丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge),為唇形科鼠尾草屬的雙子葉草本植物,是我國傳統(tǒng)中草藥之一,主要用于心腦血管疾病的治療。心腦血管疾病發(fā)病率極高,是引起人類死亡的頭號(hào)殺手,這導(dǎo)致丹參的市場(chǎng)需求量極大。但是,野生丹參資源枯竭,人工種植的丹參產(chǎn)量下降、品質(zhì)降低,這使得丹參市場(chǎng)面臨供不應(yīng)求的尷尬境地。利用基因工程等生物技術(shù)來提高丹參中有效成分的產(chǎn)量是行之有效的方法之一。WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物界中廣泛存在,是植物界中最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一。因其特殊的保守結(jié)構(gòu)域WRKYGQK而得名。WRKY轉(zhuǎn)錄因子通常參與到植物的抗逆途徑。近期,有報(bào)道表明WRKYs還參與調(diào)節(jié)次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成。本研究首先采用生物信息學(xué)手段,通過分析本實(shí)驗(yàn)室的Methyl jasmonate(MJ)誘導(dǎo)丹參轉(zhuǎn)錄組庫,獲得一條響應(yīng)MJ的WRKY類基因,并克隆得到該基因ORF序列。將該序列輸入NCBI網(wǎng)站中,發(fā)現(xiàn)其與已報(bào)道的丹參SmWRKY9同源性最高(98%),故將其命名為SmWRKY9。組織表達(dá)譜結(jié)果顯示SmWRKY9在丹參的主根中表達(dá)量最高。激素誘導(dǎo)表達(dá)譜結(jié)果表明,SmWRKY9受到MJ和Yeast ext...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1-1迷迭香酸化學(xué)結(jié)構(gòu)

丹酚酸B、迷迭香酸、丹參素等。最新實(shí)驗(yàn)研究證明，丹記憶功能障礙、肝纖維化、肝癌、以及艾滋病等也具有香酸酸（Rosmarinicacid）是在各類植物中廣泛存在的一種次生科和紫草科植物中含量較高（易博等，2007）。迷迭香酸示，其中鄰二酚羥基具有清除自由基活性的作用，而且強(qiáng)其效應(yīng)....

圖1-2丹酚酸B化學(xué)結(jié)構(gòu)

圖1-2丹酚酸B化學(xué)結(jié)構(gòu)的生物合成酸類物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上多屬于多聚酚酸，而多聚酚酸類化其中丹參素（β-3,4-二羥基苯乳酸）的結(jié)構(gòu)，被認(rèn)為基本化學(xué)結(jié)構(gòu)。迷迭香酸在結(jié)構(gòu)上屬于丹參素與咖迷迭香酸的二聚體，可由3分子丹參素和1分子咖啡認(rèn)為迷迭香酸可能為其他更為復(fù)雜丹酚酸類物0....

圖IVian0I湯仁日C記B

圖1-3丹酚酸生物合成途徑（Sunetal.,2019）類激素激素（jasmonates,JAs）主要包括茉莉酸（JA）和茉莉是一種植物體內(nèi)受外界刺激后反應(yīng)最快的激素（王methyljasmonate,MJ）首次在1962年從大花茉

圖2-1pHB-SmWRKY9-YFP載體圖

圖2-1pHB-SmWRKY9-YFP載體圖目的片段的擴(kuò)增：建成功的18T-SmWRKY9質(zhì)粒為模版進(jìn)行高保真擴(kuò)增目的片段，擴(kuò)。pHB-YFP大片段的獲得：生工提質(zhì)粒試劑盒提取pHB-YFP質(zhì)粒，方法如下：2mL的菌液于2mL的EP管中，12000rp....

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