污水中病毒濃集、消毒規(guī)律及滅活機(jī)理研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-03 23:44
許多病毒性傳染疾病都可以通過(guò)水或污水傳播,嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康,污水中的病毒學(xué)安全已經(jīng)引起廣泛的關(guān)注。目前尚無(wú)十分有效的方法直接對(duì)污水中的較低濃度的病毒進(jìn)行濃集和檢測(cè);對(duì)污水中病毒的消毒規(guī)律,尤其是病毒滅活機(jī)理的研究十分有限,而且結(jié)論不一,甚至相反。因此,本課題的目的是建立一種濃集污污水中病毒的有效方法;研究氯和二氧化氯滅活污水中微生物的規(guī)律,尋找用于評(píng)價(jià)污水消毒的指示微生物;并在核酸和蛋白質(zhì)功能的水平闡明氯和二氧化氯滅活病毒的機(jī)理,以更好地指導(dǎo)污水消毒,確保污水的病毒學(xué)安全。首先在本實(shí)驗(yàn)室已有的載陽(yáng)電荷濾材的基礎(chǔ)上,以f2噬菌體和脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus,PV)作為指示病毒,通過(guò)采用向污水中投加聚氯化鋁、并改變污水的溫度和酸堿度等措施,使病毒濃集效果達(dá)到最優(yōu)化。我們確定了病毒濃集的最佳條件:調(diào)節(jié)污水至pH6.5左右,向污水中加入聚氯化鋁至30mg/L,在20-30℃的工作溫度下,我們的方法可以使污水中的病毒回收率達(dá)到在80%以上,將我們的方法應(yīng)用于大體積的城市污水中的病毒濃集,也取得了較好的效果。在不同的色度、濁度、溫度、pH值、消毒劑濃度和氨氮值下進(jìn)行消毒,結(jié)果發(fā)現(xiàn),二...
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍軍事科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:96 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
RT-PCR檢測(cè)PV1的敏感性
結(jié)果同樣均為陽(yáng)性,作用30和40min時(shí)探針19和20不與靶序列雜交,其他探針均能與對(duì)應(yīng)區(qū)域發(fā)生雜交;而作用45min時(shí),探針2、7、8、12和14不與PV1基因組的靶序列發(fā)生雜交,因此表明上述區(qū)域可能在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)上受到了損傷(見(jiàn)圖4-3-A);0.8mg/L 二氧化氯作用4 min時(shí),各個(gè)探針雜交的結(jié)果均為陽(yáng)性,作用8 min時(shí),探針3、8、9和14不與PV1基因組對(duì)應(yīng)區(qū)域發(fā)生雜交,因此表明這些區(qū)域在上述時(shí)間點(diǎn)上可能受到損傷(圖4-3-B)。用長(zhǎng)探針?lè)治雎群投趸葘?duì)PV1基因組損傷的位點(diǎn)見(jiàn)表4-3。從我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,284-334nt區(qū)域是氯和二氧化氯對(duì)PV1基因組的共同的損傷位點(diǎn)。用長(zhǎng)探針?lè)治雎群投趸葘?duì)PV1基因組損傷的位點(diǎn)分別見(jiàn)表4-3。以短探針進(jìn)行核酸雜交分析發(fā)現(xiàn),1.0 mg/L 氯作用 25min 時(shí),各個(gè)探針雜交的結(jié)果同樣均為陽(yáng)性,作用 30 和 40min 時(shí)探針 19c 和 20b 不與靶序列雜交
8 + - - + - + - - - --分別表示損傷和未損傷;N 表示未檢測(cè);基因組相應(yīng)的位點(diǎn)用其對(duì)應(yīng)的探針編號(hào)表示。圖 4-4 PV1 基因組對(duì)應(yīng)片段的 PCR 擴(kuò)增結(jié)果Fig. 4-4 PCR amplification of PV1genome fragmentsFmRn stands PCR with sense primer m and antisense primer n. M 1(從上至下):10、7、6、5、2、1kb;M 2(從上至下):2、1、0.75、0.5、0.25、0.1 kb。4360174815360M 1748137478274684M 2 1 235F3RT1M2 F1R2F1R37121F2RT16969F1R2360F1RT17481F1R3360M 17481AF2R47478F1R17468B
本文編號(hào):3062155
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍軍事科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:96 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
RT-PCR檢測(cè)PV1的敏感性
結(jié)果同樣均為陽(yáng)性,作用30和40min時(shí)探針19和20不與靶序列雜交,其他探針均能與對(duì)應(yīng)區(qū)域發(fā)生雜交;而作用45min時(shí),探針2、7、8、12和14不與PV1基因組的靶序列發(fā)生雜交,因此表明上述區(qū)域可能在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)上受到了損傷(見(jiàn)圖4-3-A);0.8mg/L 二氧化氯作用4 min時(shí),各個(gè)探針雜交的結(jié)果均為陽(yáng)性,作用8 min時(shí),探針3、8、9和14不與PV1基因組對(duì)應(yīng)區(qū)域發(fā)生雜交,因此表明這些區(qū)域在上述時(shí)間點(diǎn)上可能受到損傷(圖4-3-B)。用長(zhǎng)探針?lè)治雎群投趸葘?duì)PV1基因組損傷的位點(diǎn)見(jiàn)表4-3。從我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,284-334nt區(qū)域是氯和二氧化氯對(duì)PV1基因組的共同的損傷位點(diǎn)。用長(zhǎng)探針?lè)治雎群投趸葘?duì)PV1基因組損傷的位點(diǎn)分別見(jiàn)表4-3。以短探針進(jìn)行核酸雜交分析發(fā)現(xiàn),1.0 mg/L 氯作用 25min 時(shí),各個(gè)探針雜交的結(jié)果同樣均為陽(yáng)性,作用 30 和 40min 時(shí)探針 19c 和 20b 不與靶序列雜交
8 + - - + - + - - - --分別表示損傷和未損傷;N 表示未檢測(cè);基因組相應(yīng)的位點(diǎn)用其對(duì)應(yīng)的探針編號(hào)表示。圖 4-4 PV1 基因組對(duì)應(yīng)片段的 PCR 擴(kuò)增結(jié)果Fig. 4-4 PCR amplification of PV1genome fragmentsFmRn stands PCR with sense primer m and antisense primer n. M 1(從上至下):10、7、6、5、2、1kb;M 2(從上至下):2、1、0.75、0.5、0.25、0.1 kb。4360174815360M 1748137478274684M 2 1 235F3RT1M2 F1R2F1R37121F2RT16969F1R2360F1RT17481F1R3360M 17481AF2R47478F1R17468B
本文編號(hào):3062155
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