目的:分離培養(yǎng)泰安市奈河水系城區(qū)段水樣中具有硝化能力的細菌,并對其進行分離培養(yǎng)和鑒定。方法:采集泰安市奈河水系城區(qū)段的水樣,使用選擇性培養(yǎng)基進行增菌培養(yǎng)、分離培養(yǎng)和純培養(yǎng),獲得純培養(yǎng)的菌株并保存;對水樣中分離培養(yǎng)得到的細菌進行硝化能力檢測、16SrDNA的基因測序與對比、形態(tài)特征觀察、生化實驗與鑒定。結果:分離一株具有硝化能力的菌株,測序分析該菌株屬于黃桿菌屬,生化反應鑒定該株細菌為金黃桿菌Ⅱb。結論:泰安市奈河水系城區(qū)段水樣中含有異養(yǎng)型硝化細菌,其在生態(tài)循環(huán)中可能發(fā)揮重要作用。 

【文章來源】：生物化工. 2020,6(04)

【文章頁數】：4 頁

【部分圖文】：

圖1 分離菌株硝化能力統計圖

通過測序，獲得4號菌株16SrDNA有效長度為1 477 bp。測序結果使用BLAST＿W與Gen Bank數據庫中序列進行比對，與數據庫中的Flavobacterium sp.WB2.1-16有98.15%的同源性；與數據庫中的Flavobacterium sp.UMI-01有97.35%的同源性；與數據庫中的Flavobacterium sp.WB2.1-19有97.40%的同源性。其系統發(fā)育樹圖見圖2。所以，可以確定4號菌株屬于黃桿菌屬（Flavobacterium sp.）細菌。2.3 生化鑒定結果

根據核酸測序與比對結果以及以上生物學特性，選擇HX-21細菌鑒定系統的非發(fā)酵鑒定板，其結果見表1。通過與鑒定數據庫比對，4號菌株屬于金黃桿菌Ⅱb菌種，概率為99%。環(huán)境中的氮素分為有機氮和無機氮，且以無機氮為主。氮素輸出有多種方式，其中與植物吸收利用密切相關的是硝態(tài)氮中的硝酸根。自然環(huán)境中，氨氮轉化為硝酸根的過程被普遍認為由微生物完成，其中包括亞硝化細菌、硝化細菌以及非硝化細菌但具有硝化能力的其他微生物。近年來，異養(yǎng)型具有硝化能力的細菌被陸續(xù)發(fā)現。唐偉等[2]2019年報道了6株具有異養(yǎng)硝化作用的細菌，其中一株對NH4+-N去除率為75.67%，經16SrDNA測序鑒定，菌株HNM-4為假單胞菌（Pseudomonas sp.）。邰勇等[3]2019年報道了一株農桿菌屬（Agrobacterium sp.）的異養(yǎng)硝化菌BT1，該菌株具有高效的異養(yǎng)硝化性能及優(yōu)異的氨氮耐受性，在高氨氮濃度（500 mg/L和1 000 mg/L）下生長良好且NH4+-N去除率均超過64.69%。楊壘等[4]2019年報道了一株高效異養(yǎng)硝化細菌（Pseudomonas aeruginosa YL），結果表明，菌株YL不但具有高效的異養(yǎng)硝化能力，而且具有好氧反硝化能力。本研究在泰安市泰山區(qū)奈河城區(qū)河段分離培養(yǎng)出異養(yǎng)型具有亞硝化能力的一株細菌，經16SrRNA測序鑒定，屬于黃苷菌屬，生化鑒定為金黃桿菌Ⅱb。此類細菌的存在，與其所處環(huán)境的微生物生態(tài)環(huán)境直接相關，并且在整個生態(tài)鏈條中發(fā)揮著不可或缺的作用。

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]一株Agrobacterium sp.異養(yǎng)硝化菌的分離鑒定及其氨氧化性能[J]. 邰勇,鄧敬軒,任洪艷,黃振興,阮文權.  應用與環(huán)境生物學報. 2020(02)
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本文編號：3029087