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抗阻訓(xùn)練調(diào)控Mitofusin-2表達(dá)對(duì)老齡大鼠骨骼肌線粒體功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-03-25 17:03

  本文關(guān)鍵詞:抗阻訓(xùn)練調(diào)控Mitofusin-2表達(dá)對(duì)老齡大鼠骨骼肌線粒體功能的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:人體內(nèi)能量代謝以及供給能量的核心細(xì)胞器是線粒體,它在細(xì)胞內(nèi)通過(guò)氧化磷酸化為機(jī)體保證能量供給,線粒體結(jié)構(gòu)和功能的微小變化會(huì)直接或間接地影響骨骼肌功能,乃至全身的健康。Mitofusin-2參與線粒體外膜融合,除此之外還參與了多種細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程,如影響細(xì)胞的能量代謝、影響凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等,導(dǎo)致細(xì)胞增殖受到影響而發(fā)生凋亡現(xiàn)象。衰老會(huì)導(dǎo)致線粒體結(jié)構(gòu)和功能變化,而抗阻運(yùn)動(dòng)可以作為一種較為有效的手段,來(lái)調(diào)控Mitofusin-2蛋白的表達(dá),從而加速線粒體融合和線粒體網(wǎng)絡(luò)化的形成。線粒體膜電位、活性氧(ROS)、游離鈣這些指標(biāo)可以及時(shí)反映出線粒體功能的變化,從而為抗阻運(yùn)動(dòng)調(diào)控線粒體結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)而為對(duì)抗衰老提供依據(jù)。方法:研究對(duì)象為雄性SD大鼠,將其隨機(jī)分為四組:成年安靜對(duì)照組(C組)、成年抗阻運(yùn)動(dòng)組(R組)、老齡安靜對(duì)照組(O組)、老齡抗阻運(yùn)動(dòng)組(Y組),每組10只。安靜對(duì)照組:大鼠不參加任何運(yùn)動(dòng),自由飲食、飲水。R、Y組SD大鼠進(jìn)行8周坡度跑臺(tái)訓(xùn)練,坡度為35°,速度為15m/min。采用Western blott法測(cè)定各組大鼠Mitofusin-2蛋白含量,使用流式細(xì)胞儀對(duì)線粒體膜電位、活性氧、游離鈣進(jìn)行檢測(cè)。研究結(jié)果:1.Mitofusin-2蛋白表達(dá)R組大鼠股四頭肌Mfn2蛋白表達(dá)情況較C組大鼠小幅增長(zhǎng),但沒(méi)有顯著性差異;O組大鼠股四頭肌Mfn2蛋白表達(dá)情況較C組大鼠顯著下降,具有非常顯著性差異(P0.01);Y組大鼠股四頭肌Mfn2蛋白表達(dá)情況較O組大鼠上升,具有顯著性差異(P0.05)。2.線粒體游離鈣變化C組大鼠胞漿游離鈣水平較高,R組大鼠在經(jīng)過(guò)8周抗阻訓(xùn)練后,胞漿Ca2+較C組顯著下降,具有非常顯著性差異(P0.01);O組大鼠胞漿Ca2+較C組顯著上升,具有非常顯著性差異(P0.01),經(jīng)過(guò)8周抗阻訓(xùn)練后,Y組大鼠胞漿游離鈣雖仍處于較高水平,但其較O組大鼠胞漿Ca2+顯著下降,具有非常顯著性差異(P0.01)。3.線粒體活性氧變化C組大鼠線粒體活性氧水平較低,經(jīng)過(guò)8周抗阻訓(xùn)練后,R組大鼠線粒體活性氧出現(xiàn)小幅增長(zhǎng),但與C組之間并無(wú)顯著性差異;O組大鼠線粒體活性氧較C組顯著上升,具有非常顯著性差異(P0.01),經(jīng)過(guò)8周抗阻訓(xùn)練后,Y組大鼠線粒體活性氧雖仍處于較高水平,但其較O組大鼠線粒體活性氧顯著下降,具有非常顯著性差異(P0.01)。4.線粒體膜電位變化C組大鼠與R組大鼠線粒體膜電位沒(méi)有明顯變化,兩組間無(wú)顯著性差異;O組大鼠線粒體膜電位較C組顯著下降,具有非常顯著性差異(P0.01),經(jīng)過(guò)8周抗阻訓(xùn)練后,Y組大鼠線粒體恢復(fù)正常水平,與C組大鼠線粒體膜電位無(wú)顯著性差異,較O組大鼠線粒體膜電位顯著上升,具有非常顯著性差異(P0.01)。研究結(jié)論:1.抗阻運(yùn)動(dòng)可使成年大鼠體重有一定程度地增長(zhǎng),使老齡大鼠體重保持穩(wěn)定或小幅下降,推測(cè)經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后老齡大鼠瘦體重增加,體脂含量降低。2.抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)成年大鼠Mfn2影響較小,老齡大鼠Mfn2蛋白表達(dá)出現(xiàn)顯著下降,推測(cè)老齡大鼠出現(xiàn)了線粒體機(jī)能下降的現(xiàn)象;經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后老齡大鼠Mfn2蛋白顯著上調(diào),推測(cè)抗阻運(yùn)動(dòng)促進(jìn)了Mfn2介導(dǎo)的線粒體融合,改善了線粒體的功能,抑制了細(xì)胞的早期凋亡。3.老齡大鼠胞漿鈣離子顯著上升,推測(cè)鈣離子的堆積已經(jīng)對(duì)老齡大鼠線粒體機(jī)能產(chǎn)生了影響,并因此出現(xiàn)了骨骼肌機(jī)能下降、運(yùn)動(dòng)能力減退等現(xiàn)象,經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后,成年和老齡大鼠胞漿鈣離子較對(duì)照組皆出現(xiàn)顯著性下降,推測(cè)抗阻運(yùn)動(dòng)可以提高線粒體對(duì)鈣離子的攝取能力,維持膜內(nèi)外的質(zhì)子梯度,減少胞漿鈣離子堆積對(duì)細(xì)胞造成的傷害,并改善成年和老齡大鼠的運(yùn)動(dòng)能力。4.抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)成年大鼠線粒體活性氧含量的影響較小;老齡大鼠線粒體活性氧出現(xiàn)顯著上升,推測(cè)過(guò)量的活性氧已經(jīng)使老齡大鼠產(chǎn)生了氧化應(yīng)激,機(jī)體出現(xiàn)了氧化損傷;經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后,老齡大鼠線粒體活性氧顯著下降,推測(cè)抗阻運(yùn)動(dòng)可以提高細(xì)胞和機(jī)體的抗氧化能力,并加快老齡大鼠體內(nèi)過(guò)量ROS的清除。5.老齡大鼠線粒體膜電位出現(xiàn)顯著性下降,推測(cè)老齡大鼠線粒體膜的通透性發(fā)生了改變,并出現(xiàn)了早期細(xì)胞凋亡現(xiàn)象;經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后,老齡大鼠線粒體膜電位顯著上升,推測(cè)抗阻運(yùn)動(dòng)可以提高老齡大鼠線粒體膜電位,以此來(lái)對(duì)抗因衰老而引起的早期細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。6.經(jīng)抗阻運(yùn)動(dòng)后,老齡大鼠較對(duì)照組大鼠Mfn2蛋白表達(dá)顯著上調(diào)、胞漿游離鈣顯著下降、線粒體活性氧顯著下降、線粒體膜電位顯著上升,推測(cè)抗阻運(yùn)動(dòng)通過(guò)調(diào)控Mfn2蛋白的表達(dá)改善了線粒體的功能,從而對(duì)抗了因衰老而引起的細(xì)胞凋亡、骨骼肌機(jī)能下降、運(yùn)動(dòng)能力下降等現(xiàn)象。
【關(guān)鍵詞】:抗阻訓(xùn)練 Mitofusin-2 線粒體功能
【學(xué)位授予單位】:遼寧師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:G804.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-9
  • 中英文對(duì)照表9-12
  • 引言12-13
  • 1 文獻(xiàn)綜述13-22
  • 1.1 Mitofusin-2 蛋白結(jié)構(gòu)及其對(duì)線粒體功能的影響13-15
  • 1.2 線粒體相關(guān)因子變化對(duì)其結(jié)構(gòu)和功能的影響15-17
  • 1.2.1 ROS對(duì)線粒體功能的影響15
  • 1.2.2 Ca~(2+)對(duì)線粒體膜通透性的影響15-17
  • 1.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)線粒體結(jié)構(gòu)和功能的影響17-18
  • 1.3.1 不同運(yùn)動(dòng)形式對(duì)Mitofusin-2 的影響17-18
  • 1.3.2 運(yùn)動(dòng)對(duì)線粒體Δφm的影響18
  • 1.4 抗阻訓(xùn)練對(duì)對(duì)抗衰老的作用18-20
  • 1.4.1 抗阻訓(xùn)練與機(jī)體的適應(yīng)性改變19-20
  • 1.4.2 抗阻運(yùn)動(dòng)與抑制骨骼肌細(xì)胞凋亡20
  • 1.5 小結(jié)20-22
  • 2 實(shí)驗(yàn)材料與方法22-30
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象22
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)分組22
  • 2.3 運(yùn)動(dòng)模型22-23
  • 2.4 取材23
  • 2.5 試劑與儀器設(shè)備23-24
  • 2.5.1 試劑23
  • 2.5.2 儀器設(shè)備23-24
  • 2.6 測(cè)試方法24-28
  • 2.6.1 Western blot測(cè)試Mitofusin-2 蛋白表達(dá)24-27
  • 2.6.2 裂解紅細(xì)胞27
  • 2.6.3 胞漿游離鈣檢測(cè)27-28
  • 2.6.4 活性氧(ROS)檢測(cè)28
  • 2.6.5 線粒體膜電位檢測(cè)28
  • 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28-30
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-37
  • 3.1 各組SD大鼠的體重變化走勢(shì)30-31
  • 3.2 大鼠股四頭肌Mitofusin-2 蛋白表達(dá)變化31-32
  • 3.3 大鼠股四頭肌胞漿Ca~(2+)對(duì)比32-33
  • 3.4 大鼠股四頭肌線粒體ROS對(duì)比33-35
  • 3.5 大鼠股四頭肌線粒體膜電位變化35-37
  • 4 分析討論37-43
  • 4.1 抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠體重的影響37-38
  • 4.2 抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠Mitofusin-2 蛋白表達(dá)的影響38-39
  • 4.3 抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠胞漿Ca~(2+)的影響39-40
  • 4.4 抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠線粒體ROS的影響40-41
  • 4.5 抗阻運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠線粒體膜電位的影響41-42
  • 4.6 抗阻訓(xùn)練在衰老研究中的應(yīng)用前景探討42-43
  • 結(jié)論43-44
  • 參考文獻(xiàn)44-51
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況51-52
  • 致謝52

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本文編號(hào):267483

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