本文關(guān)鍵詞：奇異變形桿菌VirB9基因功能研究　出處：《深圳大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 奇異變形桿菌 VirB9 細(xì)胞模型 動物模型 致病性

【摘要】：在前期研究中,本課題組首次發(fā)現(xiàn):具有強(qiáng)致腹瀉能力的奇異變形桿菌C02011株含有VirB型IV型分泌系統(tǒng)(T4SS)。親緣關(guān)系譜分析表明,此結(jié)構(gòu)與肺炎克雷伯菌和大腸埃希氏菌T4SS毒力島上的VirB最為相近。我們結(jié)合前期研究成果及已有文獻(xiàn)報道,推測該奇異變形桿菌具有的此分泌系統(tǒng)可能與其它病原菌具有的T4SS一樣具有增強(qiáng)其毒力的功能。在一些菌株中,VirB9基因是T4SS毒力島上的通道蛋白,對于T4SS分泌毒力因子起到至關(guān)重要的作用。因此,我們選取T4SS毒力島上的VirB9基因進(jìn)行研究,探討該基因?qū)υ鰪?qiáng)奇異變形桿菌毒力作用究竟如何?為此,我們通過二次同源重組技術(shù)成功構(gòu)建了C02011株的VirB9基因缺失株及VirB9基因缺失后的回補(bǔ)株,并進(jìn)行了下述一系列實驗。體外實驗:首先,我們應(yīng)用菌株C02011對三種常見腸道上皮細(xì)胞模型的黏附和侵襲特性成功篩選出奇異變形桿菌易感細(xì)胞模型Caco-2,并找出其最佳感染復(fù)數(shù)(MOI)和時間(h)。接下來,我們對野生株、VirB9基因缺失株及其缺失后的回補(bǔ)株進(jìn)行了革蘭氏染色、生長曲線測定、菌落形態(tài)及群游現(xiàn)象觀察,初步分析了VirB9基因的功能。最后,我們應(yīng)用此模型及細(xì)菌黏附和侵襲細(xì)胞的特性,分析比較了C02011株與其它來源奇異變形桿菌(無T4SS)及其VirB9基因缺失株、缺失后的回補(bǔ)株的致病能力。體內(nèi)實驗:我們選擇Balb/c小鼠進(jìn)行研究。首先,我們通過C02011(含有T4SS)、B02005(不含有T4SS)和生理鹽水對照三個組間的比較,以糞便含水量、結(jié)腸長度、病理切片及評分為評價指標(biāo),成功構(gòu)建出致腹瀉奇異變形桿菌Balb/c小鼠敏感模型。接下來,我們針對已構(gòu)建的腹瀉動物模型對奇異變形桿菌C02011株、C02011的VirB9缺失株、VirB9缺失后的回補(bǔ)株進(jìn)行了炎性因子水平初步檢驗,符合預(yù)期結(jié)果(C02011株ΔVirB9回補(bǔ)株VirB9缺失株)。通過上述實驗結(jié)果,我們認(rèn)為T4SS毒力島具有增強(qiáng)奇異變形桿菌致病能力的功能,其含有的VirB9基因在其T4SS功能的發(fā)揮中具有關(guān)鍵作用。
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：Q933

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 余惠珍;高潔;鄭熙;朱鵬立;;冠脈結(jié)扎法在大鼠急性心肌梗死模型制作中的應(yīng)用[J];中國心血管病研究;2016年08期

2 何先元;廖巳祥;劉俊康;李坤;劉艷霞;喻錄容;;奇異變形桿菌螺紋遷徙生長現(xiàn)象研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2015年01期

3 周虹;朱國強(qiáng);;細(xì)菌Ⅵ型分泌系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2012年04期

4 黃桂紅;鄧航;李江;付翔;羅昱瀾;鄒勇;;四氧嘧啶腹腔注射致小鼠糖尿病模型因素考察[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2012年01期

5 趙巖;李明;胡福泉;;細(xì)菌的IV型分泌系統(tǒng)[J];生命的化學(xué);2011年01期

6 葉露;李洪濤;王麗麗;邢銘友;宋建新;;銅綠假單胞菌密度感應(yīng)系統(tǒng)自體誘導(dǎo)因子3OC12-HSL對人腸道上皮細(xì)胞Caco-2凋亡的影響及其機(jī)制[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2010年06期

7 王斌;李秋榮;黃騫;李寧;黎介壽;;乳桿菌對TNF-α誘導(dǎo)Caco-2細(xì)胞分泌IL-6和IL-8的影響[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2009年01期

8 林杰,郭維植,徐海濱,楊毓環(huán),謝一俊,陳亢川;福建省O157:H7大腸桿菌毒力及特征基因的初步研究[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2003年01期

9 范金明;王發(fā)興;張波;江玲;李蓓;;布魯桿菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)蛋白VirB9免疫原性檢測[J];中國地方病學(xué)雜志;2013年03期

，

本文編號：1332819