【摘要】：目的:通過觀察室內(nèi)燃煤細(xì)顆粒物(Particulate matter 2.5,PM2.5)對致敏源(Ovalbumin,OVA)誘導(dǎo)哮喘大鼠作用,探討室內(nèi)燃煤PM2.5對OVA誘導(dǎo)哮喘大鼠的氣道炎性損傷及病理改變。方法:1.以遵義塊煤為樣,采用濾膜收集室內(nèi)燃煤PM2.5,將采樣后的濾膜置于TFM消解罐中,加入40 ml濃硝酸/濃鹽酸(V/V=1:3)進(jìn)行微波消解。石墨爐原子吸收儀檢測其鉛(Plumbum,Pb)、鎘(Cadmium,Cd)等元素。2.將攜帶有室內(nèi)燃煤PM2.5的濾膜進(jìn)行超聲水洗,12層紗布過濾后真空冷凍干燥。用生理鹽水(Normal saline,NS)配置濃度為15μg/ml OVA和(或)2.5 mg/ml的PM2.5混懸液。將40只6周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為Control、OVA、PM2.5、PM2.5+OVA四組,通過氣管滴注分別予以NS、OVA(15μg/ml)和(或)PM2.5(2.5 mg/ml)混懸液200μl,2周/次,共4次。末次滴注24小時(shí)后采集支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,Balf)檢測炎性細(xì)胞分布,酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)檢測白介素4(Interleukin 4,IL-4)、γ干擾素(Interferonγ,IFN-γ)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)、IL-8、集落刺激因子(granulocyte macraoprage colony stimulating factor,GM-CSF)。右上肺做HE染色及電鏡切片。Elisa血清檢測特異性免疫球蛋白Ig E(Immunoglobulins E,OVA-Ig E)、OVA-Ig G1。Real-time Polymerrase chain reaction(RT-PCR)檢測肺組織Il-4、Ifn-γ基因的表達(dá)。結(jié)果:1.室內(nèi)燃煤PM2.5環(huán)境日均濃度為156.95μg/m3,超過國家環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的75μg/m3的濃度標(biāo)準(zhǔn)(P=0.004);元素鋅(Zinc,Zn)含量最高,為34.81μg/m3,最低的是錳(Manganese,Mn)元素0.019μg/m3。2.行為觀察PM2.5+OVA組大鼠煩躁不安,抓耳撈腮頻率高,呼吸頻率加深加快,肺部可聞及異常呼吸音。肉眼觀察肺組織Control組色澤、形態(tài)正常;OVA組色澤灰暗,表面粗糙,偶見水腫;PM2.5組肺色澤較灰暗,表面粗糙,偶見水腫,PM2.5+OVA組肺色澤異常,表面粗糙,可見大片白色或半透明病灶,疏松柔軟有彈性,明顯水腫,邊沿缺口狀凹陷明顯。Balf炎性細(xì)胞分布PM2.5+OVA組炎性細(xì)胞較Control組增多(P0.05),主要以淋巴細(xì)胞(Lymphocyte,Lym)及單核細(xì)胞(Monocyte,Mon)為主。肺支氣管蘇木素-伊紅(Hematoxylin and eosin,HE)染色鏡下見Control組炎性細(xì)胞較少,PM2.5組及OVA組炎性細(xì)胞中等量浸潤,PM2.5+OVA組大量炎性細(xì)胞浸潤。淋巴細(xì)胞Control組較OVA組、PM2.5組、PM2.5+OVA組比較浸潤增加;杯狀細(xì)胞PM2.5+OVA組、OVA組較Control組增多(P0.05)。電鏡下Control組支氣管超微結(jié)構(gòu)未見明顯損傷;OVA組可見有大量即將脫落細(xì)胞,局部可見II型細(xì)胞破損;PM2.5組可見內(nèi)皮細(xì)胞廣泛水腫,肺泡間隔可見大量纖維;PM2.5+OVA組可見炎性細(xì)胞浸潤,細(xì)胞器大量破壞,基底膜厚度不均,氣血屏障結(jié)構(gòu)不清晰。Elisa及RT-PCR檢測表明PM2.5+OVA組IL-4較PM2.5組、OVA組及Control組表達(dá)增加(P0.05),IFN-γPM2.5+OVA組、PM2.5組、OVA組較Control組降低(P0.05);GM-CSF PM2.5+OVA組較PM2.5組、OVA組、Control組表達(dá)增多(P0.01),PM2.5組、OVA組較Control組表達(dá)增多(P0.05);IL-8 PM2.5+OVA組較OVA組、Control組表達(dá)增多(P0.05),PM2.5組較空白增加(P0.05),余組間無差異;TGF-β1PM2.5+OVA組、PM2.5組及OVA組與Control組比較降低(P=0.0001),PM2.5+OVA組與OVA組相比表達(dá)降低(P0.05),余組間無差異。血清中OVA-Ig E PM2.5+OVA組與余3組相比升高(P=0.0001),OVA組與空白、PM2.5組相比表達(dá)增多(P=0.0001),空白組與PM2.5組未見差異;OVA-Ig G1組間未見差異。結(jié)論:室內(nèi)燃煤PM2.5在OVA誘導(dǎo)哮喘大鼠肺組織結(jié)構(gòu)改變、細(xì)胞因子表達(dá)異常、炎性細(xì)胞浸潤增加中起促進(jìn)作用,進(jìn)而加重OVA誘導(dǎo)哮喘大鼠呼吸道炎性損傷及組織結(jié)構(gòu)改變。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R12

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本文編號：2361603