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百菌清酶免疫檢測技術(shù)研究

發(fā)布時間:2021-01-23 16:08
  百菌清是美國鉆石制堿公司于1963年開發(fā)的一種廣譜高效保護性殺菌劑,是目前國內(nèi)外在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上使用最廣泛的一種殺菌劑。百菌清主要應(yīng)用于防治蔬菜、大田作物、果樹、茶樹、煙草及高爾夫球場和各種綠化草坪等作物的真菌病害。由于百菌清對植物體具有良好的黏著性和使用的廣泛性,因此百菌清及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物在果蔬、土壤及水中均有較大的殘留,甚至在北極地區(qū)也能檢測到。百菌清對人畜低毒,對魚、貝類等水生生物高毒,美國國家環(huán)境保護總署已經(jīng)把百菌清列為可能使人類致癌的物質(zhì)之一。4-羥基百菌清是百菌清在土壤與水環(huán)境中的主要降解產(chǎn)物。與百菌清相比,4-羥基百菌清的毒性更強,對土壤、淤泥等更具吸附能力,半衰期更長,且具有良好的水溶性,因此4-羥基百菌清對環(huán)境和人類健康會造成更為嚴(yán)重的影響。從2009年起,美國環(huán)境保護局將百菌清最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)從只針對百菌清修改為針對百菌清及其降解產(chǎn)物4-羥基化合物的總含量。目前,我國百菌清的檢測方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法等儀器分析方法,對于4-羥基百菌清殘留檢測的研究較少。這些方法均存在樣品前處理復(fù)雜、耗時、成本高等問題,不適合大量樣品的快速檢測,因此建立一種操作簡便、快速和檢測... 

【文章來源】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:172 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

百菌清酶免疫檢測技術(shù)研究


不同抗體添加量反應(yīng)體系的紫外掃描曲線

目測法,抗體,用量,反應(yīng)體系


(2)目測法由圖7.7可見,當(dāng)在2mL膠體金溶液中加入的抗體蛋白量達到70^ig(35^ig/mL)后,滴加NaCl溶液,各試管中的反應(yīng)體系均不會呈現(xiàn)由紅到藍的聚沉變化,基本保持紅色不變。而當(dāng)加入的抗體蛋白量不足這一數(shù)值時,試管內(nèi)的反應(yīng)體系會發(fā)生顏色變化,由紅色變?yōu)樗{色。同時,目測法所得數(shù)值也與分光光度法測得33^18/11^的蛋白添加量基本符合!I_丨圖7.7目測法確定穩(wěn)定膠體金最適抗體用量Fig.7.7 Optimum sum of immunoglobulin confirmed by visual observation.7.3.2.2 K2CO3添加量的確定反應(yīng)體系中添加的K2CO3量,直接影響著反應(yīng)體系的pH值。因此考察K2CO3添加量對吸附反應(yīng)的影響。由圖7.8可見,在K2CO3量添加較少

示意圖,試紙條,示意圖,百菌清


圖7.9試紙條組裝示意圖Fig.7.9 Sketch map of assembling on strip.條的檢測方法物質(zhì),其分子量小于300道爾頓,適合使用下隨液體前移,到達T線時,百菌清與結(jié)合抗百菌清多克隆抗體-膠體金結(jié)合物。,金標(biāo)多克隆抗體與T線處固定的CHT-O膜表面析出,T線顯紅色,之后尚未結(jié)合固定的羊抗兔二抗進行的二次免疫反應(yīng),,說明樣品優(yōu)測結(jié)果呈陰性。當(dāng)樣品中的大多競爭性識別樣品中的抗原性物質(zhì),其形成可能肉眼不足以分辨的紅色沉淀,金抗兔二抗發(fā)生免疫反應(yīng),形成紅色沉淀,品檢測結(jié)果為陽性。無論樣品中是否含有,則說明檢測無效。

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
[1]不同偶聯(lián)比的毒死蜱、殺螟硫磷人工抗原的制備及表征[D]. 張美容.遼寧師范大學(xué) 2008



本文編號:2995508

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