紫草寧及衍生物（后統(tǒng)稱(chēng)紫草寧）是紫草根部的紅色提取物,主成分為萘醌類(lèi)。不僅能用于治療創(chuàng)傷、燒傷、痔瘡等皮膚性疾病,還具有抗炎殺菌、抗病毒、抗腫瘤等作用。因此,提高紫草寧產(chǎn)量有很大的市場(chǎng)價(jià)值和應(yīng)用前景,而其合成及調(diào)控的機(jī)制研究是一重大突破口。紫草寧生物合成上游的兩條主要途徑——甲羥戊酸（Mevalonate,MVA）途徑和苯丙素類(lèi)（Phenylpropanoids,PP）途徑目前已基本明確,但合成下游的部分反應(yīng)尚不清楚,尤其是3-羥基對(duì)苯二酚香葉醌向紫草寧轉(zhuǎn)化所涉及到的反應(yīng)機(jī)制。本課題組前期的轉(zhuǎn)錄研究中發(fā)現(xiàn)一個(gè)基因——8-HGO,其在紫草生長(zhǎng)培養(yǎng)基B5中表達(dá)量低,但在紫草寧合成培養(yǎng)基M9中高表達(dá)。大量文獻(xiàn)表明,8-HGO編碼的8-羥香葉醇脫氫酶（8-hydroxygeraniol dehydrogenase,8-HGO）,在許多次生代謝產(chǎn)物的環(huán)烯醚萜合成途徑中發(fā)揮關(guān)鍵脫氫作用。因此,本實(shí)驗(yàn)試圖克隆該基因并解析8-HGO在紫草寧合成調(diào)控中的功能�；谟沧喜莸霓D(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,我們獲得8-HGO的原始c DNA序列,利用生信軟件分析8-HGO的蛋白理化性質(zhì),預(yù)測(cè)其蛋白二三級(jí)結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示:8-H...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.2紫草寧的合成途徑[26]

MVA途徑產(chǎn)生的GPP和PP途徑產(chǎn)生的PHB會(huì)在對(duì)羥基苯甲酸香葉基轉(zhuǎn)移酶(p-hydroxybenzoategeranyltransferase,PGT)的催化下形成香葉基-對(duì)羥基苯甲酸(m-geranyl-p-hydroxybenzoicacid,GBA),再通過(guò)一系列酶促....

圖1.3紫草寧合成調(diào)控相關(guān)酶[29](→→表示多步合成)

紫草寧主要分布在紫草細(xì)胞壁的疏水微滴中,其合成不僅受合成通路上相關(guān)酶的調(diào)控[27],還受到其他調(diào)控基因的影響�；谧喜輰幒铣傻腗VA和PP途徑,研究者陸陸續(xù)續(xù)探究并鑒定了許多相關(guān)的酶[28],如MVA途徑上的甲戊二羥酸單酰輔酶A還原酶(HMGR);PP途徑上的苯丙氨酸脫氨酶(PA....

圖1.4環(huán)烯醚萜生物合成[73]

香葉基焦磷酸合酶(GPPS)可催化1分子IPP與DMAPP形成香葉基焦磷酸,然后在香葉醇合酶的催化下生成環(huán)烯醚萜合成的前體物質(zhì)——香葉醇(geraniol)。經(jīng)過(guò)脫氫反應(yīng),然后在不同酶催化下生成不同的產(chǎn)物。如長(zhǎng)春花中CrG10H可催化香葉醇生成10-羥基香葉醇,而G8H酶則催化其....

圖1.5 8-HGO的催化機(jī)制[74]

目前,8-HGO已從長(zhǎng)春花、川西獐牙菜、喜樹(shù)以及滇龍膽等植物中分離得到。其中在長(zhǎng)春花中的機(jī)制最為清楚。如圖1.5,8-HGO(Caros003452)在NAD+存在且以8-羥基香葉醇(8-Hydroxygeraniol),8-羥基香葉醛(8-hydroxygeranial)和8-....

本文編號(hào)：4045446