中華民族擁有悠久的文明史,而絲綢是中國源遠(yuǎn)流長文化的象征之一,我國先民早在數(shù)千年前,就開始收集蠶繭用于繅絲織綢。絲綢的起源與傳播一直是研究熱點,但眾說紛紜下很難有準(zhǔn)確結(jié)論。絲綢擁有優(yōu)異的性能與華麗的外觀,是財富的象征,在古代常被用于陪葬。近年來,越來越多的絲織品被發(fā)掘出土,對這些絲織品文物進(jìn)行分析鑒定,可為追溯絲綢的起源和傳播提供重要信息。絲綢文物的主要成分是絲素蛋白,多種外界因素都能使其發(fā)生老化降解,導(dǎo)致出土樣品中往往絲素蛋白含量極低。因此,需要開發(fā)一種靈敏度高,特異性強(qiáng)的檢測手段來分析鑒定絲織品文物。本論文采用電化學(xué)免疫技術(shù),以絲素蛋白為完全抗原,制備特異性強(qiáng)的單克隆抗體,構(gòu)建免標(biāo)記型電化學(xué)免疫傳感器,用于鑒定現(xiàn)代蠶絲和絲綢文物樣,并與間接酶聯(lián)免疫（ELISA）法橫向比較,實現(xiàn)絲素蛋白的超靈敏檢測;同時制備尺寸粒度較均一的金納米顆粒（AuNPs）,基于AuNPs構(gòu)建了另一種電化學(xué)免疫傳感器,并與間接ELISA結(jié)合,用于分析多種蠶絲文物,進(jìn)一步提高了檢測靈敏度。首先,以桑蠶絲素蛋白為完全抗原,制備特異性鼠抗絲素蛋白單克隆抗體,基于單抗構(gòu)建了間接ELISA和免標(biāo)記型電化學(xué)免疫傳感器。采... 

【文章來源】：浙江理工大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?（Ａ）河南滎陽青臺遺址出土的羅織物殘片；（Ｂ）浙江錢山漾遺址出土的絲帛殘片??

浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文?基于電化學(xué)免疫技術(shù)的絲綢文物分析鑒定研宄??－＜〇－＜〇〇?ｏ??■■?－〇－＜〇?ｖ??Ｉ?？?４?＊??ｗＢｍ?４?＾?＾?ｍ?＾?＾８＊０＾??ｍ????Ｅ３?一??Ｉ?？ｔＸ＞ｉ５ＳＥ￥Ｓ－?ＷＷＷＷ??ＴＴｊＩＫ?ｗＯＯＯ?ｗｗｖｗ??Ｉ?Ｖ＾ＯＯＷｔＫｌＦ?〇ｒ．？〇．．＾??ｍｍｌｉｒａＭＴ??圖１．２電化學(xué)免疫傳感器示意圖??１．５金納米顆粒??金納米顆粒是直徑在１－ｌＯＯｎｍ的納米粒子，具有高電子密度、介電特性和催化作用，??生物相容性好［１Ｑ１－１Ｇ３］。由氯金酸還原法可制備不同粒徑的金納米顆粒，溶液顏色根據(jù)納米??顆粒的粒徑大小由紅色逐漸加深至紫色。金納米顆粒具有比表面積大、表面反應(yīng)活性高、??吸附能力強(qiáng)等優(yōu)點，可用于固載和標(biāo)記生物蛋白質(zhì)同時，金納米顆粒還具有良好的??氧化還原性能、光學(xué)性質(zhì)和生物催化特性。此外，金納米顆粒本身是一種納米活性材料，??同時金與巰基間能形成較強(qiáng)的金硫共價鍵，使金納米顆粒能與疏基丙酸一類的物質(zhì)高效結(jié)??合，再通過對端羧基的活化，達(dá)到固定蛋白質(zhì)的目的［｜＜）７，｜（）８１蛋白質(zhì)分子在不失活的前提??下，也可以通過靜電作用和疏水作用結(jié)合到金納米顆粒的表面。諸多的優(yōu)越性能使金納米??顆粒被應(yīng)用到各個領(lǐng)域［｜（）９＾。??１．６課題的提出和意義??中國擁有五千年的文明史，而絲綢是中國源遠(yuǎn)流長文化的象征之一。我國Ａ代先民早??在數(shù)千年前，就開始收集蠶繭用于繅絲織綢，中國也因此被認(rèn)為是絲綢的起源地。纖維類??織物的出現(xiàn)時間可以追溯到約三萬年前，絲織品的使用歷史則相對較短，目前出土年代最??早的絲麻織物，距今約５６００年。這些發(fā)掘�。亢幽锨�

浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文?基于電化學(xué)免疫技術(shù)的絲綢文物分析鑒定研宄??電化學(xué)工作站?ＣＨＩ?６６０Ｅ?上海辰華儀器有限公司??金電極?３ｍｍ?上海越磁電子科技有限公司??銷片電極?１＊１?ｃｍ２?上海越磁電子科技有限公司??萬能顯微鏡?ＶＡＮＯＸＡＨＢ－１?日本Ｏｌｙｍｐｕｓ公司??參比電極?１?上海辰華儀器有限公司??２．３實驗材料??２．３．１樣品介紹??本實驗分析鑒定的文物樣由中國絲綢博物館友情提供，其原貌如圖２．１所示。Ａ為從??廣東省南海一號考古遺址獲取的疑似含有絲綢微痕跡的土壤樣，Ｂ為浙江省安吉縣五福遺??址出土的絲織品殘片，Ｃ為新疆維吾爾自治區(qū)營盤遺址墓葬群出土的絲織品殘片。??同時，實驗用到的桑蠶繭樣品也由中國絲綢博物館提供，通過提取蠶繭中的桑蠶絲素??蛋白，以制備特異性高的單克隆抗體。??ＡＢＣ??ｌｃｍ?ｌｃｍ?ｌｃｍ??圖２？丨文物樣的原貌。（Ａ）南海一號土樣；（Ｂ＞安吉楚墓絲織品殘片；（Ｃ）營盤墓葬絲織品殘片??２．３．２溶液的配制??脫膠液：稱取５?ｇ碳酸鈉加入到１０００?ｍＬ去離子水中均勻攪拌，待其完全溶解后備用。??磷酸鹽緩沖液（ｐＨ?７．４）：稱�。埃�?ｇ氯化鉀，０．２７?ｇ磷酸二氫鉀，８?ｇ氯化鈉和１．４２?ｇ??磷酸氫二鈉加入到８００ｍＬ去離子水中均勻攪拌直至完全溶解后用容量瓶定容至１０００?ｍＬ，??調(diào)節(jié)溶液的ｐＨ至７．４，作為酶聯(lián)免疫法步驟中的洗滌液備用。??碳酸鹽緩沖液（ｐＨ９．６）：稱�。保担缣妓徕c和２．９ｇ碳酸氫鈉于８０（）ｍＬ去離子水中均??勻攪拌，直至完全溶解后用容量瓶定容至ｌ〇〇〇ｍＬ，調(diào)節(jié)溶液的ｐＨ至９．６，作為抗原包被??１

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]浙江湖州錢山漾遺址第三次發(fā)掘簡報[J]. 丁品.  文物. 2010(07)
[2]考察草原絲綢之路的法國人[J]. 耿昇.  北方民族大學(xué)學(xué)報(哲學(xué)社會科學(xué)版). 2009(06)
[3]絲綢之路古遺址保護(hù)[J]. 李最雄.  中國文化遺產(chǎn). 2004(03)
[4]絲素蛋白在生物材料上的研究和應(yīng)用[J]. 孔祥東,朱良均,閔思佳.  功能材料. 2001(06)
[5]滎陽青臺遺址出土絲麻織品觀察與研究[J]. 張松林,高漢玉.  中原文物. 1999(03)
[6]海上絲綢之路與廣州[J]. 張難生,葉顯恩.  中國社會科學(xué). 1992(01)
[7]羅布荒漠的自然特征和羅布泊的“游移”問題[J]. 趙松喬.  地理研究. 1983(02)
[8]中國歷史文物鑒定史略說[J]. 劉東瑞.  史學(xué)月刊. 1982(06)

博士論文
[1]食品中雙酚A檢測用新型電化學(xué)傳感器的研究[D]. 周玲.浙江大學(xué) 2014
[2]銀納米材料和金納米材料的植物生物質(zhì)還原制備及應(yīng)用初探[D]. 黃加樂.廈門大學(xué) 2009
[3]功能化金納米材料的合成、性質(zhì)及其在化學(xué)發(fā)光傳感器中的應(yīng)用研究[D]. 王偉.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2008
[4]禽流感與新城疫膠體金免疫層析快速檢測技術(shù)及初步應(yīng)用研究[D]. 彭伏虎.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]金納米棒的表面修飾及其生物識別的研究[D]. 王春剛.東北師范大學(xué) 2007
[6]新型酶聯(lián)熒光、電化學(xué)免疫及DNA傳感技術(shù)的研究[D]. 龔福春.湖南大學(xué) 2003
[7]我國幾種土壤中鐵錳結(jié)核的物質(zhì)組成與表面化學(xué)性質(zhì)[D]. 譚文峰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000

碩士論文
[1]基于納米Fe3O4@SiO2和功能化石墨烯檢測致病菌的4種免疫傳感器研究[D]. 馬駿爽.浙江工商大學(xué) 2017
[2]納米材料的無酶催化放大策略在電化學(xué)生物傳感器中的應(yīng)用研究[D]. 申文君.西南大學(xué) 2016
[3]基于單壁碳納米管/殼聚糖檢測赭曲霉毒素A的電化學(xué)免疫傳感器的構(gòu)建[D]. 張弦.重慶醫(yī)科大學(xué) 2015
[4]基于金屬溶膠表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)檢測飼料及水產(chǎn)品中呋喃唑酮和孔雀石綠的研究[D]. 余婉松.上海海洋大學(xué) 2015
[5]幾種納米材料相變的尺寸效應(yīng)[D]. 姜如.湘潭大學(xué) 2013
[6]人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與缺血性腦血管病的關(guān)系[D]. 陳仁玉.河北醫(yī)科大學(xué) 2013
[7]激光捕獲顯微切割純化的人正常支氣管上皮與肺鱗癌組織的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 許艷.中南大學(xué) 2011
[8]非晶碳及非晶碳化硅薄膜的制備及光學(xué)性能研究[D]. 邱毅嬌.電子科技大學(xué) 2011
[9]近紅外光譜尿液分析儀的原理及實現(xiàn)[D]. 劉薊.重慶大學(xué) 2011
[10]鴨肝炎病毒人工感染雛鴨病理發(fā)展規(guī)律及免疫組化與免疫熒光檢測病原侵染規(guī)律的研究[D]. 陳海軍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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