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四溴雙酚A對櫛孔扇貝毒性效應與污染監(jiān)測技術的研究

發(fā)布時間:2020-07-03 19:12
【摘要】:四溴雙酚A (tetrabisphenol A)是目前世界上產量和使用量最大的一種溴系阻燃劑。這種阻燃劑可以被作為反應型阻燃劑(超過90%)添加到印刷電路板和作為添加型阻燃劑混合入塑料合成物中。由于其廣泛使用,并能夠從產品中釋放到環(huán)境中,目前在全球范圍內的環(huán)境介質中普遍存在。TBBPA由于與甲狀腺激素結構類似,是一種潛在的內分泌干擾物。此外,它還被證實具有神經毒性、內分泌毒性、腎毒性和肝毒性等。本文根據我國近海環(huán)境TBBPA污染狀況,以櫛孔扇貝(Chlamys farreri)為研究對象,研究了櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下的多種毒性效應,構建了TBBPA在櫛孔扇貝體內生理毒代-毒效動力學模型,建立了快速檢測TBBPA濃度的酶聯(lián)免疫方法,對青島近海海域進行了為期一年的生物監(jiān)測工作,為TBBPA對海洋生物的毒性機制研究提供了基礎數據,并為海洋TBBPA的污染監(jiān)測(檢測)提供了技術支持。1櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下毒性效應的研究本章首先研究了TBBPA對櫛孔扇貝的餌料藻,小新月菱形藻(Nitzschia closterium f. minutissima)的毒性效應,結果顯示TBBPA能快速地在小新月菱形藻細胞內累積,并能顯著誘導SOD、GST酶的活力和GSH含量的增加。其次,通過食物和海水+食物兩種暴露方式用TBBPA對櫛孔扇貝染毒,結果發(fā)現海水途徑是櫛孔扇貝吸收TBBPA的主要方式(占總吸收量的92%左右),單純食物途徑TBBPA染毒也能夠對櫛孔扇貝組織的解毒代謝指標產生顯著影響。然后,設置TBBPA暴露濃度為0.2、0.4和0.8 mg/L,通過海水+食物途徑對櫛孔扇貝進行染毒10d,緊接著進行10d的消除實驗,結果顯示櫛孔扇貝能夠快速吸收和代謝TBBPA,TBBPA脅迫能夠激活機體的抗氧化防御體系,并能顯著誘導GST、 UGT和SULT等二相代謝酶的活力,高濃度的TBBPA導致的脂質和DNA損傷在短時間內難以修復。2櫛孔扇貝在TBBPA脅迫下的數字基因表達譜分析本研究使用Illumina的數字基因表達譜技術(DGE),考察了在TBBPA脅迫下櫛孔扇貝消化盲囊組織的轉錄響應。結果總共分別發(fā)現了173條顯著上調的基因和266條顯著下調的基因。基于GO分類系統(tǒng)和KEGG數據庫的功能分析發(fā)現TBBPA顯著改變了與應激響應、解毒代謝、抗氧化和免疫功能有關基因的表達,并且發(fā)現了TBBPA干擾甲狀腺內分泌系統(tǒng)的證據。熒光定量實驗用來確認DGE分析結果的準確與可靠。這些結果為研究TBBPA對雙殼貝類的分子毒性機制提供了基礎數據。3 TBBPA污染監(jiān)測(檢測)技術的研究基于相關性分析的結果,選取酶活力和損傷效應的生物標志物SOD、GST、GSH和LPO等作為毒效指標與TBBPA在櫛孔扇貝組織里的動態(tài)分布結合起來,構建生理毒代-毒效動力學模型,能夠將櫛孔扇貝體內TBBPA的吸收、分布、代謝、排出與生物組織的標志物響應偶聯(lián)起來。將不具有抗原活力的小分子有機污染物TBBPA與牛血清蛋白(BSA)偶聯(lián)制成人工抗原免疫大鼠,獲得免疫抗原。優(yōu)化反應條件,建立了用于快速檢測海洋環(huán)境TBBPA含量的間接酶聯(lián)免疫方法。此方法檢測速度快、靈敏度高,交叉干擾小。該方法的線性檢測范圍為0.1-100 ng/mL。4基于櫛孔扇貝青島近海污染生物監(jiān)測研究2014年選擇青島近海區(qū)域靈山衛(wèi)(S1)、海泊河口(S2)和沙子口(S3)三個站點進行污染調查,結果發(fā)現PAHs和重金屬類:海泊河口沙子口靈山衛(wèi);TBBPA:海泊河口靈山衛(wèi)沙子口。主成分分析發(fā)現MT含量變化對于Cu和Cr污染濃度具有指向性,EROD活力變化與As、Mn、PAHs和TBBPA污染水平有關。計算綜合生物標志物響應指數(IBR)后發(fā)現三站點遭受的環(huán)境壓力順序為:海泊河口沙子口靈山衛(wèi),與三個站點的總體污染情況相符。
【學位授予單位】:中國海洋大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:X171.5;S917.4

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本文編號:2740057

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