海洋污損生物對(duì)海上平臺(tái)和航海設(shè)備造成了很大的危害，嚴(yán)重阻礙人類海上經(jīng)濟(jì)和軍事活動(dòng)。大量研究發(fā)現(xiàn)，海洋生物污損的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是由于污損微生物的附著引起的，因此，研究具有抗微生物附著作用的防污劑具有重要意義。早期的防污劑因毒性大、難降解等缺陷已逐漸被限制使用，而天然產(chǎn)物防污劑具有無毒害、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)，目前已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn)。然而許多天然活性產(chǎn)物產(chǎn)量低、制備成本高、穩(wěn)定性差，因此亟需尋找產(chǎn)量高、成本低和性質(zhì)穩(wěn)定的抗污損生物防污劑。解淀粉芽孢桿菌可以產(chǎn)生多種活性物質(zhì)，抑菌譜廣，且生產(chǎn)過程簡(jiǎn)便、產(chǎn)量高、活性物質(zhì)穩(wěn)定性強(qiáng)，已經(jīng)引起人們的廣泛重視。本實(shí)驗(yàn)室分離得到一株解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens anti-CA），研究發(fā)現(xiàn)該菌株對(duì)常見污損細(xì)菌如蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）、鰻弧菌（Vibrio anguillarum）、燦爛弧菌（V.splendidus）、哈維氏弧菌（V. harveyi）、交替假單胞菌（Pseudoalteromonas sp.）和銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）均具有顯著的抑菌活性。采用薄層層... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1 海洋生物污損及其危害
    2 海洋污損生物種類
        2.1 污損動(dòng)物和植物
            2.1.1 藤壺
            2.1.2 海帶
        2.2 污損微生物
    3 污損細(xì)菌生物膜及其危害
        3.1 污損細(xì)菌生物膜的形成
        3.2 污損細(xì)菌生物膜的危害
    4 細(xì)菌生物膜的控制方法
        4.1 物理方法
        4.2 物理化學(xué)方法
        4.3 化學(xué)方法
        4.4 生物方法
            4.4.1 微生物膜方法
            4.4.2 微生物代謝產(chǎn)物
    5 解淀粉芽孢桿菌
        5.1 解淀粉芽孢桿菌的應(yīng)用和研究進(jìn)展
        5.2 解淀粉芽孢桿菌代謝活性物質(zhì)的研究進(jìn)展
    6 研究目標(biāo)和內(nèi)容
第二章 防污損解淀粉芽孢桿菌的篩選
    0 前言
    1 材料與方法
        1.1 培養(yǎng)基的配制
        1.2 菌株
        1.3 篩選菌種庫中具有抑制污損細(xì)菌的解淀粉芽孢桿菌
    2 結(jié)果與討論
        2.1 解淀粉芽孢桿菌對(duì)各指示菌抑菌活性的篩選結(jié)果
        2.2 討論
    本章小結(jié)
第三章 解淀粉芽孢桿菌 ANTI-CA 菌株代謝產(chǎn)物中活性成分的提取分離和結(jié)構(gòu)分析
    0 前言
    1 材料和方法
        1.1 培養(yǎng)基
        1.2 菌株
        1.3 粗品的制備方法
            1.3.1 種子液的培養(yǎng)
            1.3.2 接種發(fā)酵
            1.3.3 離心
            1.3.4 鹽酸酸沉
            1.3.5 凍干
            1.3.6 固相萃取
            1.3.7 粗品的抑菌活性跟蹤檢測(cè)
        1.4 活性成分的分離方法
            1.4.1 薄層層析法（TLC）
            1.4.2 抑菌活性跟蹤
            1.4.3 柱層析法
            1.4.4 液質(zhì)聯(lián)用分析
    2 結(jié)果與討論
        2.1 粗品的制備和固相萃取結(jié)果
        2.2 粗品的抑菌活性跟蹤結(jié)果
        2.3 分離結(jié)果
            2.3.1 TLC 薄層層析結(jié)果
            2.3.2 TLC 分離過程中對(duì)各組分活性跟蹤結(jié)果
            2.3.3 質(zhì)譜分析結(jié)果
            2.3.4 液質(zhì)聯(lián)用和二級(jí)質(zhì)譜分析結(jié)果
        2.4 討論
    本章小結(jié)
第四章 環(huán)脂肽 6-2 抑菌譜和抑菌機(jī)理的研究
    0 前言
    1 材料和方法
        1.1 緩沖液的配制
        1.2 培養(yǎng)基和試劑的配制
        1.3 溶菌酶的配制
        1.4 指示菌株
        1.5 環(huán)脂肽 6-2 的抑菌譜研究方法
        1.6 環(huán)脂肽 6-2 的抑菌機(jī)理研究方法
            1.6.1 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株的抑菌機(jī)理的研究
            1.6.2 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 的抑菌機(jī)理的研究
    2 結(jié)果和討論
        2.1 環(huán)脂肽 6-2 抑菌譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2 環(huán)脂肽 6-2 的抑菌機(jī)理結(jié)果
            2.2.1 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株的抑菌機(jī)理研究結(jié)果
            2.2.2 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 的抑菌機(jī)理研究結(jié)果
        2.3 討論
    本章小結(jié)
第五章 環(huán)脂肽 6-2 抑制細(xì)菌生物膜的研究
    第一節(jié) 環(huán)脂肽 6-2 抑制細(xì)菌生物膜形成和清除研究
        0 前言
        1 材料和方法
            1.1 培養(yǎng)基
            1.2 受試菌株
            1.3 試劑和染料
            1.4 環(huán)脂肽 6-2 抑制細(xì)菌生物膜形成實(shí)驗(yàn)方法
                1.4.1 實(shí)驗(yàn)原理
                1.4.2 測(cè)定環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株和 B. cereus 的最小抑菌濃度（MIC）
                1.4.3 結(jié)晶紫染色法檢測(cè)環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株生物膜形成的抑制
                1.4.4 結(jié)晶紫染色法檢測(cè)環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株生物膜的清除
                1.4.5 結(jié)晶紫染色法檢測(cè)環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 生物膜形成的抑制
                1.4.6 結(jié)晶紫染色法測(cè)定環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 生物膜的清除
                1.4.7 數(shù)據(jù)處理方法
            1.5 活/死菌染色法定量分析環(huán)脂肽 6-2 對(duì)細(xì)菌生物膜形成的影響
                1.5.1 共聚焦掃描顯微鏡檢測(cè)環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株生物膜的形成影響
                1.5.2 共聚焦掃描顯微鏡檢測(cè)環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 生物膜形成的影響
        2 結(jié)果與討論
            2.1 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株和 B. cereus 的最小抑菌濃度測(cè)試結(jié)果
            2.2 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株生物膜形成的抑制和清除結(jié)果
            2.3 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) B. cereus 生物膜的形成抑制和清除結(jié)果
            2.4 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株和 B. cereus 生物膜的抑制結(jié)果
            2.5 討論
    第二節(jié) 環(huán)脂肽 6-2 對(duì) P. aeruginosa PAO1 菌株胞外多糖合成基因 PslC 表達(dá)的影響
        0 前言
        1 材料和方法
            1.1 培養(yǎng)基和試劑
            1.2 受試菌株
            1.3 目的基因（Target Gene）
            1.4 設(shè)計(jì)引物
            1.5 實(shí)驗(yàn)方法
                1.5.1 種子液的培養(yǎng)
                1.5.2 提取 P. aeruginosa PAO1 菌株的 RNA
                1.5.3 RNA 反轉(zhuǎn)錄成 cDNA
                1.5.4 熒光定量 PCR
                1.5.5 相對(duì)表達(dá)量的計(jì)算方法
        2 結(jié)果與討論
            2.1 檢測(cè)提取的 RNA
            2.2 熒光定量 PCR 結(jié)果
            2.3 討論
    本章小結(jié)
第六章 環(huán)脂肽 6-2 抑制海帶孢子的萌發(fā)和對(duì)藤壺幼蟲的毒性及實(shí)地實(shí)驗(yàn)
    第一節(jié) 環(huán)脂肽 6-2 抑制海帶孢子的萌發(fā)和對(duì)藤壺幼蟲的毒性實(shí)驗(yàn)
        0 前言
        1 材料和方法
            1.1 海帶孢子的制備
            1.2 藤壺的采集
            1.3 f/2 培養(yǎng)基的配制
            1.4 三角褐指藻的培養(yǎng)
            1.5 藤壺幼蟲的釋放和培養(yǎng)
            1.6 環(huán)脂肽 6-2 溶液的制備
            1.7 環(huán)脂肽 6-2 抑制海帶孢子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)方法
            1.8 藤壺幼蟲毒性實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與討論
            2.1 環(huán)脂肽 6-2 抑制海帶孢子萌發(fā)結(jié)果
            2.2 藤壺幼蟲的培養(yǎng)結(jié)果
            2.3 環(huán)脂肽 6-2 對(duì)藤壺幼蟲的毒性實(shí)驗(yàn)
            2.4 討論
    第二節(jié) 海洋掛板實(shí)地實(shí)驗(yàn)
        0 前言
        1 材料和方法
            1.1 掛板的制備
            1.2 防污涂層的制備
        2 結(jié)果與討論
            2.1 實(shí)地掛板實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.2 討論
    本章小結(jié)
全文總結(jié)與創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
攻讀博士期間發(fā)表的論文
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3021568