn)首先根據(jù)兔FGF5基因序列設(shè)計(jì)篩選2個(gè)靶向FGF5基因的sgRNA,將體外轉(zhuǎn)錄的Cas9 mRNA和FGF5 sgRNA混合物顯微注射進(jìn)兔受精卵細(xì)胞質(zhì)中,并將注射過(guò)的受精卵移植到代孕母體。F0代個(gè)體的基因型鑒定結(jié)果顯示,有2只為FGF5基因敲除兔。在擴(kuò)大繁殖后,對(duì)F2代進(jìn)行基因型檢測(cè),挑選FGF5雙敲個(gè)體和野生型... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CRISPR/Cas9系統(tǒng)

第一篇文獻(xiàn)綜述第2章毛囊周期研究概述12的生發(fā)及形成就是使用這種機(jī)制的結(jié)果(87-91)。2.2毛發(fā)生長(zhǎng)周期哺乳動(dòng)物的毛囊在哺乳動(dòng)物出生之后就一直處于生長(zhǎng)和退化的交替循環(huán)。這種循環(huán)主要包括四個(gè)階段：生長(zhǎng)期（anagen）、退化期（catagen）、靜止期（telogen）和脫落期（exogen）（也有研究將被毛生長(zhǎng)周期分為生長(zhǎng)期、退化期、靜止期三個(gè)周期）。每個(gè)階段的持續(xù)時(shí)間、激素情況、營(yíng)養(yǎng)狀況因物種和年齡的不同而具有一定差異。例如，在小鼠中，第一次“測(cè)試性”毛干的生長(zhǎng)是在出生后20天開始的，這種生長(zhǎng)經(jīng)常被誤認(rèn)為是小鼠被毛的第一次生長(zhǎng)。在人的一生中，頭部毛囊可能會(huì)經(jīng)歷10-30個(gè)毛發(fā)生長(zhǎng)周期。有研究表明，人毛發(fā)生長(zhǎng)循環(huán)與白色脂肪組織的分布有關(guān)，白色脂肪會(huì)聚集在真皮錐中的皮脂腺附近(92-95)。圖2.1毛囊周期循環(huán)Fig2.1Hairfolliclecycle(85)生長(zhǎng)期（anagen）在小鼠中，真正的毛囊生長(zhǎng)期出現(xiàn)在小鼠出生后4周。在生長(zhǎng)期早期，毛囊

第一篇文獻(xiàn)綜述第3章FGF5在毛囊周期調(diào)控中的研究進(jìn)展18白（FGFs）。FGF5可以通過(guò)抑制毛乳頭細(xì)胞的生長(zhǎng)從而抑制小鼠被毛的生長(zhǎng)，但是，F(xiàn)GF5s可以通過(guò)與FGF5競(jìng)爭(zhēng)FGFR1從而降低FGF5的活性。在小鼠皮膚中，通過(guò)皮下注射外源重組FGF5，可誘導(dǎo)生長(zhǎng)期的毛囊提前進(jìn)入退化期。在整個(gè)被毛生長(zhǎng)周期中，F(xiàn)GF5mRNA在生長(zhǎng)期的最后一個(gè)階段的表達(dá)量要高于休止期，這種現(xiàn)象表明了FGF5對(duì)毛囊進(jìn)入靜止期的誘導(dǎo)作用(124,148-153)。圖3.1FGF5突變導(dǎo)致的體毛過(guò)長(zhǎng)Fig3.1ExcessivebodyhaircausedbymutatedFGF5(154)3.3結(jié)語(yǔ)從FGF家族被發(fā)現(xiàn)開始，人們對(duì)FGF家族的研究就沒(méi)有停止過(guò)，F(xiàn)GF家族是各種細(xì)胞增值分裂及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需的。而FGF5更是一種在毛發(fā)生長(zhǎng)中非常重要的具有抑制作用的細(xì)胞因子。FGF5異常的動(dòng)物具有較長(zhǎng)的被毛，這種表型也被運(yùn)用于毛用動(dòng)物的育種中。因此，在新西蘭大白兔中對(duì)FGF5基因的敲除不僅可以增加兔毛的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，還能研究長(zhǎng)毛癥的機(jī)理，為脫發(fā)、掉發(fā)尋找新的治療方法。


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