持久性有毒污染物(Persistent Toxic Substances,PTS)與臭氧層破壞以及溫室效應并稱為21世紀影響人類生存與健康的三大環(huán)境問題。無論是《斯德哥爾摩公約》中確定的21類持久性有機污染物(Persistent Organic Pollutants,POPs);還是美國EPA確定的12類持久性生物富集有毒化合物(Persistent Bioaccumulative& Toxic Chemicals,PBT);以及環(huán)境內分泌干擾物(Environmental EndocrineDisruptors,EEDs)的研究都與持久性有毒化學污染物有關。 多環(huán)芳烴(PAHs)和多氯聯(lián)苯(PCBs)就是其中兩類典型的持久性有毒污染物,它們在環(huán)境中分布廣泛,但多是痕量的,并且不易分解,具有高脂溶性,水溶性低,易于生物富集,同時不僅具有“三致”毒性(致癌、致畸和致突變),而且具有內分泌干擾作用。因此對環(huán)境生物及人類健康已經形成了不可估量的潛在威脅。 加強對PTS的檢測分析是進行環(huán)境風險評價及對它們實施防控的重要前提。目前,檢測PAHs和PCBs常見的方法有氣相色譜法(GC)、...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 課題研究背景
        1.1.1 持久性有毒污染物概述
        1.1.2 多氯聯(lián)苯類持久性有毒污染物概述
        1.1.3 多環(huán)芳烴類持久性有毒污染物概述
        1.1.4 熒光免疫分析技術概述
        1.1.5 量子點的應用研究概述
        1.1.6 實時熒光定量免疫PCR技術研究概述
        1.1.7 分子信標的應用研究概述
    1.2 課題的研究目的及意義
    1.3 課題的研究內容、技術路線和方法及創(chuàng)新點
        1.3.1 研究內容
        1.3.2 技術路線圖
        1.3.3 創(chuàng)新點
第二章 CDTE量子點的合成及條件優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 主要試劑和儀器
        2.2.2 碲化鎘納米晶的合成
    2.3 結果與討論
        2.3.1 CdTe納米晶的結構表征
        2.3.2 實驗條件的優(yōu)化
        2.3.3 CdTe真空干燥后樣品
    2.4 本章小結
第三章 基于量子點探針的直接競爭熒光免疫測定環(huán)境持久性有毒污染物
    3.1 引言
    3.2 實驗儀器、材料與試劑
        3.2.1 實驗儀器
        3.2.2 實驗材料及試劑
    3.3 實驗部分
        3.3.1 CdTe標記熒蒽(萘、PCB12)抗體熒光免疫試劑的制備
        3.3.2 功能性CdTe量子點與抗熒蒽抗體的結合比例實驗
        3.3.3 量子點標記抗體的性能鑒定
        3.3.4 直接競爭FIA一般步驟及實驗原理
        3.3.5 直接競爭FIA分析方法的條件優(yōu)化
        3.3.6 基于CdTe量子點的直接競爭FIA法標準曲線的建立
        3.3.7 直接競爭FIA分析方法特異性評價
        3.3.8 直接競爭FIA分析方法實際環(huán)境樣品的測定和加標回收率
        3.3.9 精密度實驗
    3.4 結果與討論
        3.4.1 CdTe的體積與濃度和不同抗體的最佳結合比
        3.4.2 CdTe標記抗熒蒽抗體的標記時間考察
        3.4.3 熒光免疫試劑標記性能的鑒定
        3.4.4 熒光免疫試劑的穩(wěn)定性
        3.4.5 標記試劑的熒光光譜和紫外吸收光譜
        3.4.6 抗原抗體最佳工作濃度的確定
        3.4.7 實驗條件優(yōu)化
        3.4.8 萘、熒蒽及PCB12的直接競爭FIA標準曲線及實際樣品分析
        3.4.9 基于量子點的直接競爭FIA法與直接競爭ELISA方法的比較分析
        3.4.10 基于量子點的熒光免疫分析的創(chuàng)新意義
    3.5 本章小結
第四章 基于量子點探針的抗體包被熒光免疫測定環(huán)境持久性有毒污染物
    4.1 引言
    4.2 實驗儀器、材料和試劑
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 實驗材料及試劑
    4.3 實驗部分
        4.3.1 CdTe標記萘(熒蒽、PCB12)抗原熒光免疫試劑的制備
        4.3.2 功能性CdTe量子點與萘(熒蒽、PCB12)-OVA的結合比例實驗
        4.3.3 量子點標記抗原的性能鑒定
        4.3.4 抗體包被競爭FIA檢測方法的建立
        4.3.5 抗體包被FIA分析方法的條件優(yōu)化
        4.3.6 抗體包被FIA分析方法標準曲線的建立
        4.3.7 實際環(huán)境樣品的測定和加標回收實驗
        4.3.8 精密度實驗
        4.3.9 抗體包被FIA分析方法特異性評價
    4.4 結果與討論
        4.4.1 CdTe與萘(熒蒽、PCB12)半抗原的最佳結合比例
        4.4.2 熒光免疫試劑的性能的鑒定及穩(wěn)定性分析
        4.4.3 標記試劑的熒光光譜和紫外吸收光譜
        4.4.4 抗體包被FIA條件的優(yōu)化
        4.4.5 萘、熒蒽及PCB12的抗體包被FIA分析方法標準曲線及實際樣品測定
    4.5 基于量子點的抗體包被FIA法與抗體包被ELISA方法的比較分析
    4.6 本章小結
第五章 基于分子信標探針的直接競爭實時熒光定量免疫PCR測定環(huán)境持久性有毒污染物
    5.1 引言
    5.2 生物素化DNA的合成
        5.2.1 生物素化引物及其設計
        5.2.2 生物素化引物的擴增
        5.2.3 生物素化DNA純化
    5.3 分子信標的設計與合成
    5.4 基于分子信標探針的直接競爭FQRT-IPCR實驗原理
    5.5 儀器、材料及試劑
        5.5.1 儀器
        5.5.2 材料及試劑
    5.6 實驗部分
        5.6.1 分子信標的特異性考察
        5.6.2 直接競爭FQRT-IPCR分析方法的條件優(yōu)化
        5.6.3 直接競爭FQRT-IPCR分析方法標準曲線的建立
        5.6.4 直接競爭RTFQ-IPCR分析方法實際樣品的測定和加標回收實驗
        5.6.5 直接競爭FQRT-IPCR分析方法特異性評價
    5.7 結果與討論
        5.7.1 生物素化DNA的鑒定
        5.7.2 分子信標特異性分析
        5.7.3 基于分子信標的直接競爭RTFQ-IPCR條件優(yōu)化
        5.7.4 基于分子信標的直接競爭FQRT-IPCR分析方法標準曲線及實際樣品的測定
    5.8 本章小結
第六章 基于分子信標探針的菲的間接競爭實時熒光定量免疫PCR檢測方法研究
    6.1 引言
    6.2 實驗儀器及材料
        6.2.1 實驗儀器
        6.2.2 實驗材料及試劑
    6.3 實驗方法
        6.3.1 間接競爭FQRT-IPCR分析方法的條件優(yōu)化
        6.3.2 基于分子信標的間接競爭RTFQ-IPCR分析方法標準曲線的建立
        6.3.3 間接競爭FQRT-IPCR分析方法實際環(huán)境樣品的測定和加標回收率
        6.3.4 間接競爭FQRT-IPCR分析方法特異性評價
    6.4 結果與討論
        6.4.1 實驗條件的優(yōu)化
        6.4.2 基于分子信標的菲的間接競爭FQRT-IPCR標準曲線及實際樣品的測定
        6.4.3 方法的特異性分析
        6.4.4 間接競爭RTFQ-IPCR與HPLC結果比較分析
    6.5 本章小結
第七章 基于分子信標探針的PCB77的抗體包被實時熒光定量免疫PCR檢測方法研究
    7.1 引言
    7.2 抗體包被RTFQ-IPCR檢測方法的基本原理
    7.3 實驗儀器及材料
        7.3.1 實驗儀器
        7.3.2 實驗材料及試劑
    7.4 實驗方法
        7.4.1 抗體包被RTFQ-IPCR分析方法的條件優(yōu)化
        7.4.2 抗體包被RTFQ-IPCR分析方法標準曲線的建立
        7.4.3 抗體包被RTFQ-IPCR分析方法實際環(huán)境樣品的測定和加標回收率
        7.4.4 抗體包被RTFQ-IPCR分析方法特異性評價
    7.5 結果與討論
        7.5.1 實驗條件的優(yōu)化
        7.5.2 基于分子信標的抗體包被FQRT-IPCR分析方法標準曲線及實際樣品的測定
        7.5.3 抗體包被RTFQ-IPCR與GC/MS結果比較分析
        7.5.4 方法的特異性分析
        7.5.5 基于分子信標的抗體包被RTFQ-IPCR方法
    7.6 本章小結
第八章 結論與展望
    8.1 結論
    8.2 展望
參考文獻
攻讀博士期間已發(fā)表和未發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3858210