好氧反硝化菌是一類(lèi)可以在有氧條件下進(jìn)行反硝化活動(dòng)并去除氮素的微生物，其種類(lèi)包括細(xì)菌、放線菌和真菌等。自從好氧反硝化現(xiàn)象被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，篩選并研究較多的好氧反硝化微生物主要是細(xì)菌而好氧反硝化真菌發(fā)現(xiàn)較少。研究中發(fā)現(xiàn)，真菌具有更廣闊的的碳氮源使用范圍和環(huán)境適應(yīng)能力。基于此，本課題采用極限稀釋法、BTB選擇性培養(yǎng)基法和亞硝酸鹽指示劑法相結(jié)合的方法從膠州灣河流底泥中篩選出5株具有高效好氧反硝化能力的真菌并對(duì)其進(jìn)行鑒定和研究。鑒定結(jié)果表明，這5株真菌分別屬于青霉菌屬、鏈格孢屬、鏈格孢屬、子囊菌屬和鐮刀菌屬。在受測(cè)試的4種氮源和8種碳源中，5株真菌均能以氨氮、亞硝酸鹽、硝酸鹽和尿素作為氮源進(jìn)行生長(zhǎng)，均能以乙酸鈉、葡萄糖、可溶性淀粉和蔗糖作為碳源進(jìn)行生長(zhǎng)，但均不能以檸檬酸鈉、草酸鈉和碳酸鈉為碳源進(jìn)行生長(zhǎng)。青霉菌和鏈格孢菌不能以丁二酸鈉作為碳源而子囊菌和鐮刀菌則能利用丁二酸鈉。5株真菌去除氨氮均采用同化利用的方式，葡萄糖、可溶性淀粉和蔗糖比乙酸鈉更容易被真菌同化利用，因此在這3種碳源培養(yǎng)基中能夠獲得更高的氨氮去除率和菌干重。碳源和菌株種類(lèi)共同影響培養(yǎng)基pH的變化，pH過(guò)高或過(guò)低是真菌去除氨氮過(guò)程中最易出現(xiàn)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)石油大學(xué)(華東)山東省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：146 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

異養(yǎng)硝化代謝途徑Fig1-1Metabolicpathwaysofnitrification

挑取 恒溫 箱 培養(yǎng) 7 天 后 的各 BT B 平板 培 養(yǎng)基 上 使培 養(yǎng)基 由 綠變 藍(lán) 的絨 毛 狀 菌株 進(jìn)行 劃線 分離 。 2 .1 .4 .2 純 化 步驟 得到 BT B 平板 上的 混 合菌 后 ，仍 然 使用 B T B 固 體 培 養(yǎng)基 進(jìn)行 再 次篩 選 和 劃線 分離 具體 操 作為 ：（1 ）用 接 種環(huán) 挑 取 各菌 落菌 株 并在 BT B 固體 培養(yǎng) 基 上劃 線 ， 劃線 后倒 置 放入 恒 溫培養(yǎng) 箱并 于 3 0℃ 下 培 養(yǎng) 7 天 ， 實(shí)驗(yàn) 時(shí) 注意 滅 菌要 徹 底且 不 要?jiǎng)?破 培養(yǎng) 基 表面 。 （2 ）重 復(fù) 挑取 使 B T B 培 養(yǎng) 基 變藍(lán) 的菌 落 并劃 線 ，直 到 BT B 培養(yǎng) 基 上的 菌落 清 晰、 外形 一致 、 無(wú)伴 生 菌和 雜 菌 。一 般來(lái) 說(shuō) ，2 ~ 3 次劃 線便 可 得到 單 一菌 株 。2 .1 .5 初 篩 及純 化 結(jié)果 2 .1 .5 . 1 初 篩 結(jié)果 初篩 所 得混 合 菌在 平 板上 的 生長(zhǎng) 狀 態(tài)如 圖 2 -1 所示 。

第二 章 好 氧反 硝 化 真菌 的 篩 選和 鑒 定 的菌 落突 起 ，這 些 菌 落可 能 為細(xì) 菌菌 落 ，有 5 塊 菌 落呈 現(xiàn) 出絨 毛 狀， 可 能為 真 菌菌 落 。從右 圖可 以 看出 ， 該 平 板上 只 有 1 種絨 毛狀 特 征明 顯 的 菌株 ，該 菌 株生 長(zhǎng) 部 分的 培養(yǎng) 基 已變 為藍(lán) 色 ，初 步 斷 定此 菌 株為 好氧 反 硝化 真 菌。 從 兩 種稀 釋 倍數(shù) 篩 選結(jié) 果 來(lái) 看， 稀 釋 倍數(shù) 越高 ， 好氧 反 硝 化單 菌出 現(xiàn) 的概 率 越大 ， 這 充 分體 現(xiàn) 了 極限 稀釋 法 的作 用 。2 .1 .5 . 2 單菌 及其 菌 落特 征 通過(guò) 劃 線分 離過(guò) 程 后得 到 5 株單 菌， 分 別 命名 為 H Y -1 、H Y - 2 、H Y -3 、H Y -4 、H Y -5 。將此 5 株單 菌于 乙 酸鈉 固 體培 養(yǎng) 基 上劃 線并 倒 置放 入 恒 溫培 養(yǎng) 箱并 于 3 0 ℃下 培 養(yǎng) 7 天后 觀察 其菌 落 特征 。 乙酸 鈉固 體 培養(yǎng) 基 組成 如 下（ g/ L ）： 瓊 脂 ，2 0； N a N O3，1 ；K H2PO 4，1 ；N a C l ，0 .1 5； CH 3CO O N a ·3 H2O ， 8 ； pH ， 6 .5 ~ 7 .0 。 培養(yǎng) 基 在 1 2 1℃ 下 滅菌 2 0 分 鐘后 倒 平 板 冷 卻后 使用。


本文編號(hào)：3408886