磷脂酶A1催化水解大豆油法制備甘油二酯及其固定化研究
發(fā)布時(shí)間:2018-03-09 11:00
本文選題:磷脂酶A1 切入點(diǎn):大豆油 出處:《暨南大學(xué)》2010年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】: 本文利用磷脂酶A1催化水解大豆油的方法,對(duì)水解后的產(chǎn)物采用兩步分子蒸餾法來制備富含甘油二酯的功能性油脂。并對(duì)磷脂酶A1的固定化作了初步探討。 該酶催化的最適pH值為6.8,在pH 4-8之間具有良好的穩(wěn)定性;最適溫度40℃,在低于45℃時(shí)具有良好的穩(wěn)定性;當(dāng)用0.1%的氯化鈣水溶液作為水解反應(yīng)物時(shí),和蒸餾水相比,鈣離子對(duì)于維持磷脂酶A1多次循環(huán)利用的殘余活力有促進(jìn)作用。水解反應(yīng)殘余活力的磷脂酶A1再加上50%的新添加酶,表現(xiàn)出很強(qiáng)的催化水解活力,酶回收使用6次時(shí),殘余酶活力仍然有初次使用活力的86.88%。 用分子蒸餾和柱層析的方法制備了大豆油甘油二酯(DAG)的標(biāo)準(zhǔn)樣品,通過高效液相-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-ESI-MS)和薄層色譜法(TLC)驗(yàn)證了標(biāo)準(zhǔn)樣品的純度。用反相高效液相色譜(RP-HPLC)在UV=210 nm做了大豆油DAG的標(biāo)準(zhǔn)曲線,在濃度范圍1.0-12.0 mg/mL,大豆油DAG標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。通過加樣回收試驗(yàn)表明,加樣回收率在104-109%之間,RSD在0.69-5.19%之間。并用該方法分析了大豆油、分子蒸餾DAG樣品中的DAG含量。 采用明膠包埋、戊二醛交聯(lián)雙重固定法固定磷脂酶A1后,固定化酶的穩(wěn)定催化水解效率為等量液態(tài)酶催化水解效率的30%左右;采用硅藻土吸附法來固定磷脂酶A1,固定化酶的穩(wěn)定催化水解效率僅為等量液態(tài)酶水解效率的33%左右;通過對(duì)六種型號(hào)大孔吸附樹脂的吸附能力進(jìn)行篩選后,選取D113型的樹脂作為后續(xù)深入研究固定化酶的載體材料。
[Abstract]:In this paper, the hydrolysis of soybean oil catalyzed by phospholipase A1 was used to prepare functional oil rich in diglyceride by two-step molecular distillation, and the immobilization of phospholipase A1 was preliminarily discussed. The optimum pH value of the enzyme is 6.8, and it has good stability between pH 4-8, the optimum temperature is 40 鈩,
本文編號(hào):1588235
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