多菌靈（carbendazim，MBC），化學(xué)名稱為N-（2-苯并咪唑基）氨基甲酸甲酯，是一種高效廣譜低毒的內(nèi)吸性殺菌劑，屬于苯胺類苯并咪唑衍生物，其使用范圍較廣，既可作為工業(yè)殺菌劑，又可作為一種有內(nèi)吸活性的植物殺菌劑，用于水果保鮮、蔬菜、果樹和谷類作物的病害防治。多菌靈化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在土壤中降解半衰期較長，能持久地殘留在使用部位，易致累積效應(yīng)，其在水體和土壤中的累積會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康造成威脅。有研究表明，微生物降解是沉積環(huán)境中多菌靈去除的主要途徑。因此尋找并研究多菌靈降解菌是十分必要的。山西省農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室已分離篩選出一株細(xì)菌NY97-1，經(jīng)試驗(yàn)證明該菌具有降解多菌靈的特性，若能進(jìn)一步研究其降解能力、降解條件，為其在生物修復(fù)中的應(yīng)用提供依據(jù)和實(shí)驗(yàn)材料，無疑具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。綠色熒光蛋白（GFP）基因作為標(biāo)記基因，被廣泛應(yīng)用于環(huán)境微生物學(xué)方面，由于其表達(dá)穩(wěn)定，容易觀測(cè)，因此，可以以GFP作為報(bào)告基因，對(duì)菌株NY97-1進(jìn)行GFP標(biāo)記，為今后研究多菌靈降解菌在自然環(huán)境中的定殖、分布及動(dòng)態(tài)變化打下基礎(chǔ)。本文的主要研究內(nèi)容有如下幾個(gè)方面：1．該菌株NY97-1的16S rDNA經(jīng)... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
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英文摘要
第一章 前言
    1. 生物降解
        1.1 微生物在生物圈進(jìn)化中的作用
        1.2 生物降解及生物降解能力
        1.3 生物降解與微生物生理活性物質(zhì)
        1.4 檢測(cè)生物降解能力的原則
        1.5 利用環(huán)境樣品和純培養(yǎng)菌進(jìn)行生物降解實(shí)驗(yàn)
    2. 綠色熒光蛋白在環(huán)境微生物中的應(yīng)用
        2.1 綠色熒光蛋白簡介
        2.2 綠色熒光蛋白分子的結(jié)構(gòu)及特性
        2.3 綠色熒光蛋白的性質(zhì)
        2.4 綠色熒光蛋白的檢測(cè)方法
        2.5 綠色熒光蛋白在微生物降解污染物研究中的應(yīng)用
    3. 殺菌劑多菌靈研究進(jìn)展
        3.1 理化性質(zhì)
        3.2 生態(tài)毒理
        3.3 多菌靈的殘留檢測(cè)方法
        3.4 多菌靈的生物修復(fù)技術(shù)
        3.5 多菌靈的降解機(jī)制
    4. 本論文的研究目的重點(diǎn)及意義
第二章 多菌靈降解菌NY97-1分類學(xué)地位的確定
    1. 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 形態(tài)特征及生理生化反應(yīng)
        1.3 以染色體DNA為模板PCR擴(kuò)增16S rDNA
        1.4 以單菌落為模板PCR擴(kuò)增16S rDNA
    2. 結(jié)果
        2.1 生理生化特性
        2.2 16S rDNA序列的NCBI在線BLAST比對(duì)結(jié)果
    3. 討論
第三章 NY97-1的綠色熒光蛋白標(biāo)記
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 主要試劑與儀器
        1.3 NY97-1基因組DNA啟動(dòng)子基因文庫的構(gòu)建
        1.4 強(qiáng)啟動(dòng)子片斷的序列測(cè)定及分析
        1.5 NY97-1組成型啟動(dòng)子活性片段的亞克隆及GFP基因穿梭表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.6 重組DNA的電轉(zhuǎn)化重組DNA的電轉(zhuǎn)化
        1.7 轉(zhuǎn)化子的熒光檢測(cè)
        1.8 轉(zhuǎn)化子的穩(wěn)定性檢測(cè)
    2. 結(jié)果
        2.1 啟動(dòng)子基因文庫的構(gòu)建
        2.2 強(qiáng)啟動(dòng)子片斷的測(cè)序分析
        2.3 穿梭表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.4 轉(zhuǎn)化子的熒光檢測(cè)與穩(wěn)定性檢測(cè)
    3. 討論
第四章 NY97-1降解多菌靈的研究
    1. 材料與方法
        1.1 材料與儀器
        1.2 多菌靈降解率的檢測(cè)
        1.3 菌懸液的制備
        1.4 多菌靈濃度對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        1.5 氮源對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        1.6 pH值對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        1.7 培養(yǎng)溫度對(duì)菌株降解多菌靈的影響
    2. 結(jié)果
        2.1 多菌靈標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.2 多菌靈濃度對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        2.3 氮源對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        2.4 pH值對(duì)菌株降解多菌靈的影響
        2.5 培養(yǎng)溫度對(duì)菌株降解多菌靈的影響
    3. 討論
    4. 結(jié)論
第五章 NY97-1對(duì)多菌靈毒力的影響
    1. 試驗(yàn)材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 菌株NY97-1對(duì)六種病原真菌的拮抗性能測(cè)定
        1.3 多菌靈對(duì)六種病原真菌的毒力測(cè)定
        1.4 低濃度多菌靈與NY97-1菌液混配對(duì)六種病原真菌的共同作用
    2. 結(jié)果
        2.1 NY97-1對(duì)六種枯萎病原菌的拮抗效果
        2.2 多菌靈單劑對(duì)六種枯萎病原菌的毒力測(cè)定結(jié)果
        2.3 多菌靈與NY97-1菌液對(duì)六種枯萎病原菌的共同作用
    3. 小節(jié)與討論
第六章 多菌靈對(duì)黃瓜抗氧化酶及ATP酶的影響
    1. 材料與方法
        1.1 儀器與試劑
        1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3 樣品預(yù)處理及酶活性測(cè)定
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 不同濃度多菌靈對(duì)黃瓜SOD活性的影響
        2.2 不同濃度多菌靈對(duì)黃瓜CAT活性的影響
X活性的影響">        2.3 不同濃度多菌靈對(duì)黃瓜GP_X活性的影響
+-ATP活性的影響">        2.4 不同濃度多菌靈對(duì)黃瓜Na⁺-ATP活性的影響
2+-ATP活性的影響">        2.5 不同濃度多菌靈對(duì)黃瓜Mg²⁺-ATP活性的影響
    3. 討論
第七章 多菌靈降解菌的使用對(duì)多菌靈脅迫下黃瓜抗氧化酶及ATP酶的影響
    1. 材料方法
        1.1 供試土壤
        1.2 供試菌株
        1.3 殺菌劑多菌靈及其降解菌的使用
        1.4 測(cè)定方法
        1.5 數(shù)據(jù)處理
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 降解菌的使用對(duì)黃瓜細(xì)菌蛋白的含量的影響
        2.2 降解菌的使用對(duì)黃瓜SOD酶的影響
        2.3 降解菌的使用對(duì)黃瓜CAT酶的影響
        2.4 降解菌的使用對(duì)黃瓜ATP酶的影響
    3. 討論
第八章 本文主要研究結(jié)論及展望
    1. 本文主要研究結(jié)論
        1.1 關(guān)于PCR擴(kuò)增16S rDNA基因序列時(shí)模板的選擇
        1.2 GFP標(biāo)記的思路
        1.3 菌株的多重功能——降解多菌靈與拮抗六種枯萎病原菌
        1.4 多菌靈單劑及其與NY97-1活體菌液混合使用對(duì)六種枯萎病原菌的毒力
        1.5 菌株NY97-1降解多菌靈的能力
        1.6 多菌靈對(duì)黃瓜抗氧化酶的影響
    2. 論文創(chuàng)新之處
    3. 本文工作的重點(diǎn)及對(duì)今后工作的展望
參考文獻(xiàn)
攻讀博士期間發(fā)表的論文
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]油菜植株及其土壤中多菌靈殘留檢測(cè)及動(dòng)態(tài)[J]. 游子涵,陳智東,柳訓(xùn)才,薛愛芳,李勝清,陳浩.  農(nóng)藥. 2006(08)
[3]萘降解細(xì)菌的分離及其降解基因的分子檢測(cè)[J]. 李永君,趙化冰,任河山,梁靖,蔡寶立.  生態(tài)學(xué)雜志. 2006(07)
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本文編號(hào)：2974183