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甲胺磷降解菌株的分離鑒定、降解特性及菌株MAP-1的應用研究

發(fā)布時間:2021-01-27 00:44
  甲胺磷是一種劇毒有機磷類殺蟲劑,雖已遭到禁用,但由于其高效、廣譜的殺蟲效果以及低廉的價格,有些地區(qū)仍在違規(guī)生產和使用。盡管甲胺磷在土壤、水體等環(huán)境中的半衰期較短,但由于甲胺磷的施用量高,甲胺磷帶來的環(huán)境污染和食品安全問題引起了廣泛重視并急需解決。因此,從污染環(huán)境中分離高效、穩(wěn)定的甲胺磷降解菌株,并將其應用于甲胺磷等有機磷農藥污染環(huán)境的修復具有重要的理論和現(xiàn)實意義。本研究從長期受有機磷農藥污染的農藥廠下水道污泥中分離獲得三株甲胺磷降解菌株MAP-1、MAP-2和JW-64-1。經形態(tài)觀察、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析,將MAP-1、MAP-2和JW-64-1分別鑒定為生絲微菌屬(Hyphomicrobium).甲基桿菌屬(Methylobacterium)和黃色單胞菌科的Luteibacter屬。本研究首次從上述三個屬中分離獲得甲胺磷降解菌株。菌株JW-64-1與黃色單胞菌科Luteibacter屬中僅有的三個模式種L. rhizovicinus DSM 16549T、L. yeojuensis DSM 17673T及L. anthropi CCUG 25036T的16S ... 

【文章來源】:南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:155 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

甲胺磷降解菌株的分離鑒定、降解特性及菌株MAP-1的應用研究


一1.富集液降解甲胺磷的氣相色譜圖

照片,透射電鏡,降解菌,生理生化特征


到餼?甑姆擲爰?ā⒔到馓匭約熬?闙AP一1的應用研究圖1一1一2降解菌株的菌落形態(tài)Fig.l一l一 2ColonialmorPhologyofmethamidoPhos一degradingstrains圖1一1一3降解菌株的透射電鏡照片F(xiàn)ig.l小 3MierograPhofmethamidoPhos一 degradingstrains undertransmissioneleetronmieroseoPe三株降解菌的生理生化特征見表卜1一2。表1一1一2甲胺磷降解菌株的生理生化特征 CharacteristiesofPhysiologieandbiochemiealaboutthemethamidoPhos一degradingstrainsMAP一 1MAP一 2JW~64一l在LB平板生長一w+在RZA平板生長一w十在營養(yǎng)瓊脂平板生長一w+氧化酶+w+接觸酶++w淀粉水解硝酸鹽還原+一十明膠液化-一十HZS產生昭}垛產生碳?

電泳圖,降解菌,總DNA


D一阿拉伯糖注:+,表示陽性;w,弱陽性;一,表示陰性。從表l一1一l、表1一1一2、圖1一1一2和圖1一1一3可知,所分離的三株降解菌無論從菌落形態(tài)、菌體形態(tài),還是從它們的生理生化特征來,這三株菌差異很大,很可能最終歸于不同的屬,這說明本研究所取的污染樣品中降解甲胺磷的菌存在多樣性。2.3甲胺磷降解菌株系統(tǒng)發(fā)育位置的確定提取降解菌基因組DNA(圖1一1一4),用 165rDNA通用引物對降解菌的 165rDNA進行擴增,得到長度約為1.skb片段(圖1一1一5)。將PcR產物和pMD18一T載體連接,轉化至 E.coliDH5a中,將陽性克隆測序,測序結果提交至NCBI數(shù)據(jù)庫


本文編號:3002111

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