發(fā)布時間：2021-03-09 10:21

　　特基拉芽胞桿菌（Bacillus tequilensis）B05是1株能顯著提高小麥、玉米耐鹽、耐旱能力的根際優(yōu)良菌株,為提高其擴(kuò)繁效率及使用效果,降低使用成本,以發(fā)酵液活菌數(shù)為指標(biāo),采用單因子預(yù)篩選和正交試驗方法對菌株發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,在10 L發(fā)酵罐水平上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。結(jié)果表明,菌株B05最適發(fā)酵培養(yǎng)基（質(zhì)量與體積分?jǐn)?shù)）為麥芽浸粉1%、酵母浸粉2%、胰蛋白胨2%、復(fù)合無機(jī)鹽0.3%（質(zhì)量比為KH₂PO₄:K₂HPO₄:MnSO₄·H₂O=1:1:1）。最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度30℃、初始pH 6.5、搖床轉(zhuǎn)速200 r/min、接種量7%、裝液量40%,培養(yǎng)18 h菌液活菌數(shù)可達(dá)9.3×10¹⁰ cfu/mL,較優(yōu)化前活菌數(shù)量提高了兩個數(shù)量級。在含鹽0.4%的鹽堿土壤上進(jìn)行了小麥盆栽試驗,較空白對照植株生物量提高45.8%。 

【文章來源】：微生物學(xué)雜志. 2019,39(01)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同碳源對菌株B05發(fā)酵的影響

法進(jìn)行;用鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較。2結(jié)果與分析2．1不同碳源對菌株B05液體發(fā)酵的影響由圖1可知，不同碳源對菌株B05活菌量均有一定影響，以麥芽浸粉為碳源的發(fā)酵液活菌量和芽胞數(shù)最大，分別為7．5×108cfu/mL和5．5×108cfu/mL，其次為可溶性淀粉和玉米淀粉，其他碳源發(fā)酵水平較低。因此選用麥芽浸粉作為培養(yǎng)基碳源。圖1不同碳源對菌株B05發(fā)酵的影響Fig．1EffectsofdifferentcarbonsourcesonthefermentationofBacillustequilensisB052．2不同氮源對菌株B05液體發(fā)酵水平的影響圖2結(jié)果表明，使用酵母浸粉菌株B05的活菌量和芽胞數(shù)最多，分別為7．43×108和5．8×108cfu/mL，其次為蛋白胨和胰蛋白胨，且兩者間無顯著性差異，并且兩者的芽胞數(shù)較其對應(yīng)的活菌數(shù)較高，其他無機(jī)氮源發(fā)酵水平較低。因此從營養(yǎng)成分的互補和節(jié)約成本考慮，選用胰蛋白胨、酵母浸粉作為培養(yǎng)基氮源。圖2不同氮源對菌株B05發(fā)酵的影響Fig．2EffectsofdifferentnitrogensourcesonthefermentationofBacillustequilensisB052．3不同無機(jī)鹽對菌株B05發(fā)酵水平的影響由圖3可知，以麥芽浸粉為碳源，酵母浸粉、胰蛋白胨為氮源，不同無機(jī)鹽對菌株B05活菌數(shù)的影響不同。添加MnSO4·H2O的組別，其活菌數(shù)和芽胞數(shù)分別為5．5×108和4．4×108cfu/mL，芽胞生成率最高;添加復(fù)合鹽(質(zhì)量比)KH2PO4?K2HPO4?MnSO4·H2O=1?1?1的組別，活菌數(shù)和芽胞數(shù)顯著高于其他無機(jī)鹽類，分別為1．1×109cfu/mL和8．1×108cfu/mL，其余組別較低�？梢奒H2PO4與K2HPO4兩者利于細(xì)胞生長，MnSO4·H2O對芽胞形成有促進(jìn)作?

躍??B05液體發(fā)酵水平的影響圖2結(jié)果表明，使用酵母浸粉菌株B05的活菌量和芽胞數(shù)最多，分別為7．43×108和5．8×108cfu/mL，其次為蛋白胨和胰蛋白胨，且兩者間無顯著性差異，并且兩者的芽胞數(shù)較其對應(yīng)的活菌數(shù)較高，其他無機(jī)氮源發(fā)酵水平較低。因此從營養(yǎng)成分的互補和節(jié)約成本考慮，選用胰蛋白胨、酵母浸粉作為培養(yǎng)基氮源。圖2不同氮源對菌株B05發(fā)酵的影響Fig．2EffectsofdifferentnitrogensourcesonthefermentationofBacillustequilensisB052．3不同無機(jī)鹽對菌株B05發(fā)酵水平的影響由圖3可知，以麥芽浸粉為碳源，酵母浸粉、胰蛋白胨為氮源，不同無機(jī)鹽對菌株B05活菌數(shù)的影響不同。添加MnSO4·H2O的組別，其活菌數(shù)和芽胞數(shù)分別為5．5×108和4．4×108cfu/mL，芽胞生成率最高;添加復(fù)合鹽(質(zhì)量比)KH2PO4?K2HPO4?MnSO4·H2O=1?1?1的組別，活菌數(shù)和芽胞數(shù)顯著高于其他無機(jī)鹽類，分別為1．1×109cfu/mL和8．1×108cfu/mL，其余組別較低�？梢奒H2PO4與K2HPO4兩者利于細(xì)胞生長，MnSO4·H2O對芽胞形成有促進(jìn)作用。因此選擇KH2PO4?K2HPO4?MnSO4·H2O=1?1?1作為培養(yǎng)液的無機(jī)鹽(圖3)。圖3不同無機(jī)鹽對菌株B05發(fā)酵的影響Fig．3EffectsofdifferentinorganicelementsonthefermentationofBacillustequilensisB051期張翠綿等:特基拉芽胞桿菌B05高密度發(fā)酵培養(yǎng)基與發(fā)酵條件優(yōu)化16

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