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體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選人髓樣乳腺癌Bcap-37細胞特異性結(jié)合肽及其性質(zhì)、結(jié)合效果研究

發(fā)布時間:2021-04-10 16:31
  目的 探討體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)篩選的人髓樣乳腺癌Bcap-37細胞特異性結(jié)合肽的性質(zhì)和結(jié)合效果,為乳腺癌早期診斷提供分子靶向探針。方法 制備人髓樣乳腺癌Bcap-37細胞荷瘤裸鼠模型,采用噬菌體環(huán)七肽庫進行3輪體內(nèi)篩選。免疫組織化學法檢測篩選的噬菌體在腫瘤及正常組織中的分布情況。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)鑒定單克隆噬菌體對Bcap-37細胞的親合力。提取陽性單克隆噬菌體DNA并測序,選取重復率高的序列合成多肽,制備光學分子探針,應用熒光分子成像驗證合成的多肽在荷瘤小鼠體內(nèi)對乳腺移植瘤的特異性和靶向性。結(jié)果 第3輪體內(nèi)篩選的噬菌體回收率為第1輪的107.2倍。免疫組織化學結(jié)果顯示,隨篩選輪次增加,腫瘤組織中結(jié)合的噬菌體依次增加;腫瘤組織結(jié)合的噬菌體多于正常組織(肺臟、骨骼肌、肝臟、腎臟),腫瘤組織切片掃描圖像的吸光度(A)值均較正常組織高,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。ELISA結(jié)果顯示,隨機選取的50個單克隆噬菌體中,22個為陽性(親合力≥2)。陽性單克隆噬菌體DNA測序分析后,得到4條有重復的氨基酸序列,選擇重復率最高的氨基酸序列CSPLNTRFC,化學合成異硫氰酸熒... 

【文章來源】:腫瘤研究與臨床. 2020,(02)

【文章頁數(shù)】: 頁


本文編號:3129966

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