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重金屬汞、銅、鉛、鎘的酶聯(lián)免疫吸附快速檢測方法研究

發(fā)布時間:2024-03-05 00:30
  隨著近年來工農(nóng)業(yè)的迅猛發(fā)展,環(huán)境中的重金屬污染日趨嚴(yán)重。重金屬污染問題受到了人們普遍關(guān)注,而重金屬檢測分析和監(jiān)測的機構(gòu)承擔(dān)的相關(guān)任務(wù)越來越重,對檢測的質(zhì)量和速度要求也越來越高。目前重金屬的檢測方法主要以原子吸收等儀器分析為主,這些方法可實現(xiàn)準(zhǔn)確、較靈敏地定量分析,但其不足之處在于樣品前處理過程復(fù)雜、儀器配置要求高、價格昂貴、花費較大、周期偏長等。因此,建立簡便、可靠、快速有效的重金屬檢測分析方法,用于定量檢測環(huán)境介質(zhì)中的重金屬,具有重要的研究意義和實用價值。本文以研究建立快速檢測環(huán)境中四種重金屬(汞、銅、鉛、鎘)的酶聯(lián)免疫分析(ELISA)方法為目標(biāo),設(shè)計合成了這四種重金屬的半抗原,并通過結(jié)合載體蛋白合成人工抗原,然后免疫動物獲得了相關(guān)特異性抗體,基于制備的抗體,研究確立了四種重金屬的間接競爭酶聯(lián)免疫分析(IC-ELISA)方法。所建立的方法為重金屬的快速檢測提供了技術(shù)手段,并具一定的推廣應(yīng)用前景。主要研究結(jié)果如下:1.以青霉素G鈉鹽和谷胱甘肽作為中間化合物,分別合成重金屬汞的半抗原青霉烯酸硫醇汞鹽(Hg-MPA)和汞-谷胱甘肽(Hg-GSH),將載體蛋白與半抗原偶聯(lián)的方法選擇碳二亞胺...

【文章頁數(shù)】:152 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖2-1汞半抗原(Hg-MPA)合成路線圖

圖2-1汞半抗原(Hg-MPA)合成路線圖

Centricon302.3實驗方法2.3.1汞半抗原的制備與表征2.3.1.1以青霉素G鈉鹽作為中間化合物合成汞半抗原汞半抗原合成路線見圖2-1。青霉素G鈉鹽在有咪唑催化的條件下,產(chǎn)生含巰基(—SH)的堿性水解產(chǎn)物,能與HgCl2定量反應(yīng),參見反應(yīng)式2-1....


圖2-2汞半抗原(Hg-GSH)合成路線圖

圖2-2汞半抗原(Hg-GSH)合成路線圖

合成步驟:先用超純水分別配制濃度為5mg/mL的青霉素G鈉鹽溶液、濃度為100mg/mL的咪唑溶液和濃度為10mg/mL的HgCl2溶液,然后將5mL青霉素G鈉鹽溶液與5mL咪唑溶液混合于燒杯中,在磁力攪拌器上混合攪拌,并用HCl(1mol....


圖2-3汞人工抗原(Hg-MPA-BSA)合成路線圖

圖2-3汞人工抗原(Hg-MPA-BSA)合成路線圖

圖2-3汞人工抗原(Hg-MPA-BSA)合成路線圖Fig.2-3Theschematicillustrationoftheartificialantigenformercury(Hg-MPA-BSA)取10mg半抗原(Hg-MPA),于燒杯中用....


圖2-4汞人工抗原(Hg-GSH-BSA)合成路線圖

圖2-4汞人工抗原(Hg-GSH-BSA)合成路線圖

圖2-4汞人工抗原(Hg-GSH-BSA)合成路線圖Fig.2-4Theschematicillustrationoftheartificialantigenformercury(Hg-GSH-BSA)2.3.3汞人工抗原的表征與鑒定2.3.3.1人工....



本文編號:3919402

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