本項(xiàng)目以華家池旱地黃松田土壤為研究材料,運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)手段,采用室內(nèi)培養(yǎng)及統(tǒng)計(jì)分析相結(jié)合的方法,全面探討了鎘脅迫對(duì)旱地土壤放線菌生態(tài)多樣性的影響,并以土傳致病菌-番茄潰瘍病菌（Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis,Cmm）為供試菌株,分析篩選到的1株對(duì)Cmm具有較強(qiáng)抑制作用的放線菌HL-12（Streptomyces vinaceus）受鎘脅迫在純培養(yǎng)條件下及在無(wú)菌土壤環(huán)境中對(duì)Cmm的抑制效果。此外還分離到1株對(duì)鎘具有較強(qiáng)抗性的放線茵K33（Streptomyces psammoticus）,對(duì)2株放線菌在鎘污染水環(huán)境中對(duì)鎘的生物吸附動(dòng)力學(xué)及其吸附機(jī)理作了初步研究和比較,為建立有效的重金屬污染預(yù)警指標(biāo)體系、環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià)及抗鎘微生物的有效利用提供有益的參考。本研究所獲主要結(jié)論如下:1采用現(xiàn)代分子生態(tài)學(xué)手段研究了鎘脅迫對(duì)旱地土壤中放線菌生態(tài)多樣性的影響。在培養(yǎng)初期鎘對(duì)放線菌種群毒害作用較為明顯,與對(duì)照相比,許多條帶消失,基因多樣性下降,到了培養(yǎng)后期,不同處理間的基因多樣性差異逐漸縮小,數(shù)量上仍存在一定差異。在含0.5～1.0 mg·... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 放線菌
        1.1.1 放線菌的概述
        1.1.2 放線菌的分類
        1.1.3 鏈霉菌屬
    1.2 土壤重金屬污染
        1.2.1 土壤重金屬鎘污染現(xiàn)狀
        1.2.2 重金屬污染的特點(diǎn)
        1.2.3 重金屬鎘污染來(lái)源
        1.2.4 重金屬鎘對(duì)人類和生態(tài)環(huán)境的危害
    1.3 重金屬污染對(duì)土壤微生物生態(tài)多樣性的影響
    1.4 微生物分子生態(tài)學(xué)的研究進(jìn)展及其在污染環(huán)境中的應(yīng)用
        1.4.1 環(huán)境樣品中總DNA的提取
        1.4.2 16S rRNA的PCR擴(kuò)增
        1.4.3 基于PCR技術(shù)的研究方法
        1.4.4 分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在環(huán)境微生物研究中的應(yīng)用
    1.5 重金屬對(duì)微生物的毒性作用及影響因素
    1.6 微生物技術(shù)在重金屬污染土壤生物修復(fù)中的應(yīng)用
        1.6.1 微生物對(duì)重金屬的生物吸收作用
        1.6.2 微生物對(duì)重金屬的沉淀作用
        1.6.3 微生物對(duì)重金屬的生物轉(zhuǎn)化作用
        1.6.4 影響微生物修復(fù)效應(yīng)的因素
        1.6.5 微生物修復(fù)面臨的問(wèn)題與展望
    1.7 基因工程技術(shù)及其展望
    1.8 本研究的目的與意義
第二章 生防和抗鎘放線菌株的分離鑒定
    2.1 引言
    2.2 試驗(yàn)材料與方法
        2.2.1 菌株分離源
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.4 培養(yǎng)基
        2.2.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 菌體的形態(tài)及培養(yǎng)特征
        2.3.2 菌株的生理生化特性
        2.3.3 菌株的細(xì)胞壁化學(xué)類型
        2.3.4 菌株的16S rRNA基因序列分析
        2.3.5 菌株HL-12的拮抗性試驗(yàn)
        2.3.6 菌株的抗生素敏感性試驗(yàn)
        2.3.7 菌株K33對(duì)重金屬的耐受性
        2.3.8 菌株K33在鎘離子脅迫下的生長(zhǎng)特性
    2.4 小結(jié)
第三章 重金屬鎘脅迫下放線菌生物學(xué)活性的變化研究
    3.1 引言
    3.2 試驗(yàn)材料與方法
2+脅迫對(duì)Cmm的抑制效果">        3.2.1 純培養(yǎng)條件下菌株HL-12受Cd²⁺脅迫對(duì)Cmm的抑制效果
        3.2.2 鎘脅迫下菌株HL-12在土壤中對(duì)Cmm的抑制效果
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 純培養(yǎng)條件下菌株HL-12在鎘脅迫下對(duì)Cmm的抑制作用
        3.3.2 鎘脅迫下菌株HL-12在土壤中對(duì)Cmm的抑制活性變化
    3.4 小結(jié)
第四章 鎘脅迫下土壤放線菌基因多樣性DGGE指紋圖譜分析
    4.1 引言
    4.2 試驗(yàn)材料與方法
        4.2.1 供試土壤
        4.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法
        4.2.3 土壤總DNA提取
        4.2.4 PCR擴(kuò)增
        4.2.5 變性梯度凝膠電泳（DGGE）及染色
        4.2.6 凝膠指紋圖譜的生物信息學(xué)分析
        4.2.7 特異性條帶的割膠回收
        4.2.8 克隆和序列分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 土壤微生物總DNA的提取和PCR擴(kuò)增結(jié)果
        4.3.2 鎘脅迫下土壤總DNA的DGGE指紋圖譜分析
        4.3.3 DGGE條帶的Shannon指數(shù)和主成分分析
        4.3.4 特異性條帶測(cè)序和比對(duì)結(jié)果分析
    4.4 小結(jié)
第五章 放線菌對(duì)鎘的生物吸附及其動(dòng)力學(xué)研究
    5.1 引言
    5.2 試驗(yàn)材料與方法
        5.2.1 試驗(yàn)菌株及培養(yǎng)條件
        5.2.2 吸附菌株的處理
        5.2.3 重金屬鎘的測(cè)定
        5.2.4 重金屬鎘吸附實(shí)驗(yàn)
        5.2.5 重金屬鎘的解吸實(shí)驗(yàn)
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 pH和溫度對(duì)鎘生物吸附的影響
        5.3.2 等溫吸附模型的模擬
        5.3.3 吸附動(dòng)力學(xué)研究
        5.3.4 pH對(duì)解吸效率的影響
    5.4 小結(jié)
第六章 放線菌對(duì)鎘生物吸附機(jī)理的初步研究
    6.1 引言
    6.2 試驗(yàn)材料與方法
        6.2.1 試驗(yàn)菌株
        6.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        6.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        6.2.4 培養(yǎng)基
        6.2.5 試驗(yàn)方法設(shè)計(jì)
    6.3 結(jié)果與討論
        6.3.1 菌株不同細(xì)胞組分對(duì)鎘吸附的差異
        6.3.2 菌株連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中溶液pH的變化
        6.3.3 加鎘前后試驗(yàn)菌株細(xì)胞形態(tài)的變化
        6.3.4 紅外光譜分析
    6.4 小結(jié)
論文的主要研究結(jié)論及展望
    1.全文主要研究結(jié)論
    2.創(chuàng)新點(diǎn)
    3.論文的不足與展望
參考文獻(xiàn)
博士研究生學(xué)習(xí)期間論文發(fā)表及獲獎(jiǎng)情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3137696