本文關鍵詞：遼寧堿蓬SlNAC8基因克隆和功能分析

  更多相關文章： 遼寧堿蓬 NAC轉錄因子 亞細胞定位 轉錄激活 非生物脅迫

【摘要】：NAC轉錄因子是植物細胞中特有的一類調節(jié)植物生長發(fā)育、與植物抵御生物和非生物脅迫密切相關的轉錄因子,它通過與植物細胞中的其他基因啟動子中的順式作用元件相結合,來實現(xiàn)對相關生命活動的基因表達的促進或抑制。遼寧堿蓬(Suaeda liaotungensis K.)是一種耐鹽性很強的鹽生植物,它可以生活在高鹽堿度的自然區(qū)域內,其細胞中一定含有大量與抗鹽脅迫相關的基因。通過研究遼寧堿蓬的非生物脅迫抗性基因和抗逆機制,可以為增強其他經濟作物的非生物脅迫抗性提供更多的理論依據(jù)和基因來源。本研究從實驗室前期工作得到的遼寧堿蓬轉錄組數(shù)據(jù)中篩選得到一條EST序列,命名為SlNAC8。通過PCR技術,擴增得到了750 bp具有完整開放閱讀框(ORF)的SlNAC8cDNA序列,開放閱讀框576 bp,編碼191個氨基酸。通過構建SlNAC8的系統(tǒng)進化樹,并對SlNAC8編碼的蛋白與其他NAC蛋白進行多序列比對,初步分析認為SlNAC8屬于NAM亞家族。采用實時定量PCR技術,對SlNAC8在遼寧堿蓬不同器官中、不同非生物脅迫(高鹽、低溫、干旱、ABA)不同時間的表達特性進行分析。結果表明,非脅迫處理條件下,SlNAC8基因在遼寧堿蓬不同器官中的表達情況不同,葉中表達量高,莖中其次,根中最低。在不同的非生物脅迫下,SlNAC8的表達都呈現(xiàn)升高的趨勢,但是不同脅迫下,呈現(xiàn)最高表達的時間點不同,并且在鹽脅迫、低溫脅迫和ABA脅迫中,SlNAC8的表達量呈現(xiàn)顯著趨勢。SlNAC8基因響應高鹽、低溫、ABA脅迫�；驑尫▽⑦B有SlNAC8的瞬時表達載體pEGAD-GFP-SlNAC8轉化洋蔥表皮細胞,發(fā)現(xiàn)SlNAC8蛋白定位于細胞核中。將SlNAC8的N端、C端和ORF分別連接酵母表達載體,將表達載體轉化酵母菌進行轉錄激活實驗,實驗表明,SlNAC8的C端和ORF全長具有轉錄激活活性。亞細胞定位、轉錄激活活性分析結果顯示,SlNAC8是轉錄因子。構建pBI121-SlNAC8植物表達載體,蘸花法轉化擬南芥,通過篩選,獲得了純合的轉基因擬南芥株系。對純合二倍體植物進行3種非生物脅迫的抗性分析,結果表明,SlNAC8是一個優(yōu)秀的耐鹽、耐低溫、耐干旱的基因。因此SlNAC8基因在植物抵御一些非生物脅迫的生理過程中發(fā)揮著重要的作用,是一種非常有價值的抵抗非生物脅迫的轉錄因子。
【學位授予單位】：遼寧師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：Q943.2

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李秋莉,高曉蓉,袁曉東,劉大偉,安利佳;一步PCR快速擴增遼寧堿蓬甜菜堿醛脫氫酶cDNA3′末端序列(英文)[J];遺傳;2002年02期

2 李秋莉,高曉蓉,袁曉東,劉大偉,安利佳;一步PCR法快速擴增遼寧堿蓬膽堿單加氧酶cDNA3′末端序列[J];植物學通報;2002年05期

3 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李秋莉;高曉蓉;劉大偉;安利佳;;遼寧堿蓬膽堿加單氧酶基因(CMO)克隆及轉化煙草的研究[A];中國生物工程學會第三次全國會員代表大會暨學術討論會論文摘要集[C];2001年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宿明星;遼寧堿蓬S/NAC4、S/NAC10轉錄因子基因克隆及功能分析[D];遼寧師范大學;2015年

2 孫穎顥;遼寧堿蓬SlNAC8基因克隆和功能分析[D];遼寧師范大學;2015年

3 鄭音;遼寧堿蓬營養(yǎng)成分分析及有益內生菌篩選[D];遼寧師范大學;2011年

4 修玉萍;遼寧堿蓬病蟲害調查及紅斑病病原菌生物學特性研究[D];遼寧師范大學;2012年

5 楊星;遼寧堿蓬SlNAC2基因克隆及功能分析[D];遼寧師范大學;2014年

6 劉大偉;遼寧堿蓬甜菜堿和甜菜堿醛脫氫酶的研究[D];大連理工大學;2002年

7 曹盈;鹽生植物遼寧堿蓬（Suaeda liaotungensis K.）轉錄組測序及分析[D];遼寧師范大學;2013年

8 任偉重;遼寧堿蓬白腐病病原菌生物學特性及2株內生菌生物活性的研究[D];遼寧師范大學;2012年

9 馬曉倩;遼寧堿蓬SlPEAMT基因啟動子分離及鹽誘導功能分析[D];遼寧師范大學;2012年

10 李丹;遼寧堿蓬PEAMT基因克隆及功能分析[D];遼寧師范大學;2008年

，

本文編號：1166440