甲胺磷是一種劇毒有機(jī)磷類殺蟲劑,雖已遭到禁用,但由于其高效、廣譜的殺蟲效果以及低廉的價格,有些地區(qū)仍在違規(guī)生產(chǎn)和使用。盡管甲胺磷在土壤、水體等環(huán)境中的半衰期較短,但由于甲胺磷的施用量高,甲胺磷帶來的環(huán)境污染和食品安全問題引起了廣泛重視并急需解決。因此,從污染環(huán)境中分離高效、穩(wěn)定的甲胺磷降解菌株,并將其應(yīng)用于甲胺磷等有機(jī)磷農(nóng)藥污染環(huán)境的修復(fù)具有重要的理論和現(xiàn)實意義。本研究從長期受有機(jī)磷農(nóng)藥污染的農(nóng)藥廠下水道污泥中分離獲得三株甲胺磷降解菌株MAP-1、MAP-2和JW-64-1。經(jīng)形態(tài)觀察、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析,將MAP-1、MAP-2和JW-64-1分別鑒定為生絲微菌屬（Hyphomicrobium）.甲基桿菌屬（Methylobacterium）和黃色單胞菌科的Luteibacter屬。本研究首次從上述三個屬中分離獲得甲胺磷降解菌株。菌株JW-64-1與黃色單胞菌科Luteibacter屬中僅有的三個模式種L. rhizovicinus DSM 16549T、L. yeojuensis DSM 17673T及L. anthropi CCUG 25036T的16S ... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：155 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

一1.富集液降解甲胺磷的氣相色譜圖

到餼?甑姆擲爰?ā⒔到馓匭約熬?闙AP一1的應(yīng)用研究圖1一1一2降解菌株的菌落形態(tài)Fig.l一l一 2ColonialmorPhologyofmethamidoPhos一degradingstrains圖1一1一3降解菌株的透射電鏡照片F(xiàn)ig.l小 3MierograPhofmethamidoPhos一 degradingstrains undertransmissioneleetronmieroseoPe三株降解菌的生理生化特征見表卜1一2。表1一1一2甲胺磷降解菌株的生理生化特征 CharacteristiesofPhysiologieandbiochemiealaboutthemethamidoPhos一degradingstrainsMAP一 1MAP一 2JW~64一l在LB平板生長一w+在RZA平板生長一w十在營養(yǎng)瓊脂平板生長一w+氧化酶+w+接觸酶++w淀粉水解硝酸鹽還原+一十明膠液化-一十HZS產(chǎn)生昭}垛產(chǎn)生碳?

D一阿拉伯糖注:+，表示陽性;w，弱陽性;一，表示陰性。從表l一1一l、表1一1一2、圖1一1一2和圖1一1一3可知，所分離的三株降解菌無論從菌落形態(tài)、菌體形態(tài)，還是從它們的生理生化特征來，這三株菌差異很大，很可能最終歸于不同的屬，這說明本研究所取的污染樣品中降解甲胺磷的菌存在多樣性。2.3甲胺磷降解菌株系統(tǒng)發(fā)育位置的確定提取降解菌基因組DNA(圖1一1一4)，用 165rDNA通用引物對降解菌的 165rDNA進(jìn)行擴(kuò)增，得到長度約為1.skb片段(圖1一1一5)。將PcR產(chǎn)物和pMD18一T載體連接，轉(zhuǎn)化至 E.coliDH5a中，將陽性克隆測序，測序結(jié)果提交至NCBI數(shù)據(jù)庫


本文編號：3002111