【摘要】：抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)在許多生物體中自然存在,是針對外來微生物(例如真菌,細菌,病毒等)入侵的天然防御系統(tǒng)的主要活性成分之一�？咕谋憩F(xiàn)出廣譜抗菌活性,其抗菌機制獨特而復雜,不易導致耐藥性產(chǎn)生。本研究從豬脾臟中分離純化出新型抗菌肽,多肽合成后對其進行抗菌活性檢測,從而篩選出活性較強的抗菌肽,而后通過一系列生物信息學相關軟件對其理化性質(zhì)、二級結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)、信號肽、細胞內(nèi)定位、修飾位點等方面特性進行分析,為將其開發(fā)成新型抗菌藥物奠定基礎。本試驗通過無菌操作方法獲得豬脾臟,運用組織勻漿、超聲破碎、乙酸浸提和高速離心方法獲得脾臟粗提物,后經(jīng)陽離子交換層析和反向高效液相色譜(RP-HPLC)對粗提物進行分離、純化,用大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)作為抗菌活性試驗的指示菌株,獲得了一個抑菌活性較強的抗菌肽。經(jīng)MALDI-TOF-MS質(zhì)譜鑒定和序列比對分析得出,獲得該抗菌肽的氨基酸序列,將其命名為SSH19。利用多肽合成儀合成豬脾臟抗菌肽SSH19,進行抗菌活性檢測。結(jié)果表明,合成的抗菌肽SSH19對大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)有很好的抑菌效果。通過生物信息學相關軟件對抗菌肽SSH19進行理化特性、二級結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)、信號肽、胞內(nèi)定位、糖基化、泛素化、酶切位點和疏水性等相關數(shù)據(jù)進行分析,得出抗菌肽SSH19帶7個正電荷,存在兩個磷酸化位點、6個酶切位點、具親水性,存在76%螺旋區(qū)域。
【學位授予單位】：河南科技學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：Q51;Q811.4

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本文編號：2625876