環(huán)境雌激素是指能夠干擾生物體內(nèi)激素代謝平衡，從而影響生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖等生理功能的外源性化學(xué)物質(zhì)。1996年以來(lái)，環(huán)境中的雌激素類物質(zhì)造成動(dòng)物生殖畸變、生殖異常以及人精子數(shù)減少等現(xiàn)象，已經(jīng)引起了世界各國(guó)的廣泛重視。秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)是一種國(guó)際公認(rèn)的模式生物，易于培養(yǎng)，抵抗環(huán)境壓力的能力極強(qiáng)，已廣泛地應(yīng)用于環(huán)境毒理學(xué)研究。RT130品系線蟲是由卵黃原蛋白基因vit-2調(diào)控報(bào)告基因綠色熒光蛋白gfp的基因重組秀麗隱桿線蟲。該品系線蟲受到紫外光或藍(lán)光激發(fā)后腸道處能夠發(fā)射強(qiáng)烈綠色熒光，可直接通過(guò)熒光顯微鏡觀察，熒光信號(hào)的強(qiáng)弱可以表征外界雌激素的水平。本文利用RT130品系線蟲建立了雌二醇(E2)濃度與熒光強(qiáng)度之間的劑量-效應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程，初步構(gòu)建了環(huán)境雌激素的活體篩選方法。該篩選方法可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)單一目標(biāo)污染物雌激素當(dāng)量的測(cè)定以及環(huán)境中不同水體的綜合雌激素效應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。 (1)在不同濃度的E2溶液中暴露后，報(bào)告基因gfp在轉(zhuǎn)基因線蟲的腸道處表達(dá)，從而發(fā)出熒光信號(hào)，且gfp表達(dá)、熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與雌激素含量呈正相關(guān)，熒光信號(hào)的強(qiáng)弱具有雌激素依賴...

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
0 前言
1 秀麗隱桿線蟲在環(huán)境內(nèi)分泌干擾化合物研究中的應(yīng)用
    1.1 C. elegans 的內(nèi)分泌調(diào)控機(jī)制
        1.1.1 激素的核受體(Nuclear Receptors, NRs)
        1.1.2 蛻皮(Molting)的調(diào)控
        1.1.3 壽命(Longevity)的調(diào)控
    1.2 利用 C. elegans 對(duì) EDCs 進(jìn)行篩選
        1.2.1 分子水平
        1.2.2 細(xì)胞、組織和器官水平
        1.2.3 個(gè)體水平
        1.2.4 種群水平
    1.3 C. elegans 在 EDCs 作用機(jī)制研究中的應(yīng)用
        1.3.1 利用 C. elegans 研究 EDCs 對(duì)發(fā)育的影響
        1.3.2 利用 C. elegans 研究 EDCs 對(duì)壽命的影響
    1.4 研究展望
        1.4.1 利用 C. elegans 研究 EDCs 對(duì)細(xì)胞增殖與細(xì)胞分化的影響
        1.4.2 利用 C. elegans 研究 EDCs 對(duì)衰老的影響
    1.5 研究目的與技術(shù)路線
        1.5.1 轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系
        1.5.2 研究目的與技術(shù)路線
2 利用轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系建立環(huán)境雌激素活體篩選方法
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 E2對(duì)轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系綠色熒光強(qiáng)度的影響
        2.2.2 E2標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的建立
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
3 轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系在單一目標(biāo)污染物環(huán)境雌激素效應(yīng)活體篩選中的應(yīng)用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 不同污染物對(duì)轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系綠色熒光強(qiáng)度的影響
        3.2.2 不同污染物的雌激素當(dāng)量
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
4 利用轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲 RT130 品系監(jiān)測(cè)環(huán)境中多種污染物的環(huán)境雌激素綜合效應(yīng)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 水樣采集地的選擇
        4.1.2 樣品預(yù)處理
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)藥品
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.5 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.6 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 海泊河污水處理廠
        4.2.2 麥島污水處理廠
        4.2.3 小澗西垃圾填埋場(chǎng)
        4.2.4 青島近岸不同功能區(qū)海域
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3788450