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基于產(chǎn)絮克隆菌的遺傳及產(chǎn)絮特性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-21 02:38
  生物絮凝劑作為一種高效、無(wú)毒、無(wú)二次污染、具有生物可降解性和安全性的綠色水處理劑,代表了絮凝劑的重要研發(fā)方向之一。本研究對(duì)所分離到的高效絮凝菌進(jìn)行了菌種鑒定,并對(duì)其絮凝特性及代謝成分進(jìn)行了分析。同時(shí)以基因定位為基礎(chǔ),進(jìn)行了絮凝菌的細(xì)胞融合,構(gòu)建了絮凝菌的基因組文庫(kù),得到了具有絮凝特性的克隆菌,并將克隆菌應(yīng)用到兩段式發(fā)酵工藝中,即以纖維素降解菌的產(chǎn)物為絮凝菌的發(fā)酵原料,進(jìn)行二段式發(fā)酵,獲得了新型生物絮凝劑。經(jīng)生理生化和16SrDNA分析鑒定,絮凝菌F2為芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)。通過(guò)絮凝活性分布測(cè)定,絮凝劑的有效成分存在于發(fā)酵液中,為絮凝菌的胞外產(chǎn)物。進(jìn)一步利用紅外光譜、紫外掃描、考馬斯亮藍(lán)等手段,確定了生物絮凝劑的有效成分為多糖類物質(zhì),具有良好的高效產(chǎn)絮遺傳穩(wěn)定性。為研究產(chǎn)絮菌的遺傳特性,采用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化技術(shù)進(jìn)行了絮凝基因的定位實(shí)驗(yàn):將絮凝菌的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入無(wú)絮凝特性的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中,得到大腸桿菌陽(yáng)性轉(zhuǎn)化菌株;經(jīng)檢測(cè),轉(zhuǎn)化菌株無(wú)絮凝特性,說(shuō)明絮凝基因存在于染色體DNA,初步確定絮凝菌質(zhì)粒無(wú)絮凝基因控制。從而確定了絮凝菌的代謝途徑,為合成新型、經(jīng)濟(jì)的代謝產(chǎn)物及分析代謝產(chǎn)物成分提... 

【文章來(lái)源】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:162 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

基于產(chǎn)絮克隆菌的遺傳及產(chǎn)絮特性研究


G+細(xì)菌細(xì)胞壁(a)和G-細(xì)菌細(xì)胞壁(b)的模式圖

革蘭氏染色,光學(xué)顯微鏡,微鏡,透射電子顯微鏡


3-2 光學(xué)顯微鏡下菌體 F2 革蘭氏染色 (100logy of bioflocculant producing bacteria by o微鏡和透射電子顯微鏡下分別觀察在 養(yǎng) 12~24h 的產(chǎn)絮菌菌體細(xì)胞,如圖 3

掃描電鏡觀察,菌株


菌株F2(×6K)掃描電鏡觀察Fig.3-3Morphologyofbioflocculantproducingbacteriabyscanningelectronmicroscope

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩株芽孢桿菌產(chǎn)纖維素酶的研究[J]. 燕紅,楊謙,王希國(guó).  林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè). 2006(02)
[2]2株芽孢桿菌利用不同碳源生產(chǎn)絮凝劑的研究[J]. 朱艷彬,馬放,任南琪,黃君禮,王愛(ài)杰.  環(huán)境科學(xué). 2005(05)
[3]青霉菌HHE-P7利用桔水培養(yǎng)微生物絮凝劑的研究[J]. 劉暉,周康群,胡勇有,成文,劉潔萍,周遺品.  水處理技術(shù). 2005(02)
[4]絮凝選擇載體的構(gòu)建及β葡萄糖苷酶基因在釀酒酵母中的表達(dá)[J]. 劉小琳,賀鵬,盧大軍,沈安,江寧.  生物工程學(xué)報(bào). 2005(01)
[5]原生質(zhì)體融合技術(shù)構(gòu)建高效驅(qū)油細(xì)胞工程菌的研究[J]. 宋紹富,張忠智,俞理,羅一菁,雷光倫.  油田化學(xué). 2004(02)
[6]細(xì)胞融合技術(shù)及其進(jìn)展[J]. 王克明.  浙江科技學(xué)院學(xué)報(bào). 2004(02)
[7]微生物絮凝劑MBFTRJ21的絮凝機(jī)理[J]. 秦培勇,張通,陳翠仙.  環(huán)境科學(xué). 2004(03)
[8]固氮菌J-25利用味精廢水產(chǎn)生絮凝劑的研究[J]. 尹華,余莉萍,彭輝,葉錦韶,張娜.  環(huán)境化學(xué). 2003(06)
[9]固態(tài)發(fā)酵中纖維素基質(zhì)降解過(guò)程初步研究[J]. 周曉宏,陳洪章,李佐虎.  過(guò)程工程學(xué)報(bào). 2003(05)
[10]利用廢棄物生產(chǎn)生物絮凝劑研究[J]. 周旭,王竟,周集體,朱曉兵.  化工裝備技術(shù). 2003(04)

碩士論文
[1]復(fù)合型生物絮凝劑(CBF)絮凝特性研究[D]. 遲熠.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào):3092157

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