基因治療是癌癥等疾病的有效治療手段,高效、安全的基因載體是基因治療成功的關(guān)鍵技術(shù)之一。陽離子脂質(zhì)體因其安全性高、易生產(chǎn)、低免疫原性以及基因遞送的有效性日益受到廣泛關(guān)注,基于陽離子脂質(zhì)體的復合載體也顯示出良好的發(fā)展前景。新的類脂分子不斷涌現(xiàn),研究結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)染效率的構(gòu)效關(guān)系,細胞遞送機制對于提高轉(zhuǎn)染效率和指導類脂分子的合成以及化學修飾具有重要意義。論文以4類新型季銨鹽表面活性劑為陽離子類脂制備脂質(zhì)體,采用TEM, DLS,凝膠電泳對脂質(zhì)體進行物化性質(zhì)表征。結(jié)果表明,脂質(zhì)體平均粒徑為100-300nm,脂質(zhì)體與DNA結(jié)合能力強。以GFP和熒光素酶為報告基因,進行了轉(zhuǎn)染能力評價。結(jié)果顯示,部分陽離子脂質(zhì)體對Hela和Hep-2細胞可實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染。構(gòu)效關(guān)系研究表明,C3系列雙子型雙電荷頭部的基因載體相對于單子型單電荷C1系列以及增加延伸區(qū)的單電荷C2系列和雙電荷C4系列具有較高的細胞轉(zhuǎn)染能力,其中,化合物C3-12的基因轉(zhuǎn)染能力較高。構(gòu)建了低分子量殼聚糖/脂質(zhì)體/pDNA三元非共價鍵新型復合載體,顯著提高了脂質(zhì)體的基因遞送核酸能力。凝膠延滯和AFM實驗表明,復合載體與pDNA結(jié)合能力強,可完全延滯... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：147 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 陽離子脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染及其環(huán)境效應(yīng)文獻綜述
    1.1 基因治療
    1.2 基因載體
        1.2.1 病毒載體
        1.2.2 非病毒載體
    1.3 陽離子脂質(zhì)體基因載體
        1.3.1 類脂結(jié)構(gòu)
        1.3.2 陽離子脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)
        1.3.3 復合物形態(tài)
        1.3.4 基于陽離子脂質(zhì)體的復合型載體
        1.3.5 血清
        1.3.6 毒性
    1.4 陽離子脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)運過程
        1.4.1 載體細胞吸附和攝入
        1.4.2 內(nèi)涵體釋放和復合物解離
        1.4.3 核攝入
    1.5 陽離子類脂（季銨鹽類表面活性劑）的環(huán)境效應(yīng)
        1.5.1 表面活性劑的環(huán)境行為
        1.5.2 環(huán)境中表面活性劑生物降解
        1.5.3 表面活性劑及其降解產(chǎn)物的生物效應(yīng)
    1.6 季銨鹽類化合物的污染控制技術(shù)
        1.6.1 吸附分離法
        1.6.2 催化氧化法
        1.6.3 泡沫分離法
        1.6.4 混凝法
        1.6.5 生物處理法
        1.6.6 聯(lián)合處理法
    1.7 論文研究內(nèi)容及意義
第二章 脂質(zhì)體和復合基因載體物理化學性質(zhì)研究
    2.1 論文選用陽離子類脂的結(jié)構(gòu)
    2.2 脂質(zhì)體形態(tài)研究
        2.2.1 材料與方法
        2.2.2 結(jié)果與討論
    2.3 脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合作用
        2.3.1 材料與方法
        2.3.2 結(jié)果與討論
    2.4 脂質(zhì)體/殼聚糖/DNA三元復合基因載體物理化學性質(zhì)研究
        2.4.1 材料與方法
        2.4.2 結(jié)果與討論
    2.3 本章小結(jié)
第三章 脂質(zhì)體和復合基因載體細胞轉(zhuǎn)染研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染研究
        3.2.2 陽離子脂質(zhì)體/殼聚糖復合載體基因轉(zhuǎn)染研究
    3.3 本章小結(jié)
第四章 脂質(zhì)體和復合載體胞內(nèi)基因遞送過程研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 陽離子脂質(zhì)體胞內(nèi)過程研究
        4.2.2 陽離子脂質(zhì)體/殼聚糖復合載體胞內(nèi)過程研究
    4.3 本章小結(jié) #
第五章 脂質(zhì)體及復合基因載體毒性研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與討論
        5.2.1 動物細胞毒性
        5.2.2 柵藻毒性
        5.2.3 裙帶菜配子體毒性
        5.2.4 發(fā)光細菌毒性
    5.5 本章小結(jié)
第六章 脂質(zhì)體基因載體活性污泥降解性研究
    6.1 材料與方法
        6.1.1 材料
        6.1.2 方法
    6.2 結(jié)果與討論
        6.2.1 脂質(zhì)體基因載體生物降解研究
        6.2.2 生物降解性與表面活性劑結(jié)構(gòu)的關(guān)系
    6.3 本章小結(jié)
第七章 結(jié)論與展望
    7.1 主要結(jié)論
    7.2 建議
創(chuàng)新點摘要
參考文獻
攻讀博士學位期間發(fā)表學術(shù)論文情況
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3155904