發(fā)布時(shí)間：2021-09-03 14:50

　　蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis, Bt）是一種革蘭氏陽(yáng)性土壤細(xì)菌,在孢子形成過程中,可以產(chǎn)生殺蟲晶體蛋白,又稱δ-內(nèi)毒素,這些毒素對(duì)靶標(biāo)昆蟲具有嚴(yán)格的專一性。目前,已有幾種表達(dá)Bt基因的轉(zhuǎn)基因作物如Bt棉花得以商業(yè)化種植,有關(guān)Bt作物對(duì)（?）靶標(biāo)生物的影響主要集中在陸地生態(tài)系統(tǒng),但轉(zhuǎn)Bt基因作物中的Bt蛋白質(zhì)可通過根際分泌,花粉散布和收獲后的作物殘留物的擴(kuò)散,實(shí)現(xiàn)從陸地生態(tài)系統(tǒng)到水生生態(tài)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移。因此,評(píng)價(jià)Bt蛋白對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的潛在風(fēng)險(xiǎn)顯得尤為重要,但目前有關(guān)轉(zhuǎn)Bt基因作物對(duì)水生生物的研究很匱乏。小球藻、大型蚤和兩棲蛙類是稻田間常見的水生生物,代表了食物鏈上浮游植物、浮游動(dòng)物和大型脊椎動(dòng)物這3個(gè)不同的營(yíng)養(yǎng)級(jí)。本研究以Cry1Ca純蛋白、轉(zhuǎn)cry1Ca基因抗蟲水稻（T1C-19）、轉(zhuǎn)cry1Ab/1Ac基因抗蟲水稻（HH1）及其親本對(duì)照明恢63（MH63）為研究材料,通過一系列室內(nèi)外試驗(yàn)研究其對(duì)上述3種代表性水生生物的影響研究,評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)Bt基因水稻種植的環(huán)境安全性。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：1) Cry1Ca純蛋白對(duì)蛋白核小球藻生長(zhǎng)的影響：通過蛋白核小球藻三... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：121 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因水稻安全性評(píng)價(jià)研究進(jìn)展
        1 轉(zhuǎn)基因水稻整體研究情況
        2 食用安全評(píng)價(jià)
            2.1 轉(zhuǎn)基因食品安全性評(píng)價(jià)準(zhǔn)則和標(biāo)準(zhǔn)
            2.2 營(yíng)養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)
            2.3 毒理學(xué)評(píng)價(jià)
        3 環(huán)境安全評(píng)價(jià)
            3.1 對(duì)非靶標(biāo)生物的影響
            3.2 對(duì)非靶標(biāo)生物影響的評(píng)價(jià)程序與方法
    第二節(jié) 轉(zhuǎn)Bt基因作物對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)影響
        1 Bt蛋白進(jìn)入水生生態(tài)系統(tǒng)的途徑
            1.1 根際分泌與土壤吸附
            1.2 花粉和作物粉塵
            1.3 作物殘?bào)w
        2 Bt作物在水體中的降解
        3 Bt蛋白對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的影響
            3.1 對(duì)水生生物群落的影響
            3.2 對(duì)毛翅目的影響
            3.3 對(duì)枝角目的影響
        4 研究展望
    第三節(jié) 三種代表性水生生物在毒理學(xué)上的應(yīng)用
        1 蛋白核小球藻在水生毒理上的應(yīng)用
        2 大型蚤在水生毒理上的應(yīng)用
        3 爪蟾在水生毒理學(xué)上的應(yīng)用
    本研究的目的與意義
    本章參考文獻(xiàn)
第二章 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)小球藻生物學(xué)影響
    第一節(jié) Cry1Ca純蛋白對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響
        1 材料與方法
            1.1 供試試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 小球藻及培養(yǎng)基
            1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.5 Cry1Ca蛋白含量的測(cè)定
            1.6 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 不同濃度Cry1Ca蛋白對(duì)小球藻生長(zhǎng)影響
            2.2 第一代不同處理蛋白核小球藻上清中Cry1Ca蛋白含量
            2.3 不同世代藻體中Cry1Ca蛋白含量
            2.4 Cry1Ca蛋白在高密度小球藻中的聚集情況
        3 討論
    第二節(jié) 轉(zhuǎn)Cry1Ca基因水稻莖稈浸出液對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響
        1 材料與方法
            1.1 供試試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 轉(zhuǎn)基因水稻種植
            1.4 水稻莖桿的采集
            1.5 水稻莖稈中Cry1Ca蛋白在水中的降解
            1.6 水稻莖稈浸出液的制備
            1.7 蛋白核小球藻測(cè)定體系
            1.8 酶活的測(cè)定
            1.9 Cry1C殺蟲蛋白的定量分析
            1.10 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 水稻莖稈的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及Cry1Ca蛋白含量測(cè)定
            2.2 T1C-19水稻莖稈浸提液中Cry1Ca蛋白在水中降解動(dòng)態(tài)
            2.3 水稻莖稈浸提液的水質(zhì)
            2.4 Cry1Ca純蛋白及阿特拉津組的蛋白核小球藻的生長(zhǎng)
            2.5 水稻莖稈浸提液處理對(duì)蛋白核小球藻生物量的影響
            2.6 藻體及其培養(yǎng)液上清中的Cry1C蛋白含量
            2.7 蛋白核小球藻的MDA和T-SOD的活性
        3 討論
    本章參考文獻(xiàn)
第三章 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)大型蚤生殖的影響
    1 材料與方法
        1.1 受試生物
        1.2 試驗(yàn)試劑
        1.3 試驗(yàn)材料
        1.4 主要儀器
        1.5 Cry1Ca純蛋白在試驗(yàn)培養(yǎng)基中的殺蟲活性測(cè)定
        1.6 Cry1C純蛋白對(duì)大型蚤影響的試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.7 轉(zhuǎn)cry1C基因水稻稻谷粉對(duì)大型蚤影響的試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    2 結(jié)果與分析
        2.1 M4培養(yǎng)液中各組Cry1C蛋白含量及其生物活性測(cè)定
        2.2 Cry1Ca純蛋白對(duì)大型蚤影響
        2.3 水稻稻谷常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及氨基酸含量測(cè)定
        2.4 飼喂T1C-19和MH63稻谷粉對(duì)F_0代大型蚤生長(zhǎng)繁殖影響
        2.5 飼喂T1C-19和MH63稻谷粉對(duì)F_1代大型蚤生長(zhǎng)繁殖影響
    3 討論
    4 本章參考文獻(xiàn)
第四章 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)蛙類生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    第一節(jié) 轉(zhuǎn)cry1Ca基因水稻對(duì)非洲爪蟾蝌蚪生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1 材料與方法
            1.1 供試試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)
            1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 不同處理對(duì)蝌蚪發(fā)育時(shí)間的影響
            2.2 不同處理對(duì)蝌蚪存活率、體重和體長(zhǎng)影響
            2.3 不同處理對(duì)蝌蚪幾種臟器重量和腸長(zhǎng)的影響
            2.4 不同處理對(duì)爪蟾肝臟酶活性影響
        3 討論
    第二節(jié) 轉(zhuǎn)cry1Ca基因水稻對(duì)幼蟾生長(zhǎng)發(fā)育的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)動(dòng)物選擇
            1.2 試驗(yàn)飼料
            1.3 飼養(yǎng)管理
            1.4 樣本的采集和處理
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 飼喂含轉(zhuǎn)Cry1Ca基因稻谷飼料對(duì)爪蟾體重變化的影響
            2.2 飼喂含轉(zhuǎn)Cry1Ca基因稻谷飼料90天對(duì)爪蟾存活和體重的影響
            2.3 飼喂含轉(zhuǎn)Cry1Ca基因稻谷飼料90天對(duì)爪蟾肝重、脂肪體重量的影響
            2.4 各器官的組織學(xué)觀察
        3 討論
    第三節(jié) 轉(zhuǎn)cry1Ab/1Ac基因水稻種植對(duì)稻田蛙類的影響
        1 材料與方法
            1.1 供試試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 試驗(yàn)稻田分組及水稻種植
            1.4 試驗(yàn)田水稻離體莖、葉Bt蛋白及其殺蟲活性測(cè)定
            1.5 蝌蚪數(shù)量調(diào)查
            1.6 不同處理對(duì)黑斑蛙存活、體重及食性的影響
            1.7 幼蛙組織切片觀察
            1.8 Cry1Ab/Ac蛋白含量檢測(cè)
            1.9 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 水稻組織Bt蛋白含量及其殺蟲活性測(cè)定
            2.2 稻田蛙類蝌蚪數(shù)量調(diào)查
            2.3 食性及體重觀察
            2.4 稻田蛙的腸道內(nèi)容物的Cry1Ab/Ac蛋白的檢測(cè)
            2.5 組織切片觀察
        3 討論
    本章參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]2011年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢(shì)[J]. Clive James.  中國(guó)生物工程雜志. 2012(01)
[3]轉(zhuǎn)基因作物對(duì)生態(tài)環(huán)境的利弊分析[J]. 朱禎.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2011(04)
[4]轉(zhuǎn)Cry1Ac/SCK基因糙米作鯉魚日糧原料營(yíng)養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)[J]. 徐志遠(yuǎn),劉陽(yáng),邢福國(guó),楊曉光.  糧食與飼料工業(yè). 2011(07)
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博士論文
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碩士論文
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[2]江漢平原（鐘祥、天門）主要蛙類兩性異形和食性的初步分析[D]. 陳英苗.華中師范大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3381314