【摘要】：三峽大壩的修建,庫(kù)區(qū)兩岸形成了垂直高度差近30米的消落帶區(qū)域。消落帶的形成改變了庫(kù)區(qū)兩岸植被的原有生長(zhǎng)環(huán)境,對(duì)庫(kù)區(qū)植物的生存產(chǎn)生嚴(yán)重的危害。水淹環(huán)境下,植物會(huì)處于缺氧狀態(tài)。缺氧環(huán)境會(huì)破壞細(xì)胞內(nèi)活性氧的代謝平衡,造成細(xì)胞的氧損傷,對(duì)植物的生存產(chǎn)生不利影響。疏花水柏枝(Myricaria laxiflora)是三峽庫(kù)區(qū)特有物種,狹域分布于庫(kù)區(qū)兩岸季節(jié)性淹沒的自然消落帶上的珍稀瀕危多年生灌木,能夠適應(yīng)三峽庫(kù)區(qū)“冬蓄夏排”的水位消漲規(guī)律,具有極強(qiáng)的耐水淹脅迫和很好的固沙保土能力。內(nèi)生真菌是植物體內(nèi)一類非常重要的生物資源。內(nèi)生真菌在與宿主植物長(zhǎng)期的協(xié)同進(jìn)化過程中,形成了一種穩(wěn)定的互利共生關(guān)系,即內(nèi)生真菌在從宿主植物獲取生長(zhǎng)所需環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí),為宿主植物提供豐富的代謝產(chǎn)物。這些代謝產(chǎn)物通過直接參與到抵御外部脅迫或者間接參與到宿主植物某些抗性基因的表達(dá)調(diào)控之中,增強(qiáng)宿主植物對(duì)生物和非生物脅迫的抗逆性。在對(duì)植物水淹脅迫的研究調(diào)查中發(fā)現(xiàn),植物能夠通過自身及其內(nèi)生真菌產(chǎn)生的多種抗氧化酶和一系列小分子抗氧化活性物質(zhì)等清除體內(nèi)積累的活性氧,從而避免氧損傷危害。因此,我們以三峽庫(kù)區(qū)代表性植物疏花水柏枝及其內(nèi)生真菌為研究對(duì)象,(1)分離、鑒定了疏花水柏枝的植物化學(xué)成分;(2)對(duì)其莖部46株內(nèi)生真菌的發(fā)酵液進(jìn)行了總抗氧化能力測(cè)定與篩選工作。本研究希望通過對(duì)疏花水柏枝植物化學(xué)成分及其內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物的抗氧化能力的研究,揭示宿主植物及其內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分與其耐水淹脅迫抗性之間的關(guān)系,同時(shí)篩選得到的高抗氧化活性的微生物資源,為進(jìn)一步研究植物-內(nèi)生真菌的相互作用建立基礎(chǔ)。采用多種色譜分離手段,我們從疏花水柏枝中分離得到了9個(gè)單體化合物。通過多種波譜解析方法,如核磁共振(NMR)、高分辨質(zhì)譜(HR-ESI-MS)、X-ray單晶衍射等對(duì)化合物進(jìn)行測(cè)定分析,所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道中的數(shù)據(jù)比對(duì),最終確定了化合物的結(jié)構(gòu)式。9個(gè)單體化合物均為首次從疏花水柏枝中分離得到,其中化合物1,2和6均首次從水柏枝屬植物中分離得到。根據(jù)其結(jié)構(gòu)類型可劃分為萜類(1-7)、甾醇類(8)、酚酸類(9),其中(5R,8R,9R,10R,13S,17S,18S)25,28-dihydroxy-D-friedoolean-14-en-3-one(2)是一個(gè)新型的齊墩果烷型五環(huán)三萜。已有研究表明,三萜類、甾醇類、酚酸類化合物均具有一定的抗氧化還原能力。因此,結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道我們推測(cè)所獲得的化合物可能幫助或參與到活性氧自由基的清除過程之中,幫助植物在不利環(huán)境中順利存活。本研究中我們分別對(duì)從疏花水柏枝莖部分離得到的46株內(nèi)生真菌進(jìn)行了總抗氧化能力測(cè)定。在發(fā)酵液的初篩中,我們得到10株抗氧化活性較高(≥15 U/mL)的菌株,并進(jìn)一步對(duì)它們的發(fā)酵粗提物進(jìn)行總抗氧化能力的測(cè)定。其中,MS19-3綜合表現(xiàn)出了最強(qiáng)的抗氧化能力,其發(fā)酵液和粗提產(chǎn)物的總抗氧化能力分別為47.19±1.90和27.47±1.03 U/mL,粗提物的總抗氧化能力達(dá)到了同濃度Vc的22.42%。因此,我們測(cè)定了MS19-3的粗提產(chǎn)物的總多酚、黃酮類化合物的含量,以及粗提物對(duì)DPPH、·OH的清除和還原能力。粗提產(chǎn)物的總多酚和黃酮類化合物含量分別為60.02±0.63 mg/g,42.78±0.79 mg/g;對(duì)DPPH和·OH表現(xiàn)出一定的清除作用以及較強(qiáng)的還原能力。最后,采用分子生物學(xué)和形態(tài)學(xué)結(jié)合的方法,菌株MS19-3鑒定為一株棒曲霉(Aspergillus clavatus)。上述結(jié)果表明,植物自生代謝產(chǎn)物及其內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物有可能在一定程度上直接或間接參與消除體內(nèi)多余的活性氧自由基,維持體內(nèi)活性氧代謝平衡,從而幫助植物順利渡過不利的淹水環(huán)境。除此之外,獲得的高抗氧化活性微生物資源可用于進(jìn)一步的植物-內(nèi)生真菌的相互作用研究,為提升庫(kù)區(qū)消落帶植物的抗非生物脅迫能力,改善庫(kù)區(qū)消落帶生態(tài)環(huán)境提供了指導(dǎo)。同時(shí)也為高抗氧化活性物質(zhì)的獲得提供了新的途徑。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：Q945.78

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳麗媛;孫翠煥;;藥用植物內(nèi)生真菌研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)雜志;2015年05期

2 張寧;彌春霞;;藥用植物內(nèi)生真菌研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2015年21期

3 呂明權(quán);吳勝軍;陳春娣;姜毅;溫兆飛;陳吉龍;王雨;王小曉;黃平;;三峽消落帶生態(tài)系統(tǒng)研究文獻(xiàn)計(jì)量分析[J];生態(tài)學(xué)報(bào);2015年11期

4 王聰艷;周志國(guó);武漢琴;;植物內(nèi)生真菌研究進(jìn)展[J];生物學(xué)教學(xué);2015年03期

5 秦洪文;劉正學(xué);鐘彥;劉銳;鄭麗丹;蘇華英;;水淹對(duì)瀕危植物疏花水柏枝生長(zhǎng)及恢復(fù)生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2014年23期

6 田偉;畢玉婷;周啟龍;薛艷紅;仇敏;但飛君;劉士平;;沒食子酸酯對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用研究[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2013年10期

7 劉佳寶;張瑛;崔保松;李帥;;寬苞水柏枝化學(xué)成分研究[J];中草藥;2013年19期

8 陳佑源;樓兵干;高其康;林福呈;;印度梨形孢誘導(dǎo)油菜抗旱性機(jī)理的初步研究[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2013年03期

9 黃亞成;秦云霞;;植物中活性氧的研究進(jìn)展[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2012年36期

10 曾陽(yáng);喇曉琴;許敏;張穎君;;藏藥翁布的酚性成分研究[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2012年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 熊高明;陳偉烈;謝宗強(qiáng);;三峽特有植物疏花水柏枝的現(xiàn)狀與保護(hù)[A];生物多樣性保護(hù)與區(qū)域可持續(xù)發(fā)展——第四屆全國(guó)生物多樣性保護(hù)與持續(xù)利用研討會(huì)論文集[C];2000年

，

本文編號(hào)：2455982