石油烴降解菌的篩選及石油污染土壤的生物修復(fù)機(jī)理研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-30 00:49
石油作為一種重要的能源物質(zhì),是人類生產(chǎn)、生活中不可或缺的生產(chǎn)資料。它是由烴類化合物組成的一種復(fù)雜化合物,石油中芳香類物質(zhì),尤其是以二環(huán)和三環(huán)為代表的多環(huán)芳烴類物質(zhì)對(duì)人和動(dòng)物的毒性較大,具有致癌作用。隨著人們對(duì)石油產(chǎn)品的大量利用,石油污染也隨之而來,并且有加重的趨勢(shì)。因此,如何高效的降解環(huán)境中的石油烴以減小石油造成的污染成為人們關(guān)注并且研究的重點(diǎn)。 本論文分別從陜北子長、陜北清澗、甘肅慶陽三個(gè)不同地區(qū)的油污土壤中,利用Bushi-hass培養(yǎng)基共富集篩選出16株石油烴降解菌,通過實(shí)驗(yàn)研究了篩選出的降解菌對(duì)石油烴的降解效果與其理化性質(zhì)、降解基因之間的關(guān)系;于陜北子長供試油污土壤中投加篩選出的降解菌對(duì)其進(jìn)行微生物修復(fù),針對(duì)該地區(qū)油污土壤狀況研究篩選出的降解菌對(duì)該區(qū)域土壤的修復(fù)效果,并進(jìn)一步從不同處理的修復(fù)效果、理化性質(zhì)、降解基因、土壤降解菌種類數(shù)量、修復(fù)土壤中微生物群落多樣性變化以及降解過程中石油烴組分變化等方面,對(duì)陜北子長縣油污土壤的微生物降解修復(fù)效果進(jìn)行機(jī)理研究。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)得到以下結(jié)論: 實(shí)驗(yàn)篩選出的16株菌分屬于銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、施氏假...
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 簡(jiǎn)介
1.1.1 石油的重要性和分布特征
1.1.2 土壤
1.2 石油污染及危害
1.2.1 土壤石油污染
1.2.2 水體石油污染及危害
1.2.3 大氣石油污染及危害
1.3 石油污染土壤的主要修復(fù)技術(shù)及特點(diǎn)
1.3.1 物理修復(fù)技術(shù)
1.3.2 化學(xué)修復(fù)技術(shù)
1.3.3 植物修復(fù)技術(shù)
1.3.4 微生物修復(fù)技術(shù)
1.4 土壤微生物檢測(cè)技術(shù)
1.4.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)
1.4.2 變性梯度凝膠電泳(DGGE)
1.4.3 最大或然數(shù)計(jì)數(shù)法(MPN)
1.5 論文研究?jī)?nèi)容、目的和意義
2 石油降解菌的篩選與鑒定
2.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1.1 石油降解菌菌源土壤性質(zhì)測(cè)定方法
2.1.2 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.4 石油降解菌篩選方法
2.1.5 菌種的 PCR 擴(kuò)增及 16S rRNA 基因序列分析方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3 石油烴降解菌的降解效果、理化性質(zhì)及降解基因檢測(cè)
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 降解菌對(duì)石油烴的降解效果測(cè)定方法
3.2.2 降解菌的理化性質(zhì)測(cè)定方法
(一) 菌株乳化性質(zhì)測(cè)定方法
(二) 菌株排油圈直徑測(cè)定方法
(三) 菌株淀粉酶實(shí)驗(yàn)方法
(四) 菌株甲基紅實(shí)驗(yàn)(M-R 實(shí)驗(yàn))方法
(五) 菌株過氧化氫酶實(shí)驗(yàn)方法
3.2.3 菌株降石油烴解基因測(cè)定方法
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 菌株的石油烴降解效果與其理化特性測(cè)定結(jié)果
3.3.2 菌株所含石油烴降解基因測(cè)定結(jié)果
4 石油污染土壤的一期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 一期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
4.2.2 修復(fù)土壤中石油烴含量的測(cè)定方法
4.2.3 修復(fù)第 8 周時(shí)土壤中不同組分的石油烴測(cè)定方法
4.2.4 土壤過氧化氫酶的測(cè)定方法
4.2.5 土壤中石油烴降解基因檢測(cè)方法
4.2.6 土壤中石油烴、烷烴、多環(huán)芳烴降解菌個(gè)數(shù)檢測(cè)(MPN 法)
4.2.7 土壤微生物群落分析(PCR-DGGE 及克隆測(cè)序分析)
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 不同修復(fù)處理對(duì)土壤中石油烴的去除效果
4.3.2 修復(fù)第 8 周時(shí)土壤中不同組分的石油烴測(cè)定結(jié)果
4.3.3 修復(fù)土壤中過氧化氫酶含量測(cè)定結(jié)果
4.3.4 修復(fù)土壤中的石油烴降解基因檢測(cè)結(jié)果
4.3.5 修復(fù)土壤中降解菌數(shù)量測(cè)定結(jié)果
4.3.6 不同處理土壤中的微生物群落分析(DGGE 及克隆測(cè)序分析)
5 微生物修復(fù)后期探索實(shí)驗(yàn)
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.2 微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案及方法
5.2.1 二期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
5.2.2 三期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
5.2.3 微生物修復(fù)降解效果測(cè)定方法
5.2.4 三期微生物修復(fù)土壤石油烴組分測(cè)定方法
5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
5.3.1 二、三期微生物修復(fù)效果評(píng)價(jià)
5.3.2 修復(fù)土壤中石油烴組分測(cè)定
6 結(jié)論與建議
6.1 石油降解菌的篩選及其理化性質(zhì)和降解基因檢測(cè)
6.2 石油污染土壤不同生物處理的生物修復(fù)過程
6.3 實(shí)驗(yàn)建議
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
本文編號(hào):3774841
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 緒論
1.1 簡(jiǎn)介
1.1.1 石油的重要性和分布特征
1.1.2 土壤
1.2 石油污染及危害
1.2.1 土壤石油污染
1.2.2 水體石油污染及危害
1.2.3 大氣石油污染及危害
1.3 石油污染土壤的主要修復(fù)技術(shù)及特點(diǎn)
1.3.1 物理修復(fù)技術(shù)
1.3.2 化學(xué)修復(fù)技術(shù)
1.3.3 植物修復(fù)技術(shù)
1.3.4 微生物修復(fù)技術(shù)
1.4 土壤微生物檢測(cè)技術(shù)
1.4.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)
1.4.2 變性梯度凝膠電泳(DGGE)
1.4.3 最大或然數(shù)計(jì)數(shù)法(MPN)
1.5 論文研究?jī)?nèi)容、目的和意義
2 石油降解菌的篩選與鑒定
2.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
2.1.1 石油降解菌菌源土壤性質(zhì)測(cè)定方法
2.1.2 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.4 石油降解菌篩選方法
2.1.5 菌種的 PCR 擴(kuò)增及 16S rRNA 基因序列分析方法
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3 石油烴降解菌的降解效果、理化性質(zhì)及降解基因檢測(cè)
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 降解菌對(duì)石油烴的降解效果測(cè)定方法
3.2.2 降解菌的理化性質(zhì)測(cè)定方法
(一) 菌株乳化性質(zhì)測(cè)定方法
(二) 菌株排油圈直徑測(cè)定方法
(三) 菌株淀粉酶實(shí)驗(yàn)方法
(四) 菌株甲基紅實(shí)驗(yàn)(M-R 實(shí)驗(yàn))方法
(五) 菌株過氧化氫酶實(shí)驗(yàn)方法
3.2.3 菌株降石油烴解基因測(cè)定方法
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 菌株的石油烴降解效果與其理化特性測(cè)定結(jié)果
3.3.2 菌株所含石油烴降解基因測(cè)定結(jié)果
4 石油污染土壤的一期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
4.2 一期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
4.2.2 修復(fù)土壤中石油烴含量的測(cè)定方法
4.2.3 修復(fù)第 8 周時(shí)土壤中不同組分的石油烴測(cè)定方法
4.2.4 土壤過氧化氫酶的測(cè)定方法
4.2.5 土壤中石油烴降解基因檢測(cè)方法
4.2.6 土壤中石油烴、烷烴、多環(huán)芳烴降解菌個(gè)數(shù)檢測(cè)(MPN 法)
4.2.7 土壤微生物群落分析(PCR-DGGE 及克隆測(cè)序分析)
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 不同修復(fù)處理對(duì)土壤中石油烴的去除效果
4.3.2 修復(fù)第 8 周時(shí)土壤中不同組分的石油烴測(cè)定結(jié)果
4.3.3 修復(fù)土壤中過氧化氫酶含量測(cè)定結(jié)果
4.3.4 修復(fù)土壤中的石油烴降解基因檢測(cè)結(jié)果
4.3.5 修復(fù)土壤中降解菌數(shù)量測(cè)定結(jié)果
4.3.6 不同處理土壤中的微生物群落分析(DGGE 及克隆測(cè)序分析)
5 微生物修復(fù)后期探索實(shí)驗(yàn)
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑
5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.2 微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案及方法
5.2.1 二期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
5.2.2 三期微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)方案
5.2.3 微生物修復(fù)降解效果測(cè)定方法
5.2.4 三期微生物修復(fù)土壤石油烴組分測(cè)定方法
5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
5.3.1 二、三期微生物修復(fù)效果評(píng)價(jià)
5.3.2 修復(fù)土壤中石油烴組分測(cè)定
6 結(jié)論與建議
6.1 石油降解菌的篩選及其理化性質(zhì)和降解基因檢測(cè)
6.2 石油污染土壤不同生物處理的生物修復(fù)過程
6.3 實(shí)驗(yàn)建議
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
本文編號(hào):3774841
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