水環(huán)境中重金屬污染導(dǎo)致水產(chǎn)品中重金屬超標(biāo)問題時(shí)有發(fā)生,嚴(yán)重影響人體健康。微生物對重金屬的生物積累作用是目前重金屬脫除研究的熱點(diǎn)之一,活性微生物具有在復(fù)雜食品物料體系如液態(tài)水產(chǎn)制品中脫除重金屬的能力。良好的重金屬抗性和積累特性是應(yīng)用該方法的必要前提,是活性微生物脫除重金屬的重要保障。本文系統(tǒng)研究了多抗性庫德畢赤酵母（Pichia kudriavzevii A16）的重金屬（鎘、銅和鋅）抗性、積累特性和脫除能力,研究了高鹽或低pH對P. kudriavzevii A16重金屬抗性、積累特性和脫除能力的影響,并對高鹽或低pH條件下P.kudriavzevii A16鎘抗性提高機(jī)理進(jìn)行了深入的探討。1.以釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae CICC1211）為對照菌株,系統(tǒng)研究了P. kudriavzevii A16的重金屬（鎘、銅和鋅）抗性、積累特性和脫除能力。結(jié)果表明,P. kudriavzevii Al6具有很高的鎘、銅和鋅抗性與積累特性,并且對鎘和鋅具有很強(qiáng)的脫除能力,對于低于0.04 mmol/L的鎘和0.1 mmol/L鋅的脫除率均超過95%。這兩株酵母對某... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：200 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
0 前言
    0.1 重金屬污染現(xiàn)狀簡介
        0.1.1 水環(huán)境中重金屬污染現(xiàn)狀
        0.1.2 水產(chǎn)品中重金屬污染現(xiàn)狀
    0.2 微生物重金屬脫除技術(shù)
        0.2.1 生物吸附法
        0.2.2 生物積累法
    0.3 酵母菌重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)與抗性
        0.3.1 酵母菌的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)
        0.3.2 重金屬的毒性機(jī)理
        0.3.3 酵母菌的重金屬抗性機(jī)制
    0.4 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
        0.4.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究意義與方法
        0.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序的基本流程
        0.4.3 轉(zhuǎn)錄組測序的應(yīng)用
        0.4.4 轉(zhuǎn)錄組測序在酵母菌中的研究進(jìn)展
    0.5 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)
        0.5.1 基于2-DE的蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法
        0.5.2 蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展趨勢
        0.5.3 蛋白質(zhì)組學(xué)在酵母菌中的研究進(jìn)展
    0.6 庫德畢赤酵母研究進(jìn)展
    0.7 立題依據(jù)與研究意義
    0.8 主要研究內(nèi)容和技術(shù)路線
        0.8.1 研究內(nèi)容
        0.8.2 技術(shù)路線
1 Pichia kudriavzevii A16的重金屬抗性和生物積累特性研究
    1.1 材料、試劑與儀器
        1.1.1 試驗(yàn)菌株
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要培養(yǎng)基
        1.1.4 主要儀器
    1.2 方法與步驟
        1.2.1 酵母菌活化
        1.2.2 生物積累時(shí)間對重金屬抗性和積累的影響
        1.2.3 初始重金屬濃度對重金屬抗性和積累的影響
        1.2.4 初始菌體濃度對重金屬抗性和積累的影響
        1.2.5 其它重金屬離子對重金屬抗性和積累的影響
        1.2.6 生物量的測定
        1.2.7 重金屬脫除率和單位菌體重金屬積累量的測定
        1.2.8 細(xì)胞內(nèi)重金屬積累量和細(xì)胞表面重金屬積累量的測定
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)分析
    1.3 結(jié)果與討論
        1.3.1 生物積累時(shí)間對重金屬抗性和積累的影響
        1.3.2 初始重金屬濃度對重金屬抗性和積累的影響
        1.3.3 初始菌體濃度對重金屬抗性和積累的影響
        1.3.4 其它重金屬離子對重金屬抗性和積累的影響
    1.4 本章小結(jié)
2 高鹽/低pH對Pichia kudriavzevii A16重金屬抗性和生物積累的影響
    2.1 材料、試劑與儀器
        2.1.1 試驗(yàn)菌株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要培養(yǎng)基
        2.1.4 主要儀器
    2.2 方法與步驟
        2.2.1 酵母菌活化
        2.2.2 高鹽對鎘、銅、鋅抗性和積累的影響
        2.2.3 低pH對鎘、銅、鋅抗性和積累的影響
        2.2.4 高鹽或低pH對鎘脅迫下P.kudriavzevii A16細(xì)胞內(nèi)Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)含量的影響
        2.2.5 生物量的測定
        2.2.6 重金屬脫除率和單位菌體重金屬積累量的測定
        2.2.7 細(xì)胞內(nèi)重金屬積累量和細(xì)胞表面重金屬積累量的測定
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 高鹽對鎘抗性和積累的影響
        2.3.2 高鹽對銅抗性和積累的影響
        2.3.3 高鹽對鋅抗性和積累的影響
        2.3.4 低pH對鎘抗性和積累的影響
        2.3.5 低pH對銅抗性和積累的影響
        2.3.6 低pH對鋅抗性和積累的影響
        2.3.7 高鹽對鎘脅迫下P.kudriavzevii A16細(xì)胞內(nèi)Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)含量的影響
        2.3.8 低pH對鎘脅迫下P kudriavzevii A16細(xì)胞內(nèi)Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量的影響
    2.4 本章小結(jié)
3 高鹽/低pH對鎘脅迫下Pichia kudriavzevii A16轉(zhuǎn)錄組的影響
    3.1 材料、試劑與儀器
        3.1.1 試驗(yàn)菌株
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要培養(yǎng)基
        3.1.4 主要儀器
    3.2 方法與步驟
        3.2.1 酵母菌活化及處理
        3.2.2 總RNA提取
        3.2.3 總RNA質(zhì)量檢測
        3.2.4 cDNA文庫構(gòu)建
        3.2.5 cDNA文庫測序
        3.2.6 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估
        3.2.7 轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)拼接組裝
        3.2.8 轉(zhuǎn)錄本注釋分析
        3.2.9 差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄本分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 總RNA質(zhì)量分析
        3.3.2 文庫質(zhì)量分析
        3.3.3 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量
        3.3.4 拼接轉(zhuǎn)錄本長度分布
        3.3.5 轉(zhuǎn)錄本注釋分析
        3.3.6 高鹽對鎘脅迫下P kudriavzevii A16轉(zhuǎn)錄組的影響
        3.3.7 低pH對鎘脅迫下P.kudriavzevii A16轉(zhuǎn)錄組的影響
    3.4 本章小結(jié)
4 高鹽/低pH對鎘脅迫下Pichia kudriavzevii A16蛋白質(zhì)組的影響
    4.1 材料、試劑與儀器
        4.1.1 試驗(yàn)菌株
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要培養(yǎng)基
        4.1.4 主要儀器
    4.2 方法與步驟
        4.2.1 酵母菌活化及處理
        4.2.2 總蛋白提取
        4.2.3 雙向電泳
        4.2.4 差異蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 各組總蛋白的提取和雙向電泳
        4.3.2 高鹽對鎘脅迫下P.kudriavzevii A16蛋白質(zhì)組的影響
        4.3.3 低pH對鎘脅迫下P.kudriavzevii A16蛋白質(zhì)組的影響
    4.4 本章小結(jié)
5 基于抗氧化物酶基因表達(dá)的Pichia kudriavzevii A16鎘抗性提高機(jī)制
    5.1 材料、試劑與儀器
        5.1.1 試驗(yàn)菌株
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 主要培養(yǎng)基
        5.1.4 主要儀器
    5.2 方法與步驟
        5.2.1 酵母菌活化
        5.2.2 高鹽或低pH對鎘誘導(dǎo)的氧化脅迫的影響
        5.2.3 高鹽或低pH對鎘脅迫下抗氧化物酶基因表達(dá)的影響
        5.2.4 高鹽或低pH對鎘脅迫下抗氧化物酶活力的影響
        5.2.5 高鹽或低pH對鎘脅迫下其它關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
        5.2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 高鹽或低pH對鎘誘導(dǎo)的氧化脅迫的影響
        5.3.2 高鹽或低pH對鎘脅迫下抗氧化物酶基因表達(dá)的影響
        5.3.3 高鹽或低pH對鎘脅迫下抗氧化物酶活力的影響
        5.3.4 高鹽或低pH對鎘脅迫下其它關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
    5.4 本章小結(jié)
全文結(jié)論
研究展望
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞表
個(gè)人簡介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
參與的科研項(xiàng)目
獲獎(jiǎng)情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3226427