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環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對肝細(xì)胞VTG及HSP-70誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2020-07-27 12:40
【摘要】: 目的:隨著現(xiàn)代工業(yè)和農(nóng)業(yè)的高速發(fā)展,在給人類社會帶來高度物質(zhì)文明的同時,也給人類生存環(huán)境帶來了種種問題。大量化學(xué)物質(zhì)在環(huán)境中過度釋放對環(huán)境造成了極大的污染。越來越多的證據(jù)表明,被釋放到環(huán)境中的許多人工合成物質(zhì)對人體和動物內(nèi)分泌系統(tǒng)都具有干擾作用,這些物質(zhì)能改變機(jī)體內(nèi)分泌功能,并影響生物體或其后代的發(fā)育、繁殖和行為。人類不斷發(fā)現(xiàn)一些存在于生物機(jī)體之外的、具有與人和生物內(nèi)分泌激素作用類似的環(huán)境污染物質(zhì),能引起生物內(nèi)分泌紊亂,稱為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。環(huán)境污染對人類帶來的危害越來越受到世人的矚目,尋找一種有效評價環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的毒性指標(biāo)已成為當(dāng)務(wù)之急。 方法:鯽魚血清中VTG和鈣含量具有較好的相關(guān)性,以評價魚類受雌激素污染程度,對EDCs的雌激素效應(yīng)進(jìn)行篩選評價。在不同劑量E_2暴露14d后,ELISA法測定雄性、雌性鯽魚血清中VTG濃度,用原子吸收分光光度法對血清鈣含量進(jìn)行測定;對釜山洛同江水源地下游和釜山地區(qū)農(nóng)業(yè)園田棲生的牛蛙五月至八月進(jìn)行檢測,相同的月份雄性、雌性牛蛙VTG水平;對釜山洛同江污水處理廠下游的鯽魚及釜山農(nóng)業(yè)園區(qū)內(nèi)的牛蛙進(jìn)行肝細(xì)胞誘導(dǎo)VTG和生殖腺發(fā)育GSI(生殖腺重量/體重×100%)的相關(guān)性進(jìn)行研究;鯽魚幼魚肝細(xì)胞原代培養(yǎng),施加17β-雌二醇和金屬鎘誘導(dǎo)VTG及HSP-70的實(shí)驗(yàn),ELISA法測定培養(yǎng)液中VTG濃度,免疫印跡檢測HSP-70所得結(jié)果用UVP數(shù)碼凝膠分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度分析。 結(jié)果:在不同劑量E_2暴露組暴露14d后,ELISA法測定雄性、雌性鯽魚血清中VTG與對照組相比有顯著增長(P<0.01),血清中VTG和鈣含量與E_2暴露劑量具劑量-效應(yīng)關(guān)系(R~2=0.768);釜山洛同江水源地下游和釜山地區(qū)農(nóng)業(yè)園田棲生的牛蛙五月至八月進(jìn)行檢測結(jié)果,相同的月份雄性、雌性牛蛙,農(nóng)業(yè)園田的比水源地的VTG高(p<0.05),GSI低(p<0.05);洛同江水源地下游雌性鯽魚五月,六月的GSI值高于七月GSI,六月的VTG值高于五月、七月的VTG值:洛同江污水處理廠下游雄性鯽魚低的GSI出現(xiàn)高濃度的VTG,發(fā)現(xiàn)兩性生殖細(xì)胞并存現(xiàn)象;鯽魚幼魚肝細(xì)胞培養(yǎng)后17β-雌二醇和金屬鎘不同濃度的暴露后,檢測出VTG和HSP-70,誘導(dǎo)48h濃度在E_2500ng/L+Cd50ug/L和Cd100ug/L時表達(dá)量最高(p<0.01)。 結(jié)論:鯽魚血清中的鈣含量進(jìn)行測定,能夠間接地確定鯽魚血清中的VTG含量,進(jìn)而可判別魚類受環(huán)境內(nèi)分泌干擾物污染的狀況;釜山洛同江污水處理廠下游和釜山地區(qū)農(nóng)業(yè)園田存在不同程度的污染情況:17β-雌二醇和金屬鎘等環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對鯽魚幼魚肝細(xì)胞誘導(dǎo)VTG和HSP-70作用;HSP-70是高效、特異、靈敏的環(huán)境污染早期預(yù)警生物標(biāo)志物。
【學(xué)位授予單位】:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:X503
【圖文】:

環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對肝細(xì)胞VTG及HSP-70誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究


雌性螂魚VTG濃度比較

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2771861

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