本文關(guān)鍵詞：海洋溶藻弧菌的培養(yǎng)優(yōu)化及溶藻粉劑膠囊球工藝研究　出處：《深圳大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目前赤潮藻的防治主要以物理法、化學(xué)法為主,其防控效果總體達(dá)不到預(yù)期,并容易產(chǎn)生二次污染,因此利用生物手段,尤其是溶藻細(xì)菌防治有害赤潮藻的研究逐漸得到重視。國內(nèi)外對溶藻細(xì)菌的研究主要集中在溶藻機(jī)制、活性物質(zhì)提取、相關(guān)功能基因等研究,溶藻細(xì)菌固定化、溶藻活性物質(zhì)粉劑化、膠囊化等應(yīng)用工藝的研究相對較少,本論文將溶藻弧菌進(jìn)行發(fā)酵優(yōu)化,將發(fā)酵液上清經(jīng)噴霧干燥獲得溶藻粉劑,對粉劑進(jìn)行包埋制備適應(yīng)于實(shí)際赤潮防治的懸浮型膠囊球。本研究對溶藻弧菌H115(簡稱H115)進(jìn)行溶藻特性的探究,確定藻菌比例為1:7000,作用10min作為單因素優(yōu)化溶藻作用的條件;在溶藻方式探究實(shí)驗(yàn)中確定H115屬于間接溶藻,且對數(shù)期后的H115溶藻物質(zhì)才能大量累計(jì),發(fā)揮較強(qiáng)的溶藻效果。本研究通過單因素法篩選出:碳源、氮源、溫度和發(fā)酵時間這四個因子對H115溶藻活性物質(zhì)的分泌影響較大;本研究采用U6(64)均勻設(shè)計(jì)表將上述四個因子進(jìn)行均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化,優(yōu)化結(jié)果為:(1)H115溶藻效率最優(yōu)組為:以2216 E為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加山梨醇:1.0%,peptone:2.0%,初始pH為7.5,發(fā)酵溫度40℃,搖床轉(zhuǎn)速200 rpm,發(fā)酵時間54 h;(2)H115的生長密度最優(yōu)組合為:山梨醇添加比例為1.5%,peptone:3.0%,發(fā)酵溫度24℃,發(fā)酵時間48h。本研究對優(yōu)化條件進(jìn)行5L、100L發(fā)酵罐的擴(kuò)大試驗(yàn),以藻菌個數(shù)比1:600添加,作用藻細(xì)胞4h時,5L發(fā)酵罐培養(yǎng)、100L發(fā)酵罐培養(yǎng)的溶藻效果分別達(dá)到:94.23%、97.08%,表明經(jīng)優(yōu)化后,H115可適用于大規(guī)模發(fā)酵,且溶藻能力得到提升。本研究采用噴霧干燥法,以H115發(fā)酵上清液為基礎(chǔ),按濃度梯度與佐料混合,制備五種不同比例的H115發(fā)酵上清粉劑:五種比例粉劑(50%、60%、70%、80%、90%)按一定比例作用藻液24h后的LD100分別為:0.33%、0.15%、0.13%、0.10%、0.10%;采用銳孔凝固浴法,研究制備了泡騰型的抑藻懸浮海藻酸鈉膠囊球。經(jīng)過單因素法優(yōu)化膠囊球后,當(dāng)膠囊球與血紅哈卡藻比例為1:100時,其作用16h的溶藻效果為73.32%,在24h達(dá)到100%,經(jīng)研究實(shí)驗(yàn),所制膠囊球通過緩慢釋放H115上清粉劑到藻液中,起到抑藻作用的同時能懸浮于液體表面,為赤潮的防治提供可能。
[Abstract]:The prevention and control of red tide algae by physical method, chemical method, the prevention and control of the overall effect is not up to expectations, and easy to produce two pollution, therefore the use of biological means, especially on prevention and control of harmful algae lysing bacteria gradually get attention. Studies on algicidal bacteria mainly concentrated in the algicidal mechanism active material, extraction, research related genes, algicidal bacteria immobilized algicidal substances, powder, capsule and application technology research is relatively few, this paper will Vibrioalginolyticus fermentation optimization, the fermentation supernatant obtained by spray drying of algicidal powder, suspension type capsule ball embedding system to adapt to the actual preparation of red tide prevention powder. The research of Vibrioalginolyticus H115 (H115) to explore the algicidal characteristics, determine the proportion of algae and bacteria 1:7000, 10min as the single factor optimization of algicidal effect in the condition; Study on the mode of H115 is an indirect algicidal algicidal experiment determined, and the logarithmic phase after H115 to a large number of algicidal substances accumulated, play a strong algicidal effect. This study screened by single factor method: carbon source, nitrogen source, temperature and fermentation time of these four factors affect the solubility of algicidal substances secretion this study uses U6 to H115; (64) uniform design table of the four factors of the uniform design method, the optimization results are as follows: (1) H115 algicidal efficiency optimal group: 2216 E as basic medium, adding sorbitol: 1%, peptone:2.0%, initial pH 7.5, fermentation temperature 40. Rotation speed of 200 RPM, fermentation time 54 h; (2) the optimal combination of growth density of H115 is: add sorbitol ratio of 1.5%, peptone:3.0%, fermentation temperature 24, fermentation time 48h. the study of 5L optimization conditions, expanding test of 100L fermentation tank, the number of algae bacteria than 1:600 added effect The algal cells 4h, 5L fermentation in 100L fermentor, the algae lysing effect respectively: 94.23%, 97.08%, show that after optimization, H115 can be applied to large scale fermentation, and the algae lysing ability has been improved. This study by spray drying method, using H115 based mixed fermentation supernatant, according to concentration gradient and seasoning H115, fermentation supernatant powder preparation of five different proportion: five ratio of powder (50%, 60%, 70%, 80%, 90%) according to a certain proportion of algae solution after 24h LD100 were 0.33%, 0.15%, 0.13%, 0.10%, 0.10%; the sharp hole bath method, effervescent type algal suspension study on the preparation of sodium alginate capsule ball. After optimization of capsule ball single factor method, when the ball capsule and blood red algae Haka ratio was 1:100, the effect of 16h on algicidal effect is 73.32%, reached 100% in 24h, the experimental results, the capsules prepared by the slow release of H115 ball to powder in the culture supernatant and to inhibition At the same time, the effect of algae can be suspended on the surface of the liquid, providing the possibility of the prevention and control of red tide.

【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：X55;TQ920.6

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本文編號：1369617