本文首先簡(jiǎn)要回顧了國(guó)內(nèi)外石油污染耕地生物修復(fù)技術(shù)及其實(shí)際應(yīng)用現(xiàn)狀，重點(diǎn)介紹了微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在揭示土壤修復(fù)過(guò)程中土壤微生物種類、數(shù)量以及功能基因的變化等方面的研究進(jìn)展，展望了該技術(shù)在生物修復(fù)過(guò)程的設(shè)計(jì)、實(shí)施以及效果評(píng)估方面的應(yīng)用前景。研究了接種陰溝腸桿菌（E. cloacae）的石油污染土壤的生物強(qiáng)化修復(fù)過(guò)程，PCR-DGGE分析結(jié)果顯示陰溝腸桿菌可在污染土壤中穩(wěn)定存在，在接種微生物的同時(shí)添加麥秸可顯著增加土壤微生物群落的種類和數(shù)量；所獲得的真菌和細(xì)菌的數(shù)量最多，分別達(dá)到5.5×10~3和4.6×10~7；土壤脫氫酶活最高，達(dá)到0.79；石油烴的降解率也最高，處理56d后的石油烴降解率達(dá)到56%。微生態(tài)分析結(jié)果還顯示了不同的修復(fù)操作所獲得的土壤微生態(tài)組成上的差異。采用基因文庫(kù)法分析對(duì)比了污染耕地、修復(fù)耕地和正常耕地的細(xì)菌和真核生物的基因類型和組成。結(jié)果顯示正常耕地細(xì)菌和真核生物的基因類型分別為122個(gè)和34個(gè)，細(xì)菌優(yōu)勢(shì)菌門(mén)是變形桿菌門(mén)、酸桿菌門(mén)和擬桿菌門(mén)；真核生物優(yōu)勢(shì)門(mén)是節(jié)肢動(dòng)物門(mén)、真菌未知、雙核真菌門(mén)和絲足蟲(chóng)門(mén)。石油污染導(dǎo)致土壤細(xì)菌和真菌基因類型分別減少到96個(gè)和21個(gè)，優(yōu)勢(shì)細(xì)菌... 

【文章頁(yè)數(shù)】：127 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 緒論
    1.2 生物修復(fù)
    1.3 石油污染土壤生物修復(fù)技術(shù)研究進(jìn)展
        1.3.1 高效降解菌株和菌群的篩選
        1.3.2 生物修復(fù)強(qiáng)化技術(shù)研究進(jìn)展
        1.3.3 生物修復(fù)評(píng)估體系研究進(jìn)展
    1.4 微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)及其在生物修復(fù)中的應(yīng)用
        1.4.1 微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)
        1.4.2 分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在土壤修復(fù)中的應(yīng)用
    1.5 展望
    1.6 本文研究框架
第2章 生物強(qiáng)化過(guò)程中的微生態(tài)監(jiān)測(cè)與分析
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 模擬土壤微環(huán)境體系的制備
        2.2.3 投加細(xì)菌的培養(yǎng)與接種
        2.2.4 總石油烴含量（TPH）分析
        2.2.5 石油烴組分測(cè)定
        2.2.6 土壤脫氫酶活測(cè)定
        2.2.7 土壤微生物計(jì)數(shù)
        2.2.8 土壤微環(huán)境總DNA提取
        2.2.9 16S rDNAV3區(qū)擴(kuò)增
        2.2.10 變性梯度凝膠電泳（DGGE）
        2.2.11 序列比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 土壤樣品總石油烴含量
        2.3.2 土壤脫氫酶活測(cè)定
        2.3.3 土壤微生物數(shù)量測(cè)定
        2.3.4 變性梯度凝膠電泳（DGGE）分析
    2.4 本章小結(jié)
第3章 石油污染土壤的微生物多樣性解析
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 土壤細(xì)菌總 DNA 提取
        3.2.3 土壤真核生物總 DNA 提取
        3.2.4 土壤DNA檢測(cè)及純化
        3.2.5 分類基因的 PCR 擴(kuò)增
        3.2.6 分類基因文庫(kù)的建立
        3.2.7 分類基因序列的測(cè)定
        3.2.8 分類基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.2.9 分類基因序列的 GenBank 提交
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 土壤理化性質(zhì)及污染物濃度分析
        3.3.2 土壤DNA提取
        3.3.3 土壤粗DNA的純化
        3.3.4 分類基因的PCR擴(kuò)增
        3.3.5 三種土壤樣品細(xì)菌菌群系統(tǒng)發(fā)育分析及結(jié)構(gòu)特征
        3.3.6 三種土壤樣品真核生物系統(tǒng)發(fā)育分析及結(jié)構(gòu)特征
    3.4 本章小結(jié)
第4章 土壤功能微生物多樣性解析
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 土壤細(xì)菌總DNA提取及純化方法
        4.2.3 功能基因擴(kuò)增方法
        4.2.4 功能基因克隆文庫(kù)的建立
        4.2.5 功能基因序列測(cè)定
        4.2.6 功能基因系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.2.7 分類基因序列的 GenBank 提交
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 功能基因的PCR擴(kuò)增
        4.3.2 固氮基因（nifH）系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.3.3 氨基單加氧酶基因（amoA）系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.3.4 硝酸鹽還原酶基因（narG）系統(tǒng)發(fā)育分析
    4.4 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 本文結(jié)論
    5.2 主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)
    5.3 未來(lái)工作展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 A 實(shí)驗(yàn)儀器
附錄 B 主要試劑
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]石油污染土壤微生物修復(fù)的研究[D]. 李寶明.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007



本文編號(hào)：3661793