本研究基于SSR標(biāo)記與線粒體DNA標(biāo)記的方法,針對陜西和四川兩地黃胸散白蟻Reticulitermes flaviceps巢群的遺傳多樣性和繁育體系進(jìn)行了分析。結(jié)果如下:(1)通過使用6對微衛(wèi)星引物對陜西與四川共計(jì)22個(gè)黃胸散白蟻巢群的遺傳多樣性分析表明,陜西7個(gè)巢群105個(gè)個(gè)體的等位基因數(shù)Na的范圍為2.429-3.000,平均等位基因數(shù)為2.738±0.132。有效等位基因數(shù)Ne在1.832-2.293范圍內(nèi),平均有效等位基因?yàn)?.057±0.094,觀測雜合度Ho范圍為0.390-0.610,其平均值為0.494±0.037。期望雜合度He的數(shù)值范圍在0.420-0.537,平均值則為0.472±0.024,Shannon’s信息指數(shù)I為0.773±0.044,范圍在0.690-0.890之間。多態(tài)信息含量PIC最小值為0.460,最大值為0.812,平均值為0.638±0.050,大于0.5,因此,陜西黃胸散白蟻巢群中這6個(gè)位點(diǎn)屬于高度多態(tài)。四川15個(gè)巢群225個(gè)個(gè)體,等位基因數(shù)范圍為1.933-3.600,平均值為2.889±0.130。有效等位基因數(shù)為1.589-2.544,平均值為2.107±0.095,觀測雜合度范圍在0.347-0.622之間,平均值為0.512±0.038。期望雜合度范圍在0.286-0.514之間,平均期望雜合度為0.436±0.025。Shannon’s信息指數(shù)I最高為0.938,最低為0.448,平均值為0.752±0.046。多態(tài)信息含量PIC最小值為0.627,最大值為0.897,平均值為0.777±0.039,同樣大于0.5,因此,四川黃胸散白蟻巢群中這6個(gè)位點(diǎn)也是高度多態(tài)的。兩地散白蟻遺傳多樣性情況類似,有效等位基因數(shù)與平均有效等位基因數(shù)均低于等位基因數(shù)與平均等位基因數(shù),說明等位基因在兩地的白蟻巢群中分布不均勻。期望雜合度均大于0.3,結(jié)合Shannon’s信息指數(shù)I,可以認(rèn)為這兩地的白蟻巢群均具有中等偏高的遺傳多樣性。(2)通過對兩地22個(gè)巢群,共計(jì)330個(gè)個(gè)體F統(tǒng)計(jì)值以及基因流Nm的分析顯示,F_(IS)值為-0.133±0.058,說明在白蟻巢群內(nèi)雜合子豐富,這與在所有巢群中,期望雜合度He均低于觀測雜合度Ho相一致。遺傳分化系數(shù)F_(ST)的范圍為0.405-0.483之間,平均值為0.450±0.014,大于0.15�；蛄髦笖�(shù)Nm為0.309±0.018,范圍在0.267-0.368之間,數(shù)值小于1。這兩者都說明不同巢群之間缺乏基因交流,從而導(dǎo)致了不同巢群之間遺傳分化的產(chǎn)生。通過軟件structure2.2的貝葉聚類方法的研究表明,陜西7個(gè)巢群具有相似的遺傳結(jié)構(gòu),并且與四川白蟻巢群的遺傳結(jié)構(gòu)具有明顯的差異。但在四川的15個(gè)巢群中,采自溫江,都江堰,青城山的三個(gè)巢群卻具有與陜西巢群相類似的遺傳結(jié)構(gòu)。(3)對黃胸散白蟻的巢群結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明,陜西的7個(gè)巢群均屬于擴(kuò)展巢群,而四川的15個(gè)巢群中,簡單巢群占據(jù)了12個(gè),擴(kuò)展巢群則僅有3個(gè),沒有發(fā)現(xiàn)巢群融合的現(xiàn)象。這可能是因?yàn)閿U(kuò)展巢群均采自自然環(huán)境下,受到人為的破壞較少,生境適宜白蟻的生存,從而允許巢群的擴(kuò)大。而在四川的12個(gè)簡單巢群,多采集自市區(qū),一方面人類活動會影響白蟻的生存,另一方面城市結(jié)構(gòu)多為堅(jiān)硬水泥混凝土,也不利于白蟻巢群的擴(kuò)大。(4)通過使用線粒體DNA COⅡ的標(biāo)記,對陜西與四川的黃胸散白蟻進(jìn)行測序分析,得到大小約為701bp的COⅡ基因片段。其中堿基A、T、C、G的含量分別為39.3%、24.4%、22.1%、14.2%。A+T含量63.7%顯著高于G+C含量36.3%。符合昆蟲線粒體具有明顯AT偏好的特點(diǎn)。通過軟件DNAsp5.0的使用,我們分析得到在陜西與四川兩地的黃胸散白蟻巢群中,共有14個(gè)單倍型,編號H1至H14。(5)通過DNAsp5.0軟件對陜西和四川兩地的黃胸散白蟻巢群進(jìn)行遺傳多樣性分析表明,巢群中的遺傳變異較多。失配分布分析(Mismatch distributions)與中性檢驗(yàn)的結(jié)果表明,實(shí)際觀測曲線與預(yù)期的曲線相符,顯示為多峰的分布趨勢,Tajima'sD值等于0.3073,結(jié)果不顯著(p0.1),說明黃胸散白蟻種群符合中性理論,群體近期沒有經(jīng)歷擴(kuò)張,處于平衡狀態(tài)。通過分子變異(AMOVA)分析計(jì)算巢群的固定系數(shù)F_(ST)值,巢群的固定系數(shù)為0.89,說明巢群因?yàn)槿狈χ苯踊蚪涣鞫鴮?dǎo)致出現(xiàn)一定水平的遺傳分化。黃胸散白蟻不同地理巢群線粒體COⅡ基因的AMOVA結(jié)果顯示,來自于種群間的遺傳變異(89.34%)明顯大于來自種群內(nèi)的遺傳變異(10.66%)。
【學(xué)位單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2020
【中圖分類】：Q963
【部分圖文】：

第一章緒論3響品級分化的重要因素[19-23]。而外因說則認(rèn)為一個(gè)個(gè)體有發(fā)育成所有品級的可能性，而最后由于外部條件的影響抑制了分化的潛能從而只分化為特定的品級。外界影響因素包括1.個(gè)體因素如白蟻體內(nèi)的保幼激素[24]；2.環(huán)境因素如溫度濕度等[25]；3.信息素如兵蟻的抑制信息素[26,27]。從一對有翅成蟲通過紛飛、交配、建巢開始到巢群中再次有成蟲出現(xiàn)稱為白蟻的一個(gè)生活史。不同種類的白蟻具有不同的生活史，大致可分為兩類。即直線型和分枝型[28]。具有直線型生活史的白蟻?zhàn)畲蟮奶卣魇浅踩褐胁淮嬖谡嬲墓は伷芳�，扮演工蟻角色的品級被稱為擬工蟻psuedogate。擬工蟻可以發(fā)育成若蟻，然后經(jīng)過兩個(gè)齡期發(fā)育為性成熟的成蟲。而若蟻也可以逆向退化為擬工蟻而繼續(xù)留在巢群中。這種生活史大多存在于低等的白蟻中[29]，如鼻白蟻科的原鼻白蟻屬Prorhinotermes。在這些種類的白蟻中，除了幼蟻其他品級均能轉(zhuǎn)化為補(bǔ)充生殖蟻。而分枝型的生活史存在于高等白蟻[30]和一些低等白蟻如散白蟻屬中。在這種生活史中，工蟻若蟻有不同的發(fā)育途徑。幼蟻經(jīng)歷兩個(gè)齡期之后出現(xiàn)分化，一支分化為工蟻，工蟻可以通過一次蛻皮形成工蟻型補(bǔ)充生殖蟻或者經(jīng)歷兩次蛻皮形成兵蟻。另一支則分化為若蟻，若蟻帶有翅芽。同樣，若蟻也可以選擇分化為有翅成蟲或者成為若蟻型補(bǔ)充生殖蟻。圖1散白蟻的品級分化途徑[31]Fig.1CastedifferentiationpathwayofReticulitermestermites（Blattaria，Rhinotermitidae）[31]

基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳圖

西北大學(xué)碩士學(xué)位論文18圖3黃胸散白蟻DNA聚丙烯酰胺凝膠電泳圖Fig3.PolyacrylamidegelelectrophoresisinR.flaviceps(Blattaria，Rhinotermitidae)用6對引物對所有個(gè)體進(jìn)行PCR擴(kuò)增后送往上海生工在分析儀ABI3100DNA進(jìn)行毛細(xì)管電泳。毛細(xì)管電泳具有高效，快速，微量的特點(diǎn)，而且靈敏度較高，可以分辨差兩個(gè)堿基的差異提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性。(2)哈迪溫伯格檢驗(yàn)通過Fstat2.9.3.2軟件對22個(gè)巢群在6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上進(jìn)行哈迪溫伯格檢驗(yàn)得到如下結(jié)果：
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2888443