發(fā)布時(shí)間：2021-06-28 12:30

　　睪丸酮叢毛單胞菌（Comamonas testosteroni）具有降解許多難降解化合物的能力,在污染物的生物修復(fù)上具有很高的應(yīng)用價(jià)值。但是,該菌對(duì)甾類物質(zhì)的代謝酶并不是組成型表達(dá)的,其表達(dá)受到環(huán)境中甾類化合物的誘導(dǎo)。因此,該菌對(duì)污染物的消化降解速度很慢,限制了該菌在生物修復(fù)中的大規(guī)模應(yīng)用。睪丸酮叢毛單胞菌中受睪丸酮誘導(dǎo)表達(dá)的調(diào)節(jié)因子稱為teiR基因（testosterone-inducible regulator, teiR）,teiR基因在類固醇代謝過(guò)程中具有十分重要的意義,可以激活或抑制相關(guān)代謝酶基因的表達(dá)。因此,本研究通過(guò)對(duì)teiR基因的克隆及功能分析,從基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的角度入手,對(duì)睪丸酮叢毛單胞菌進(jìn)行定向調(diào)控,提高其降解能力,揭示睪丸酮叢毛單胞菌包括關(guān)鍵酶3a-HSD/CR在內(nèi)的一系列基因的表達(dá)調(diào)控機(jī)制。該研究對(duì)于改造睪丸酮叢毛單胞菌,開發(fā)利用睪丸酮叢毛單胞菌進(jìn)行污染物的環(huán)境生物修復(fù)等都具有十分重要的意義。研究結(jié)果如下:1.根據(jù)已報(bào)道的睪丸酮叢毛單胞菌調(diào)節(jié)因子序列設(shè)計(jì)引物,從睪丸酮叢毛單胞菌ATCC11996菌株中克隆了teiR基因（GenBank登錄號(hào):FJ890932）。序... 

【文章來(lái)源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：144 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

甾體母核Fig.1-1Thenucleusofsteroid

15圖1-2 睪丸酮叢毛單胞菌類固醇化合物代謝途徑Fig.1-2 Putative pathways of steroids degradation in C. testosteroni TA441(Coulterand Talalay, 1968; Dodson and Muir, 1958a, b, 1961; Gibson et al., 1966; Sih et al.,1963, 1965a, b, 1966; Horinouchi et al., 2001a, b, 2003a, b, 2004a, b, 2005, 2006,2008; Fahrbach, 2006; Kieslich, 1985)4.2 睪丸酮叢毛單胞菌類固醇代謝基因簇在睪丸酮叢毛單胞菌（C. testosteroni）TA441基因組DNA上存在至少兩個(gè)類固醇代謝酶編碼基因的基因簇，其中一個(gè)包含ORF10、steA、steB、ORF7、ORF6、tesB、ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF21、ORF22、ORF23、ORF25、ORF26、ORF27、ORF28、ORF30、ORF31、ORF32、ORF33和tesR基因，另外一個(gè)包含ORF18、ORF17、tesI、tesH、tesA2、tesA1、tesD、tesE、tesF和tesG基因，目前已對(duì)基因簇部分基因的功能進(jìn)行了分析（Horinouchi et al. 2001a, b, 2003a,b, 2004a

圖 1-3 3α-HSDH 單體的三維結(jié)構(gòu) Three-dimensional structure of the 3α-HSDH monomer（Grimm et a-HSD/CR 基因位于睪丸酮叢毛單胞菌（C. testosteroni） ATCC 119A 的 5.257-kb EcoRI 的酶切片斷上（M bus and Maser, 1998, 199個(gè) 5.257-kb EcoRI 酶切片斷的結(jié)構(gòu)示意圖。3a-HSD/CR 基因上游bp 回文操縱基因序列，研究發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)操縱基因能夠形成莖-structure）（Xiong et al., 2003c）。同時(shí)在 3a-HSD/CR 基因附近還含repA、repB、activator、ksi）和 2 個(gè)閱讀框（ORF1 和 ORF3）。5–3-酮類固醇異構(gòu)酶（Δ5–3-ketosteroid isomerase）（Cho et al., 1992; Zhao et al., 1996）。ORF1 與 ORF3 的方向相反，activator 基因碼基因，能夠誘導(dǎo)睪丸酮叢毛單胞菌相關(guān)代謝酶基因的表達(dá)（戴2006；陳建秋等，2008a）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]睪丸酮叢毛單胞菌teiR基因載體構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 陳建秋,潘大仁,周以飛,盧文標(biāo),程曉春,王占成,陳雅艷,林鈿.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2008(04)
[2]土壤中陰離子表面活性劑對(duì)17β-雌二醇吸附脫附的影響[J]. 王聯(lián)芝,章飛芳,薛興亞,徐青,梁鑫淼.  精細(xì)化工. 2008(07)
[3]天然及人工合成雌激素在環(huán)境中遷移轉(zhuǎn)化的研究[J]. 楊詩(shī)家.  有色冶金設(shè)計(jì)與研究. 2008(03)
[4]tac啟動(dòng)子堿基突變對(duì)睪丸酮叢毛單胞菌（Comamonas testosteroni）降解能力的影響[J]. 陳建秋,潘大仁,周以飛,程曉春,張劍亮,盧文標(biāo),陳雅艷,林鈿.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2008(02)
[5]天藍(lán)淡紅鏈霉菌SIPI-1482中dnrV基因的克隆及應(yīng)用[J]. 宮倩,謝麗萍,胡又佳,朱春寶,朱寶泉.  中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志. 2007(02)
[6]睪丸酮叢毛單胞菌活化因子基因的質(zhì)粒載體構(gòu)建及表達(dá)[J]. 戴藝民,潘大仁,吳明霞,周以飛.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2006(03)
[7]不同-10區(qū)保守序列的tac啟動(dòng)子表達(dá)睪丸酮叢毛單胞菌中的活化因子[J]. 戴藝民,周以飛,吳明霞,潘大仁.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2005(06)
[8]代謝工程酵母菌合成紫杉烯的研究[J]. 王偉,孟超,朱平,程克棣.  中國(guó)生物工程雜志. 2005(08)
[9]睪丸酮叢毛單胞菌的分離和鑒定及3α-羥類固醇脫氫酶在大腸桿菌中的克隆表達(dá)[J]. 張國(guó)華,叢愛(ài)日,徐國(guó)賓,孫立穎,嚴(yán)巖,夏鐵安.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2005(02)
[10]阿維菌素B產(chǎn)生菌寡霉素合成阻斷株的構(gòu)建[J]. 張曉琳,陳芝,趙金雷,宋淵,文瑩,李季倫.  科學(xué)通報(bào). 2004(01)

博士論文
[1]睪丸酮叢毛單胞菌3α-HSD/CR等基因的表達(dá)調(diào)控研究[D]. 戴藝民.福建農(nóng)林大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3254322