本文以從山西陽泉所采集的煤矸石中提取分離出的氧化亞鐵硫桿菌為主要研究對象，采用現(xiàn)場采樣、室內(nèi)實驗、模擬實驗相結(jié)合的方法，針對酸性煤矸石環(huán)境污染問題，在不同溫度、環(huán)境中的氧化亞鐵硫桿菌上施用不同比例殺菌劑進(jìn)行正交實驗，在分別研究單一殺菌劑機(jī)理的基礎(chǔ)上，復(fù)合兩種功能互補有協(xié)同作用的殺菌劑，并考察其殺菌效果和機(jī)理，篩選出最佳比例和條件的復(fù)合殺菌劑。煤矸石山上存在氣候環(huán)境變化問題，殺菌劑的作用不能持久且容易失效，因此對復(fù)合殺菌劑進(jìn)行保水劑的緩釋處理，進(jìn)一步篩選最佳比例和條件的針對氧化亞鐵硫桿菌的緩釋復(fù)合殺菌劑并應(yīng)用于實際，為酸性自燃煤矸石山的原位控制與生態(tài)重建提供依據(jù)。 

【文章來源】：中國礦業(yè)大學(xué)(北京)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
詳細(xì)摘要
Detailed Abstract
1 緒論
    1.1 選題背景及研究意義
        1.1.1 選題背景
        1.1.2 研究意義
    1.2 氧化亞鐵硫桿菌及其殺菌劑概況
        1.2.1 氧化亞鐵硫桿菌的生物學(xué)特性
        1.2.2 殺菌劑的分類
    1.3 利用殺菌劑控制煤矸石山酸性污染現(xiàn)狀
        1.3.1 國外研究現(xiàn)狀
        1.3.2 國內(nèi)研究現(xiàn)狀
    1.4 研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        1.4.1 主要研究內(nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
    1.5 本章小結(jié)
2 氧化亞鐵硫桿菌富集分離與純化鑒定
    2.1 實驗材料
        2.1.1 樣品來源
        2.1.2 感受態(tài)菌株與質(zhì)粒
        2.1.3 酶、試劑、引物和 DNA 序列測定
        2.1.4 主要培養(yǎng)基
        2.1.5 主要試劑的配制
        2.1.6 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌種的培養(yǎng)和初期篩選
        2.2.2 總 DNA 的提取
        2.2.3 樣品基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.2.4 瓊脂糖凝膠的配制
        2.2.5 瓊脂糖凝膠電泳及切膠
        2.2.6 擴(kuò)增產(chǎn)物的回收、純化及回收率的檢測
        2.2.7 回收后產(chǎn)物和 pEASY-T3 質(zhì)粒的連接及轉(zhuǎn)化
        2.2.8 感受態(tài)細(xì)胞的檢測
        2.2.9 陽性克隆樣本的選擇、菌落 PCR 及 PCR 產(chǎn)物的檢測
        2.2.10 菌落 PCR 陽性產(chǎn)物的 ALU1 酶切和酶切產(chǎn)物的檢測
        2.2.11 酶切圖譜的統(tǒng)計分類和對應(yīng)菌落的測序
        2.2.12 基因數(shù)據(jù)的比對
        2.2.13 雙層固體平板（iFeO）純化菌種
        2.2.14 氧化亞鐵硫桿菌的大量培養(yǎng)
        2.2.15 總 DNA 的提取
        2.2.16 基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.2.17 瓊脂糖凝膠電泳驗證及切膠
        2.2.18 擴(kuò)增產(chǎn)物的回收、純化及回收率檢測
        2.2.19 PCR 純化產(chǎn)物的測序
        2.2.20 基因數(shù)據(jù)的比對
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 菌種的培養(yǎng)
        2.3.2 樣品基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增、電泳驗證及純化回收
        2.3.3 感受態(tài)細(xì)胞的檢測
        2.3.4 陽性克隆樣本的選擇
        2.3.5 陽性克隆的菌落 PCR
        2.3.6 菌落 PCR 陽性產(chǎn)物的 ALU1 酶切和酶切產(chǎn)物的驗證
        2.3.7 酶切圖譜的統(tǒng)計分類和對應(yīng)菌落的測序
        2.3.8 基因數(shù)據(jù)的比對結(jié)果
        2.3.9 雙層固體平板（iFeO）純化菌種
        2.3.10 菌種的活化培養(yǎng)
        2.3.11 基因組 16S rDNA 的擴(kuò)增
        2.3.12 PCR 產(chǎn)物的測序
        2.3.13 基因數(shù)據(jù)的比對
    2.4 本章小結(jié)
3 玉潔純、卡松和 SDS 的抑菌作用
    3.1 實驗材料
        3.1.1 菌種選擇
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 殺菌劑
        3.1.4 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 最小抑菌濃度的確定
        3.2.2 單一殺菌劑對 A. f 菌殺菌的穩(wěn)定性研究
        3.2.3 菌體內(nèi)蛋白、超微結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)的檢測
        3.2.4 不同單一殺菌劑對 A. f 菌鐵氧化酶的抑制
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 卡松和玉潔純分別最佳施用濃度
        3.3.2 不同環(huán)境中單一殺菌劑對 A. f 菌的抑菌率
        3.3.3 菌體內(nèi)蛋白、超微結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)的檢測
        3.3.4 不同單一殺菌劑對 A. f 菌鐵氧化酶的抑制情況
    3.4 本章小結(jié)
4 復(fù)合殺菌劑卡松/SDS 和玉潔純/SDS 的抑菌作用
    4.1 實驗材料
        4.1.1 菌種
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 殺菌劑
        4.1.4 實驗用具
        4.1.5 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 卡松/SDS、玉潔純/SDS 的最佳施用比例
        4.2.2 復(fù)合殺菌劑對 A. f 菌的抑菌穩(wěn)定性
        4.2.3 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑殺菌效果對比
        4.2.4 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑對 A. f 菌氧化 Fe~(2+)性能的影響對比
        4.2.5 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑抑菌圈對比
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 pH
        4.3.2 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 Eh
        4.3.3 加入不同比例兩種復(fù)合殺菌劑菌液的 Fe~(2+)氧化率
        4.3.4 卡松/SDS、玉潔純/SDS 抑菌效果的比較
        4.3.5 復(fù)合殺菌劑對 A. f 菌的抑菌穩(wěn)定性
        4.3.6 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑殺菌效果對比
        4.3.7 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑作用后 A. f 菌氧化 Fe~(2+)性能的測定
        4.3.8 復(fù)合殺菌劑與單一殺菌劑抑菌圈的比較
    4.4 本章小結(jié)
5 兩種復(fù)合殺菌劑卡松/SDS 和玉潔純/SDS 的抑菌機(jī)理
    5.1 實驗材料
        5.1.1 待測菌液
        5.1.2 培養(yǎng)基
        5.1.3 主要溶液配制
        5.1.4 殺菌劑
        5.1.5 實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 復(fù)合殺菌劑對 A. f 菌抑菌活力的測定
        5.2.2 復(fù)合殺菌劑對 A. f 菌細(xì)胞完整性的影響
        5.2.3 A. f 菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 抑菌活力
        5.3.2 細(xì)胞完整性
        5.3.3 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化
    5.4 本章小結(jié)
6 緩釋復(fù)合殺菌劑的條件研究
    6.1 實驗材料
        6.1.1 實驗菌種
        6.1.2 殺菌劑
        6.1.3 實驗試劑
        6.1.4 實驗器具和儀器
    6.2 實驗方法
        6.2.1 保水劑對復(fù)合殺菌劑的吸、持、釋性能
        6.2.2 保水劑對復(fù)合殺菌劑殺菌性能的影響
        6.2.3 緩釋復(fù)合殺菌劑對 A. f 菌的最小抑菌量
        6.2.4 不同條件對緩釋復(fù)合殺菌劑殺菌效果的影響
        6.2.5 緩釋復(fù)合殺菌劑緩釋性能的考察
        6.2.6 緩釋復(fù)合殺菌劑在煤矸石中的應(yīng)用
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 保水劑對復(fù)合殺菌劑的吸、持、釋性能
        6.3.2 保水劑對復(fù)合殺菌劑殺菌性能的影響
        6.3.3 緩釋復(fù)合殺菌劑對 A.f 菌的最小抑菌量
        6.3.4 不同條件對緩釋復(fù)合殺菌劑殺菌效果的影響
        6.3.5 緩釋復(fù)合殺菌劑緩釋性能的測定
        6.3.6 緩釋復(fù)合殺菌劑在煤矸石中的應(yīng)用
    6.4 本章小結(jié)
7 結(jié)論與展望
    7.1 主要研究成果與結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 存在的問題
    7.4 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
在學(xué)期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文及參加科研工作情況



本文編號：3567213