本文選題：法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)　切入點(diǎn)：尸食性蠅類　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】： 目的:研究石家莊地區(qū)夏秋季優(yōu)勢(shì)蠅種肥須亞麻蠅(Parasarcophaga crassipalpi)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律,探討溫度對(duì)幼蟲(chóng)頭咽骨及體內(nèi)非特異性酯酶(non-specific esterase, NSE)的影響,積累石家莊地區(qū)尸食性蠅類的發(fā)育生物學(xué)資料,為刑事調(diào)查推斷死后間隔時(shí)間(postmortem interval,PMI)提供科學(xué)依據(jù)。 方法: 1頭咽骨形態(tài)學(xué)觀察及測(cè)定: 在河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi)誘捕肥須亞麻蠅,帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)至第三代作為母代開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。設(shè)定生化培養(yǎng)箱的溫度依次為16℃、20℃、24℃、28℃、32℃,保持濕度和光周期恒定。在所有的溫度條件下,濕度、光周期和食物種類及數(shù)量不變。從幼蟲(chóng)孵出開(kāi)始,每隔12h留取一次標(biāo)本,每組每次留取10頭幼蟲(chóng),直至化蛹。幼蟲(chóng)用80℃熱水燙死,然后放入濃度為70%的甘油酒精中保存。從保存液中取出幼蟲(chóng)標(biāo)本后,吸干表面液體,放在培養(yǎng)皿上,用大頭針在幼蟲(chóng)腹部一側(cè)扎幾個(gè)小孔,放入10%的KOH溶液中消化內(nèi)部組織,24h后將幼蟲(chóng)從KOH溶液中取出,放在培養(yǎng)皿上用鑷子輕輕按壓幼蟲(chóng),直至將體內(nèi)已消化的組織排出。幼蟲(chóng)在清水中洗凈數(shù)遍后,在體視顯微鏡下分離出幼蟲(chóng)的頭節(jié),僅用于形態(tài)觀察的標(biāo)本依次用30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%的酒精中逐級(jí)脫水,最后用二甲苯透明,鏡下整姿后滴加拿大樹(shù)膠封片,置于陰涼處風(fēng)干。光學(xué)顯微鏡下觀察、拍照。用于進(jìn)行形態(tài)學(xué)指標(biāo)測(cè)定的標(biāo)本須將頭咽骨在體視顯微鏡下進(jìn)行對(duì)稱分離后再依以上過(guò)程制成封片標(biāo)本,利用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)頭咽骨的口鉤及咽骨的面積、骨化面積和平均光密度等多項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。 2幼蟲(chóng)體內(nèi)非特異性酯酶的測(cè)定: 將單只蠅幼蟲(chóng)用磷酸鹽緩沖液(PBS,PH6.8)洗滌三遍,用濾紙吸干后,分裝在Eppendorf管中,置于-20℃冰箱1h。將單只幼蟲(chóng)取出后,加入100μl PBS(PH6.8)冰浴勻漿,充分勻漿后再加入400μl PBS(PH6.8),12000r/ min 4℃離心10min,取上清液作為酶源。將100μl酶液加至96孔微量滴定板孔中,每孔再加100μlβ-乙酸萘酯溶液(β-naphthyl acetate,β-NA),在25℃條件下反應(yīng)10min,之后每孔再加100μl堅(jiān)固藍(lán)B鹽溶液(fast blue B salt),室溫反應(yīng)5min,立即在450nm波長(zhǎng)下讀取OD值。以上所有數(shù)據(jù)結(jié)果由SPSS 11.5軟件處理得出,相同溫度下各組指標(biāo)的變化進(jìn)行單因素方差分析,應(yīng)用Excel程序作圖。 結(jié)果: 1在恒定溫度下,隨著幼蟲(chóng)的發(fā)育,肥須亞麻蠅幼蟲(chóng)頭咽骨的顏色由淡黃色逐漸變?yōu)樽睾稚l(fā)展至最后的黑褐色,幾丁質(zhì)化程度不斷加強(qiáng),骨化的范圍不斷增大,并在三齡期發(fā)現(xiàn)點(diǎn)狀的附口骨。 2幼蟲(chóng)口鉤的面積隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈階段性增加,齡期更替時(shí)變化顯著,尤以二、三齡更替時(shí)最顯著。面積達(dá)到最大值后,隨時(shí)間的延長(zhǎng)基本維持不變。幼蟲(chóng)口鉤的平均光密度和骨化面積的變化趨勢(shì)和面積指標(biāo)相似,但一、二齡期內(nèi)變化較口鉤面積顯著�？阢^骨化度在每個(gè)齡期內(nèi)呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì),進(jìn)入新齡期后數(shù)值下降,開(kāi)始新的增長(zhǎng)過(guò)程。三齡初期口鉤骨化度幾乎達(dá)到100%,之后隨時(shí)間延長(zhǎng)無(wú)明顯變化�？阢^腹基角的變化趨勢(shì)與前三項(xiàng)指標(biāo)變化趨勢(shì)完全相反,隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈階段性下降,進(jìn)入三齡后幾乎立即達(dá)到最小角度,之后無(wú)明顯改變。 3幼蟲(chóng)咽骨面積的變化趨勢(shì)與口鉤面積的變化趨勢(shì)相同。但隨時(shí)間的延長(zhǎng)16℃至32℃各組幼蟲(chóng)咽骨的平均光密度和骨化面積呈現(xiàn)持續(xù)性增加的趨勢(shì),并一直保持到三齡結(jié)束,是推測(cè)PMI的理想指標(biāo)。在不同溫度下,兩者的發(fā)育速率與溫度成正比,隨溫度升高而加快,齡期越短平均光密度和骨化面積達(dá)到最大值的時(shí)間就越短。咽骨骨化度的變化趨勢(shì)與口鉤骨化度變化相似,但進(jìn)入三齡后咽骨骨化度曲線無(wú)平臺(tái)期,而是一直保持遞增的趨勢(shì)至三齡結(jié)束,三齡末咽骨骨化度的最大值要比此時(shí)對(duì)應(yīng)口鉤骨化度的最大值小。 4在供試的五種恒定溫度下,各組幼蟲(chóng)非特異性酯酶活性(OD值)隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈階段性增加。一齡到二齡的變化趨勢(shì)較平緩,二齡到三齡的曲線變化明顯。三齡初期OD值仍保持上升趨勢(shì),三齡中后期OD值有所下降,但仍明顯高于二齡期幼蟲(chóng)OD的最大值。 結(jié)論: 1肥須亞麻蠅幼蟲(chóng)的發(fā)育隨溫度的升高而加快。在恒定溫度下,隨時(shí)間延長(zhǎng)幼蟲(chóng)頭咽骨顏色由淡黃色逐漸變?yōu)樽睾稚磷詈蟮暮诤稚?幾丁質(zhì)化程度不斷加強(qiáng),骨化的范圍不斷增大,并在三齡期出現(xiàn)點(diǎn)狀的附口骨。 2幼蟲(chóng)口鉤的面積、平均光密度和骨化面積隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,齡期更替時(shí)變化顯著,但進(jìn)入三齡達(dá)到最大值后變化不明顯�？阢^骨化度在每個(gè)齡期內(nèi)隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,進(jìn)入新的齡期數(shù)值立即下降開(kāi)始新的增長(zhǎng)過(guò)程�？阢^腹基角隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈階段性下降,進(jìn)入三齡后幾乎立即達(dá)到最小角度,隨時(shí)間延長(zhǎng)無(wú)明顯改變。 3幼蟲(chóng)咽骨面積的變化趨勢(shì)與口鉤面積的變化趨勢(shì)相同。但隨時(shí)間的延長(zhǎng)咽骨骨化面積和平均光密度呈現(xiàn)持續(xù)性增加的趨勢(shì),并一直保持到三齡結(jié)束,是推測(cè)PMI的理想指標(biāo)。咽骨骨化度的變化趨勢(shì)與口鉤骨化度變化相似,但進(jìn)入三齡后該值依然保持遞增的趨勢(shì),且最大值比對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的口鉤骨化度的最大值小。 4幼蟲(chóng)非特異性酯酶活性(OD值)在不同齡期間呈階段性增長(zhǎng),一齡到二齡的變化趨勢(shì)較平緩,二齡到三齡的曲線變化明顯。三齡初期OD值仍保持上升趨勢(shì),三齡中后期OD值有所下降,但仍明顯高于二齡期幼蟲(chóng)OD的最大值。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：D919

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 殷京珍;鄭州地區(qū)尸食性蠅類生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律及其產(chǎn)卵習(xí)性的研究[D];鄭州大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1629888