【摘要】：為研究谷氨酸受體(glutamate receptors,GluRs)在離體脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(motoneuron, MN)同側(cè)中央管周圍區(qū)(ipsilateral pericentral canal, iPCC)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation, LTP)現(xiàn)象中的作用,以及GluRs在脊髓MN突觸可塑性中的作用機(jī)制,本文應(yīng)用新生SD乳大鼠(7-14天齡)脊髓切片腹角MN細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù),對(duì)電刺激iPCC在MN誘發(fā)的興奮性突觸后電位(excitatory postsynaptic potential, EPSP)給予強(qiáng)直刺激,誘導(dǎo)LTP維持30min后,灌流NMDA受體阻斷劑APV和非NMDA受體阻斷劑DNQX;對(duì)誘發(fā)的抑制性突觸后電位(inhibitory postsynaptic potential, IPSP)灌流抑制性氨基酸受體阻斷劑荷包牡丹堿(bicuculline)和士的寧(strychnine)預(yù)處理后,給予強(qiáng)直刺激誘導(dǎo)LTP,再灌流APV和DNQX。觀察強(qiáng)直刺激對(duì)EPSP表觀受體動(dòng)力學(xué)相關(guān)參數(shù)的影響并分析LTP的維持的受體機(jī)制。結(jié)果如下：1、對(duì)9個(gè)MNs的iPCC-EPSPs表觀受體動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析表明,iPCC-EPSPs的K1值在1T-1.2T時(shí)隨刺激強(qiáng)度增大而緩慢增大,在刺激強(qiáng)度增大到1.3T時(shí),短暫減小后又呈增大趨勢(shì)；K2值與刺激強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.8564,P0.05)；KT值在1T-1.2T時(shí),與刺激強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)(r*=-0.9999,P*0.01),在刺激強(qiáng)度增大到1.3T時(shí)短暫增大后又開始減小。2、對(duì)記錄到iPCC-EPSPs的7個(gè)MNs進(jìn)行強(qiáng)直刺激(頻率100 Hz,50脈沖／串,共6串,串間隔10 s,波寬0.4～1.0ms,電壓10～100 V),其中有3個(gè)MN(MN1-3)的iPCC-EPSPs幅度增大到或超過基礎(chǔ)值的120%,且持續(xù)30 min以上,強(qiáng)直刺激前后細(xì)胞基本電生理參數(shù)穩(wěn)定,判定為L(zhǎng)TP現(xiàn)象(iPCC-LTP) 。3、誘發(fā)iPCC-LTP的3個(gè)MNs,其中MN3的iPCC-EPSP幅度是在強(qiáng)直刺激30min后才表現(xiàn)出明顯增大的現(xiàn)象。在iPCC-LTP過程中,3個(gè)MNs的iPCC-EPSPs曲線下面積、最大上升斜率均增大到基礎(chǔ)值的120%及以上；潛伏期均縮短；MN2、4、MN3時(shí)程表現(xiàn)出延長(zhǎng)現(xiàn)象,而MN1的時(shí)程縮短：MN1、MN2的最大下降斜率先增大后降至基礎(chǔ)值的100%,MN3最大下降斜率均未發(fā)生明顯改變5、對(duì)誘導(dǎo)出iPCC-LTP的3個(gè)MN表觀受體動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析,結(jié)果顯示MN1的K1值在強(qiáng)直刺激10 min內(nèi)明顯減小,后恢復(fù)至基礎(chǔ)值的90%,但仍低于強(qiáng)直刺激前水平,MN2、MN3的K1值在強(qiáng)直刺激前后未發(fā)生明顯改變；MN1的K2和KT值都在強(qiáng)直刺激10 min內(nèi)迅速增大后減小至基礎(chǔ)值的200%,MN2的K2和KT值在強(qiáng)直刺激前后未發(fā)生明顯改變,MN3的K2和KT值均在強(qiáng)直刺激后短暫增大后減小。5、對(duì)誘導(dǎo)出iPCC-LTP的1個(gè)MN,LTP現(xiàn)象維持30min后,可觀察到給予30μmol/L的APV后,iPCC-EPSP的幅度先增大后減小,曲線下面積、時(shí)程減小明顯,潛伏期、最大上升斜率、最大下降斜率均無改變；給予50 μmol/L的APV, iPCC-EPSP各項(xiàng)參數(shù)改變不明顯。6、對(duì)記錄到iPCC-IPSP的1個(gè)MN,依次灌流GABA受體阻斷劑荷包牡丹堿(bicuculline,30 μmol/L)、甘氨酸受體阻斷劑士的寧(strychnine,1 μmol/L)各15min后,IPSP翻轉(zhuǎn)為EPSP。在bicuculline和strychnine的混合溶液灌流下,穩(wěn)定記錄iPCC-EPSP 15min后,對(duì)iPCC強(qiáng)直刺激,誘導(dǎo)出iPCC-LTP維持1h后,APV (30 μmol/L) 15 min可觀察到iPCC-EPSP幅度、曲線下面積、時(shí)程、最大下降斜率減小；最大上升斜率略有降低；潛伏期無明顯改變；灌流DNQX (1 μmol/L) 5min后,iPCC-EPSP各項(xiàng)參數(shù)改變不明顯。結(jié)論：MNs iPCC-EPSPs的表觀受體動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析,表明隨著刺激強(qiáng)度的增大突觸后可能存在更多其他的受體被激活,提示可能除了NMDA和AMPA受體外,還存在其他更復(fù)雜的受體參與介導(dǎo)。在iPCC-LTP過程中可能涉及更復(fù)雜的遞質(zhì)-受體機(jī)制,GABA受體和甘氨酸受體可能影響iPCC-LTP的誘導(dǎo),而在iPCC-LTP的維持過程中,谷氨酸受體的參與起主要作用。
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R338

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 君梅;谷氨酸受體和痛[J];神經(jīng)科學(xué);1994年01期

2 李瀟;抑制谷氨酸可使腦癌生長(zhǎng)放慢[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2002年02期

3 H.Manev ,E.Costa ,JT.Wroblewski ,A.Guidotti ,任民峰;興奮性氨基酸受體過度刺激和對(duì)抗其神經(jīng)毒性的途徑[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1991年02期

4 晏義平,孫鳳艷;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的結(jié)構(gòu)和功能[J];生命科學(xué);1999年S1期

5 趙志方;哺乳動(dòng)物谷氨酸能受體通道的分子生物學(xué)研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));1995年02期

6 劉智敏,陳俊杰,楊紹華;谷氨酸受體分子的多樣性及其分子機(jī)理[J];生物多樣性;1999年01期

7 郭曉強(qiáng);;Stargazin研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2006年01期

8 程肖蕊;周文霞;張永祥;;中樞神經(jīng)系統(tǒng)谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2009年02期

9 劉應(yīng)兵,徐美麗;谷氨酸受體與受體生物學(xué)研究中的幾個(gè)基本問題[J];四川生理科學(xué)雜志;1995年Z1期

10 王冬梅;洪炎國(guó);;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體與疼痛[J];生命科學(xué);2008年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前8條

1 羅自強(qiáng);;外周谷氨酸受體及其作用的研究進(jìn)展[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

2 梁輝;蔡定芳;;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體與腦缺血的研究進(jìn)展[A];第四次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2002年

3 于珊;李正莉;朱長(zhǎng)庚;劉慶瑩;魏瑛;;谷氨酸致癇大鼠腦內(nèi)白細(xì)胞介素1受體變化的觀察[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

4 張茂林;楊巧蓮;鄭俊婷;張紅宇;張俊清;劉俊平;;急性腦梗死患者血清谷氨酸水平動(dòng)態(tài)變化及與神經(jīng)功能受損程度的關(guān)系[A];第三屆全國(guó)少數(shù)民族地區(qū)神經(jīng)病學(xué)會(huì)論文匯編[C];2005年

5 黃曉婷;馮丹丹;劉偉;彭湘萍;李楊;黃艷紅;漢建忠;羅自強(qiáng);;小鼠胰腺及胰島β細(xì)胞系MIN6細(xì)胞谷氨酸受體的表達(dá)[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2013年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

6 黃曉婷;馮丹丹;劉偉;彭湘萍;李楊;黃艷紅;漢建忠;羅自強(qiáng);;小鼠胰腺及胰島β細(xì)胞系MIN6細(xì)胞谷氨酸受體的表達(dá)[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2013年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2013年

7 張春青;夏建霞;陳鵬慧;胡志安;;orexin-A對(duì)大鼠前額皮層神經(jīng)元谷氨酸受體功能的影響及其機(jī)制的研究[A];Proceedings of the 7th Biennial Meeting and the 5th Congress of the Chinese Society for Neuroscience[C];2007年

8 滕士勇;尤圣武;彭章龍;于布為;;異丙酚對(duì)谷氨酸激活GluR6受體介導(dǎo)的SUMO修飾及JNK通路變化的影響[A];2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)麻醉學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 梁輝 蔡定芳;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體與腦缺血密切相關(guān)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張帆;中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后谷氨酸的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用的機(jī)理研究[D];山東大學(xué);2015年

2 劉效輝;APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)及頭孢曲松的干預(yù)研究[D];山東大學(xué);2015年

3 朱雅妮;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

4 李銘;PRRT2突變體導(dǎo)致谷氨酸釋放及GRIA1膜表面分布異常[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

5 閆桂剛;慢性高眼壓對(duì)大鼠視網(wǎng)膜谷氨酸代謝改變的實(shí)驗(yàn)性研究[D];青島大學(xué);2005年

6 徐楠杰;嗎啡對(duì)海馬谷氨酸能神經(jīng)功能的調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];沈陽藥科大學(xué);2001年

7 王燕;NF-κB/p53信號(hào)通路在谷氨酸受體介導(dǎo)的自噬激活和細(xì)胞凋亡中的作用[D];蘇州大學(xué);2010年

8 常庚;聯(lián)合應(yīng)用萊菔硫烷和利魯唑?qū)劝彼岫拘栽斐傻倪\(yùn)動(dòng)神經(jīng)損傷的保護(hù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

9 秦昶;小鼠內(nèi)側(cè)韁核傳入傳出投射的神經(jīng)化學(xué)特征與G蛋白偶聯(lián)受體151的脫孤和功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

10 周家文;體內(nèi)性激素對(duì)大鼠局灶性腦缺血影響及機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王偉;交感中樞谷氨酸緊張性傳入機(jī)制在疼痛誘發(fā)高血壓中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 彭哲;Apelin通過ERK通路拮抗谷氨酸誘導(dǎo)PC 12細(xì)胞損傷[D];南華大學(xué);2015年

3 馬清清;蠅類體內(nèi)谷氨酸受體與阿維菌素類藥物相互作用的理論研究[D];青島科技大學(xué);2015年

4 宋歡;離體脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元突觸可塑性的谷氨酸受體機(jī)制[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2015年

5 晁曉東;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白載體的構(gòu)建及鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 劉星苗;羥基紅花黃色素A對(duì)谷氨酸損傷神經(jīng)元PPARγ的表達(dá)和活性的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

7 曹偉鵬;絞股藍(lán)皂苷抗谷氨酸誘導(dǎo)的氧化性神經(jīng)毒性的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2006年

8 劉愛菊;腦缺血預(yù)處理增強(qiáng)大鼠海馬CA1區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1的結(jié)合特性及其對(duì)谷氨酸的攝取[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

9 孫中偉;谷氨酸誘導(dǎo)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡分子機(jī)制的初步探討及mGLP-1對(duì)細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[D];華東師范大學(xué);2010年

10 孫R

本文編號(hào)：2754574