青錢柳懸浮培養(yǎng)細(xì)胞三萜酸積累、分離鑒定及其降糖機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-22 13:49
青錢柳(Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinsk)為我國(guó)特有的胡桃科青錢柳屬珍稀瀕危植物,零星分布于我國(guó)南方各省,可用于保健食品、醫(yī)藥、園林綠化、工業(yè)用材等多個(gè)領(lǐng)域。研究表明,青錢柳葉含三萜、黃酮、多糖、皂苷及各種微量元素等多種功能活性成分,是具有很高利用價(jià)值的天然保健食品資源,但其繁育十分困難,資源稀缺嚴(yán)重制約了其開發(fā)利用。本文研究了青錢柳細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及其三萜酸積累規(guī)律,從懸浮培養(yǎng)細(xì)胞中提取分離出了主要的三萜酸并進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定,同時(shí)對(duì)其降糖作用效果及機(jī)制進(jìn)行了研究,旨在探索以青錢柳細(xì)胞懸浮培養(yǎng)方式生產(chǎn)三萜酸類降糖功能因子的可行性,為深度開發(fā)和利用青錢柳資源、生產(chǎn)三萜酸類降糖功能食品提供理論依據(jù)。以青錢柳無菌幼葉誘導(dǎo)愈傷組織,通過長(zhǎng)期的篩選和繼代培養(yǎng),獲得了疏松易碎、生長(zhǎng)旺盛、適合于懸浮培養(yǎng)的優(yōu)良愈傷組織,轉(zhuǎn)入懸浮培養(yǎng)后,再經(jīng)反復(fù)的篩選、繼代和優(yōu)化培養(yǎng)條件,建立了良好的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系。該培養(yǎng)體系最佳繼代時(shí)間為接種后第8天,最大細(xì)胞干重產(chǎn)量出現(xiàn)在第10天,最高總?cè)扑岙a(chǎn)量出現(xiàn)在第14天。在保持MS培養(yǎng)基中總氮源濃度及銨態(tài)氮和硝態(tài)氮比例的同時(shí),將磷酸鹽、鈣...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:147 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
不同培養(yǎng)代數(shù)的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞(da第十代Fig.2.8SuspendedcellsofditPetentsubculturetime
第2章青錢柳細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及三菇酸積累圖2.6中的試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量都有較大影響。從0.3125~ol.L一‘到2.5~ol.L一‘范圍內(nèi),總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì),都在 1.875mmol.L一’時(shí)達(dá)到最大值。︵-J︸口E蘿︺氣爸馨潤(rùn)川00門︸n甘六nU︸匕一n︸ 752JJ.58蘿6子乍窿勸爸門O一-—-——一一-—一——一O 0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸鹽濃度mM)~幾卜總?cè)剿岷恳凰囀?總?cè)剿岙a(chǎn)量圖2.6磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岷考爱a(chǎn)量的影響 F19.2.6EffeetsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsusPendedeells 2.5.4.3ca2+濃度對(duì)總?cè)剿岙a(chǎn)量的影響ca2+濃度對(duì)總?cè)剿岱e累影響試驗(yàn)結(jié)果如圖2.7。當(dāng)ca2+濃度低于2~ol.L一’時(shí),細(xì)胞總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量均較低,在2至6~ol.L一’濃度范圍內(nèi),總?cè)剿岬漠a(chǎn)量變化不大。因此,Zmmol.L一’的C擴(kuò)+濃度較為合適。習(xí)6E︶好氣窿爸泊門、︵歲︶咚窿醬七川es鈞 0123456鈣離子濃度mM)~一總?cè)剿岷?憶卜-總?cè)剿岙a(chǎn)員圖2
︵-J︸口E蘿︺氣爸馨潤(rùn)川蘿6子乍窿勸爸門O一-—-——一一-—一——一O0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸鹽濃度mM)~幾卜總?cè)剿岷恳凰囀?總?cè)剿岙a(chǎn)量2.6磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岷考爱a(chǎn)量的影響etsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsu度對(duì)總?cè)剿岙a(chǎn)量的影響對(duì)總?cè)剿岱e累影響試驗(yàn)結(jié)果如圖2.7。當(dāng)ca2+濃度低菇酸的含量和產(chǎn)量均較低,在2至6~ol.L一’濃度范不大。因此,Zmmol.L一’的C擴(kuò)+濃度較為合適。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金鈕扣中三萜類化學(xué)成分研究[J]. 周洪波,王峰,房志堅(jiān). 中國(guó)中藥雜志. 2011(15)
[2]齊墩果酸藥理作用研究進(jìn)展[J]. 昌盛,李龍. 廣州化工. 2011(14)
[3]5種大量元素對(duì)青錢柳愈傷組織生長(zhǎng)及黃酮類化合物積累的影響[J]. 上官新晨,蔣艷,米麗雪,陳繼光,張清峰,鄒利. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(03)
[4]大孔樹脂吸附純化青錢柳葉三萜化合物[J]. 尹忠平,上官新晨,張?jiān)录t,黎冬明,吳少福,陳繼光. 食品科學(xué). 2011(06)
[5]細(xì)胞懸浮培養(yǎng)制備紫杉醇的研究進(jìn)展[J]. 王巍杰,楊永強(qiáng),吳尚卓. 河北理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(01)
[6]青錢柳多糖降血脂作用的研究[J]. 黃明圈,上官新晨,徐明生,王文君,沈勇根,蔣艷,陳琴,陳婷婷. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[7]高純度青錢柳葉總?cè)苹衔锞蒲芯縖J]. 尹忠平,上官新晨,張?jiān)录t,黎冬明,吳少福. 食品科技. 2011(02)
[8]白樺細(xì)胞懸浮培養(yǎng)產(chǎn)三萜及其營(yíng)養(yǎng)成分消耗的動(dòng)態(tài)[J]. 范桂枝,翟俏麗,于海娣,王曉東,王博,詹亞光. 林業(yè)科學(xué). 2011(01)
[9]積雪草酸及其衍生物的研究進(jìn)展[J]. 孟艷秋,李鳳清,王向磊,李云云. 化學(xué)試劑. 2010(12)
[10]山茱萸藥材中三萜類成分的研究[J]. 劉博,吳和珍. 湖北中醫(yī)雜志. 2010(12)
博士論文
[1]樟芝深層液態(tài)發(fā)酵及其三萜類化合物的研究[D]. 陸震鳴.江南大學(xué) 2009
[2]過氧亞硝酸根對(duì)胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控作用及其機(jī)理[D]. 周軍.華中科技大學(xué) 2009
[3]羥基紅花黃色素A對(duì)小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化及細(xì)胞內(nèi)脂代謝調(diào)節(jié)酶作用的研究[D]. 王林杰.中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2008
[4]日本結(jié)縷草(Zoysia japonica Steud.)懸浮再生體系的建立與超低溫保存研究[D]. 方文娟.北京林業(yè)大學(xué) 2008
[5]雷公藤組織培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物及其代謝調(diào)控研究[D]. 李琰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
[6]中藥糖耐康干預(yù)KKAy小鼠胰島素抵抗信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用機(jī)制研究[D]. 王芬.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2008
[7]長(zhǎng)鞭紅景天細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及其次生代謝調(diào)控研究[D]. 王莉.北京林業(yè)大學(xué) 2007
[8]鳳眼草和蓬子菜化學(xué)成分及生物活性研究[D]. 趙春超.沈陽藥科大學(xué) 2007
[9]苦瓜中降血糖活性成分的高通量篩選研究[D]. 何新益.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[10]虎杖顆粒愈傷組織懸浮培養(yǎng)體系建立與白藜蘆醇的生物合成、調(diào)控及生物轉(zhuǎn)化研究[D]. 曹庸.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]番石榴葉三萜化合物(PGL-15)對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞分化及糖脂代謝的影響及其作用機(jī)制[D]. 魏明.暨南大學(xué) 2010
[2]喜樹懸浮培養(yǎng)體系的建立及喜樹堿含量的調(diào)控研究[D]. 劉菲.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]廣西青錢柳降血糖有效成分及作用機(jī)制的研究[D]. 張小芳.桂林醫(yī)學(xué)院 2010
[4]石榴愈傷組織的誘導(dǎo)和細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立[D]. 程江華.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]青錢柳黃酮和皂甙化合物同步提取及純化技術(shù)研究[D]. 郝翻.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]青錢柳離體快繁及生根機(jī)理的初步研究[D]. 王瑩.南京林業(yè)大學(xué) 2008
[7]青錢柳多糖的分離純化與結(jié)構(gòu)解析及其生物活性研究[D]. 謝建華.南昌大學(xué) 2007
[8]高糖細(xì)胞模型的建立與中藥降糖作用及其機(jī)理初步研究[D]. 陳國(guó)光.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2007
[9]中藥復(fù)方“益糖康”對(duì)2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表達(dá)的影響[D]. 郭儀.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2007
[10]胰島素信號(hào)通路中GLUT4的作用機(jī)制研究[D]. 高勇.浙江大學(xué) 2006
本文編號(hào):3242951
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:147 頁(yè)
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【部分圖文】:
不同培養(yǎng)代數(shù)的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞(da第十代Fig.2.8SuspendedcellsofditPetentsubculturetime
第2章青錢柳細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及三菇酸積累圖2.6中的試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量都有較大影響。從0.3125~ol.L一‘到2.5~ol.L一‘范圍內(nèi),總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì),都在 1.875mmol.L一’時(shí)達(dá)到最大值。︵-J︸口E蘿︺氣爸馨潤(rùn)川00門︸n甘六nU︸匕一n︸ 752JJ.58蘿6子乍窿勸爸門O一-—-——一一-—一——一O 0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸鹽濃度mM)~幾卜總?cè)剿岷恳凰囀?總?cè)剿岙a(chǎn)量圖2.6磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岷考爱a(chǎn)量的影響 F19.2.6EffeetsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsusPendedeells 2.5.4.3ca2+濃度對(duì)總?cè)剿岙a(chǎn)量的影響ca2+濃度對(duì)總?cè)剿岱e累影響試驗(yàn)結(jié)果如圖2.7。當(dāng)ca2+濃度低于2~ol.L一’時(shí),細(xì)胞總?cè)剿岬暮亢彤a(chǎn)量均較低,在2至6~ol.L一’濃度范圍內(nèi),總?cè)剿岬漠a(chǎn)量變化不大。因此,Zmmol.L一’的C擴(kuò)+濃度較為合適。習(xí)6E︶好氣窿爸泊門、︵歲︶咚窿醬七川es鈞 0123456鈣離子濃度mM)~一總?cè)剿岷?憶卜-總?cè)剿岙a(chǎn)員圖2
︵-J︸口E蘿︺氣爸馨潤(rùn)川蘿6子乍窿勸爸門O一-—-——一一-—一——一O0.31250.62501.25001.87502.5000磷酸鹽濃度mM)~幾卜總?cè)剿岷恳凰囀?總?cè)剿岙a(chǎn)量2.6磷酸鹽濃度對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞總?cè)剿岷考爱a(chǎn)量的影響etsofPhosPhateeoneentrationontheTTAeontentandyieldofsu度對(duì)總?cè)剿岙a(chǎn)量的影響對(duì)總?cè)剿岱e累影響試驗(yàn)結(jié)果如圖2.7。當(dāng)ca2+濃度低菇酸的含量和產(chǎn)量均較低,在2至6~ol.L一’濃度范不大。因此,Zmmol.L一’的C擴(kuò)+濃度較為合適。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金鈕扣中三萜類化學(xué)成分研究[J]. 周洪波,王峰,房志堅(jiān). 中國(guó)中藥雜志. 2011(15)
[2]齊墩果酸藥理作用研究進(jìn)展[J]. 昌盛,李龍. 廣州化工. 2011(14)
[3]5種大量元素對(duì)青錢柳愈傷組織生長(zhǎng)及黃酮類化合物積累的影響[J]. 上官新晨,蔣艷,米麗雪,陳繼光,張清峰,鄒利. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(03)
[4]大孔樹脂吸附純化青錢柳葉三萜化合物[J]. 尹忠平,上官新晨,張?jiān)录t,黎冬明,吳少福,陳繼光. 食品科學(xué). 2011(06)
[5]細(xì)胞懸浮培養(yǎng)制備紫杉醇的研究進(jìn)展[J]. 王巍杰,楊永強(qiáng),吳尚卓. 河北理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(01)
[6]青錢柳多糖降血脂作用的研究[J]. 黃明圈,上官新晨,徐明生,王文君,沈勇根,蔣艷,陳琴,陳婷婷. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[7]高純度青錢柳葉總?cè)苹衔锞蒲芯縖J]. 尹忠平,上官新晨,張?jiān)录t,黎冬明,吳少福. 食品科技. 2011(02)
[8]白樺細(xì)胞懸浮培養(yǎng)產(chǎn)三萜及其營(yíng)養(yǎng)成分消耗的動(dòng)態(tài)[J]. 范桂枝,翟俏麗,于海娣,王曉東,王博,詹亞光. 林業(yè)科學(xué). 2011(01)
[9]積雪草酸及其衍生物的研究進(jìn)展[J]. 孟艷秋,李鳳清,王向磊,李云云. 化學(xué)試劑. 2010(12)
[10]山茱萸藥材中三萜類成分的研究[J]. 劉博,吳和珍. 湖北中醫(yī)雜志. 2010(12)
博士論文
[1]樟芝深層液態(tài)發(fā)酵及其三萜類化合物的研究[D]. 陸震鳴.江南大學(xué) 2009
[2]過氧亞硝酸根對(duì)胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控作用及其機(jī)理[D]. 周軍.華中科技大學(xué) 2009
[3]羥基紅花黃色素A對(duì)小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化及細(xì)胞內(nèi)脂代謝調(diào)節(jié)酶作用的研究[D]. 王林杰.中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2008
[4]日本結(jié)縷草(Zoysia japonica Steud.)懸浮再生體系的建立與超低溫保存研究[D]. 方文娟.北京林業(yè)大學(xué) 2008
[5]雷公藤組織培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物及其代謝調(diào)控研究[D]. 李琰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008
[6]中藥糖耐康干預(yù)KKAy小鼠胰島素抵抗信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用機(jī)制研究[D]. 王芬.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2008
[7]長(zhǎng)鞭紅景天細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及其次生代謝調(diào)控研究[D]. 王莉.北京林業(yè)大學(xué) 2007
[8]鳳眼草和蓬子菜化學(xué)成分及生物活性研究[D]. 趙春超.沈陽藥科大學(xué) 2007
[9]苦瓜中降血糖活性成分的高通量篩選研究[D]. 何新益.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[10]虎杖顆粒愈傷組織懸浮培養(yǎng)體系建立與白藜蘆醇的生物合成、調(diào)控及生物轉(zhuǎn)化研究[D]. 曹庸.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]番石榴葉三萜化合物(PGL-15)對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞分化及糖脂代謝的影響及其作用機(jī)制[D]. 魏明.暨南大學(xué) 2010
[2]喜樹懸浮培養(yǎng)體系的建立及喜樹堿含量的調(diào)控研究[D]. 劉菲.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]廣西青錢柳降血糖有效成分及作用機(jī)制的研究[D]. 張小芳.桂林醫(yī)學(xué)院 2010
[4]石榴愈傷組織的誘導(dǎo)和細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立[D]. 程江華.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[5]青錢柳黃酮和皂甙化合物同步提取及純化技術(shù)研究[D]. 郝翻.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]青錢柳離體快繁及生根機(jī)理的初步研究[D]. 王瑩.南京林業(yè)大學(xué) 2008
[7]青錢柳多糖的分離純化與結(jié)構(gòu)解析及其生物活性研究[D]. 謝建華.南昌大學(xué) 2007
[8]高糖細(xì)胞模型的建立與中藥降糖作用及其機(jī)理初步研究[D]. 陳國(guó)光.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2007
[9]中藥復(fù)方“益糖康”對(duì)2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表達(dá)的影響[D]. 郭儀.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2007
[10]胰島素信號(hào)通路中GLUT4的作用機(jī)制研究[D]. 高勇.浙江大學(xué) 2006
本文編號(hào):3242951
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