天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當(dāng)前位置:主頁(yè) > 理工論文 > 生物學(xué)論文 >

不同調(diào)控元件及組合對(duì)煙草外源蛋白瞬時(shí)表達(dá)的效果分析

發(fā)布時(shí)間:2025-01-17 11:05
   植物瞬時(shí)表達(dá)是一種高效快速獲得外源基因表達(dá)的方法,該系統(tǒng)主要應(yīng)用于蛋白互作研究、調(diào)控元件功能分析、蛋白亞細(xì)胞定位和蛋白制劑合成等方面。為了進(jìn)一步提高外源基因在瞬時(shí)表達(dá)體系中穩(wěn)定表達(dá)效果,本研究對(duì)瞬時(shí)表達(dá)載體的多種作用元件及轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化。首先,我們?cè)谀壳白畛S玫碾p元表達(dá)載體pCambia1300骨架上,分別添加可增強(qiáng)特異性轉(zhuǎn)錄和穩(wěn)定蛋白表達(dá)的新的調(diào)控元件,構(gòu)建pREU-EF、pREUR-EF和pREUR-p24-EF重組表達(dá)載體,并且通過(guò)定性和定量方法分析不同元件組合、不同菌液濃度對(duì)報(bào)告基因eGFP表達(dá)的影響。激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果證明3個(gè)重組載體可在煙草葉片的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中快速表達(dá)報(bào)告基因;定量PCR分析表明3個(gè)重組載體中報(bào)告基因在轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平上分別比原pCambia1301-eGFP載體提高了4倍、20倍和28倍;蛋白水平分析表明煙草葉片轉(zhuǎn)化48 h后,pREUR-EF外源蛋白表達(dá)量明顯高于pREU-EF;并且當(dāng)菌液注射液濃度OD600=0.4左右時(shí),外源蛋白的表達(dá)效率最高。此外,我們還進(jìn)一步把改造后的瞬時(shí)表達(dá)重組載體運(yùn)用到雙熒光素酶(Dual-...

【文章頁(yè)數(shù)】:10 頁(yè)

【部分圖文】:

圖1 重組表達(dá)載體構(gòu)建及驗(yàn)證

圖1 重組表達(dá)載體構(gòu)建及驗(yàn)證

根據(jù)1.2.3實(shí)驗(yàn)方法分別將pREU-EF、pREUR-EF和pREUR-p24-EF3個(gè)重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化煙草葉片,48h后,利用激光共聚焦顯微鏡分析煙草葉片中報(bào)告基因GFP的表達(dá)情況。結(jié)果(圖2)表明,在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、細(xì)胞膜中均能觀察到GFP的表達(dá),初步說(shuō)明構(gòu)建的3個(gè)瞬時(shí)....


圖2 重組表達(dá)載體侵染后煙草葉片中GFP表達(dá)分析

圖2 重組表達(dá)載體侵染后煙草葉片中GFP表達(dá)分析

圖1重組表達(dá)載體構(gòu)建及驗(yàn)證2.3作用元件組合與目標(biāo)蛋白表達(dá)相關(guān)性分析


圖4 對(duì)比分析不同注射液濃度對(duì)pREUR-EF載體中報(bào)告基因GFP表達(dá)的影響

圖4 對(duì)比分析不同注射液濃度對(duì)pREUR-EF載體中報(bào)告基因GFP表達(dá)的影響

為驗(yàn)證改造的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)是否可以用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控Dual-Luciferase分析,將擬南芥花藥特異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子AtMYB80和AMS(ABORTEDMICROSPORES)分別連入pREUR-EF載體,來(lái)驗(yàn)證AtMYB80對(duì)其下游基因天冬氨酸蛋白酶UNDEAD轉(zhuǎn)錄調(diào)控關(guān)系。Ef....


圖5 轉(zhuǎn)錄因子MYB80對(duì)UNDEAD的調(diào)控分析

圖5 轉(zhuǎn)錄因子MYB80對(duì)UNDEAD的調(diào)控分析

植物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)具有廣泛應(yīng)用,既可以用于快速研究基因功能,也可以用于獲取重組蛋白。已有研究表明,目的蛋白性質(zhì)、宿主、表達(dá)載體系統(tǒng)、密碼子偏好性、轉(zhuǎn)化條件等因素都會(huì)影響外源蛋白表達(dá)[4]。表達(dá)載體系統(tǒng)中各作用元件的優(yōu)化一直是進(jìn)一步提高外源蛋白的研究熱點(diǎn)。在本研究中,我們挖掘和比較文....



本文編號(hào):4027977

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/swxlw/4027977.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶6b58e***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要?jiǎng)h除請(qǐng)E-mail郵箱bigeng88@qq.com
日本美国三级黄色aa| 欧美色欧美亚洲日在线| 六月丁香六月综合缴情| 精品人妻一区二区三区四在线 | 日韩精品日韩激情日韩综合| 日本欧美一区二区三区高清| 午夜视频成人在线免费| 亚洲中文在线中文字幕91| 亚洲欧美日韩中文字幕二欧美| 亚洲熟妇熟女久久精品 | 亚洲精品一二三区不卡| 久久天堂夜夜一本婷婷| 免费精品一区二区三区| 亚洲午夜精品视频观看| 国产欧美日韩精品成人专区| 欧美日韩最近中国黄片| 91欧美亚洲精品在线观看| 午夜精品福利视频观看| 精品推荐久久久国产av| 日韩1区二区三区麻豆| 国产传媒一区二区三区| 国产在线视频好看不卡| 夫妻性生活动态图视频| 国产亚洲系列91精品| 免费精品一区二区三区| 中文字幕一区二区免费| 日韩一本不卡在线观看| 黄色国产一区二区三区| 免费在线播放一区二区| 一区二区三区精品人妻| 国产视频福利一区二区| 内用黄老外示儒术出处| 亚洲国产av一二三区| 精品人妻一区二区三区四在线| 91人妻久久精品一区二区三区| 欧美成人黄色一区二区三区| 欧洲日韩精品一区二区三区| 国产精品99一区二区三区| 都市激情小说在线一区二区三区| 欧美六区视频在线观看| 久久精品国产亚洲av麻豆|