發(fā)布時間：2022-02-08 22:03

　　本論文介紹了核糖體展示（ribosome display）方法用于小分子環(huán)境化學(xué)污染物模擬抗體（anticalin）篩選的原理、實驗技術(shù)，并以典型環(huán)境化學(xué)污染物雌二醇、百草枯為研究對象，對它們的模擬抗體進(jìn)行了活性鑒定。雌二醇是一種小分子甾體類激素,在組織液及血液中的含量可反應(yīng)婦產(chǎn)科、內(nèi)科、內(nèi)分泌科、骨科及腫瘤等多種疾病,具有廣泛的臨床應(yīng)用價值。因其可以提高畜禽瘦肉比并促進(jìn)動物生長，在畜禽養(yǎng)殖業(yè)曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用。但由于雌二醇可在動物組織內(nèi)形成殘留，通過食物鏈危害人類健康，使男性兒童乳腺發(fā)育呈女性化，男性生殖系統(tǒng)發(fā)育異�；蛞鸩∽�，女性兒童提前發(fā)育，并導(dǎo)致女性乳腺癌和子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生率上升。因此，對肉及其肉制品中雌二醇的監(jiān)測是確保廣大市民食用“放心肉”的必要措施。百草枯（Paraquat, PQ）又名克蕪蹤，是一種速效觸殺型滅生性季銨鹽類除草劑，是我國廣泛使用的除草劑之一。百草枯有效成分為1，1′-二甲基-4，4′-聯(lián)吡啶陽離子鹽,它在農(nóng)作物中的殘留對人、獸有毒害作用。百草枯可以經(jīng)胃腸道、呼吸道和皮膚吸收，以導(dǎo)致肺纖維化。我國國標(biāo)GB1633321996規(guī)定:菜籽油、柑桔、成品糧、梨和蘋... 

【文章來源】：天津大學(xué)天津市211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

雌二醇的結(jié)構(gòu)式

1.2 百草枯：1,1-二甲基-4,4-聯(lián)吡啶陽離Fig 1.2 The structure of Paraquats用及毒副作用是一種聯(lián)吡啶類、觸殺型、滅生性除草劑應(yīng)用于園林除草、非耕地化學(xué)除草（例如等的除草），能殺滅大部分闊葉雜草及禾藥液接觸土壤后，能被土壤的膠體迅速并自從 1955 年英國 ICI 作物保護(hù)公司發(fā)現(xiàn)世界上 130 多個國家和地區(qū)得到推廣和應(yīng)用量在進(jìn)一步擴(kuò)大[24]。我國是百草枯最大毒性有很強(qiáng)的毒性作用。大多數(shù)是由于誤服或收中毒致死。有資料顯示，使用百草枯除

過來自美國、瑞士、英國等不同研究組的不斷改進(jìn)和完善，該展示技術(shù)已經(jīng)日臻成熟，目前成為一種十分有效的研究體外分子選擇與進(jìn)化強(qiáng)有力的工具。圖1.3 Ribosome Display 技術(shù)流程圖Fig 1.3 Schematic representation of a ribosome display selection round1.2.5 核糖體展示的優(yōu)勢RD 技術(shù)的應(yīng)用使得構(gòu)建大容量分子文庫變得容易，隨之采用合適的篩選方法，可以快速、非常簡便、有效的篩選到生物活性物質(zhì)。RD 的優(yōu)點有：(1) 建庫方法簡便。RD 技術(shù)完全在體外進(jìn)行，通過 PCR 進(jìn)行所有復(fù)制與擴(kuò)增，因此，可方便地建立核糖體表面展示文庫。(2)庫容量大，分子多樣性增加，增加了獲得目標(biāo)分子的機(jī)會。在一般情況下，蛋白質(zhì)配體反應(yīng)功能分子比非功能分子序列要少得多，所以，能否獲得具有特定活性分子的機(jī)率與可供篩選的 RD 展示庫容量成正比[61-63]。大容量具有兩個優(yōu)勢：可提高給定親和力值分子序列的多樣性，也可提高目標(biāo)分子篩選的機(jī)率。RD 技術(shù)完全在體外進(jìn)行，無細(xì)胞系中含有高濃度的核糖體(1013～1015/mL)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]除草劑百草枯的毒理安全性研究[D]. 莊英男.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3615833